Phase I/Ib, Multi-center, Open-label, Study of Single Agent CJM112, and PDR001 in Combination With LCL161 or CJM112 in Patients With Relapsed and/or Refractory Multiple Myeloma

The purpose of this study is to assess the safety, tolerability, and identify the recommended doses of single agent CJM112, and of CJM112 or LCL161 in combination with PDR001, in patients with relapsed and/or refractory multiple myeloma.

开始日期2017-12-18

申办/合作机构

Novartis Pharmaceuticals Corp.

NCT02890069

/ Completed临床1期

Phase Ib, Open-label, Multi-center Study to Characterize the Safety, Tolerability and Pharmacodynamics (PD) of PDR001 in Combination With LCL161, Everolimus (RAD001) or Panobinostat (LBH589)

The purpose of this study was to combine the PDR001 checkpoint inhibitor with several agents with immunomodulatory activity to identify the doses and schedule for combination therapy and to preliminarily assess the safety, tolerability, pharmacological and clinical activity of these combinations.

开始日期2016-10-14

申办/合作机构

Novartis Pharmaceuticals Corp.

NCT02649673

/ Terminated临床1期

Phase Ib Dose-Escalation Study of LCL161 in Combination With Oral Topotecan for Patients With Relapsed/Refractory Small Cell Lung Cancer (SCLC) and Select Gynecologic Malignancies

This trial will investigate the combination of two anti-cancer agents to treat patients with relapsed/refractory small cell lung cancer (SCLC) and ovarian cancers. Oral topotecan has US FDA approval for treating select gynecological cancers and SCLC. LCL161 is an investigational product that has been shown in clinical trials to work together with other anti-cancer agents. In this trial, investigators will determine the optimal dose of LCL161 and topotecan to administer to patients with relapsed/refractory SCLC and ovarian cancers, and examine the safety profile of the drug combination.

开始日期2016-03-23

申办/合作机构

Scri Development Innovations LLC

[+1]

100 项与 LCL-161 相关的临床结果

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156

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2026-05-01·IMMUNOBIOLOGY

A novel mitochondrial-related signature to decode tumor immunity and predict survival in chromophobe renal cell carcinoma

Article

作者: Zhong, Liang ; Dai, Congcong ; Wei, Liandong ; Huang, Shuting ; Ou, Jun ; Li, Yong ; Liao, Zuosen ; Wen, Zhonghua ; Wei, Miaoling ; Mu, Suwan ; Li, Xia ; Wei, Liuqing

Chromophobe renal cell carcinoma (chRCC) comprises about 5%-10% of all renal cancer cases, some of which are aggressive and metastatic. Mitochondria are significantly activated in chRCC, however, a risk model based on mitochondrial-related genes for chRCC has not been constructed to date. We constructed a novel mitochondrial-related risk model consisting of TIMM8A, RECQL4, MTERF1, and DUS2. Our model highlighted distinct immune infiltration patterns between the different risk groups. Moreover, the TME signature genes and immune regulatory factors were significantly associated with the risk scores. Combining the risk score with immune/stromal score and TMB can improve the accuracy of the risk model in patient stratification and prognosis prediction. Notably, our computational analysis based on GDSC's pRRophetic algorithm suggests that LCL161 and UMI-77 may be more effective in the low-risk group, while sapitinib and luminespib show potential efficacy in the high-risk group. In conclusion, our study indicates this model holds high promise as a reliable biomarker for outcome prediction and precision-medicine stratification in chRCC patients.

2026-05-01·Acta Pharmaceutica Sinica B

Inhalational therapy of pulmonary infection via macrophage-targeted nanoemulsions

Article

作者: Zhang, Yunming ; Zhu, Guonian ; Sun, Xun ; Zhang, Yongshun ; Du, Guangsheng ; Yang, Lan ; Xie, Zhiqiang ; Wang, Chengdi ; Wang, Hairui ; Xian, Jinghong ; Zhou, Yehui ; Li, Teng ; Li, Weimin

The dynamic immune landscape within the tuberculous (TB) granuloma microenvironment critically governs antibiotic penetration efficiency, bacterial persistence, and long-term therapeutic outcomes. Herein, we present a macrophage-targeted inhalable nanoemulsion for co-delivering rifampicin and LCL161, an inhibitor of apoptosis protein antagonist. Inhaled mannose-nanoemulsions (named RL-NE@Man) enable granuloma-targeted delivery in TB mice model, increasing infected macrophage apoptosis, remodeling the tuberculosis microenvironment, and promoting T-cell immunity to synergize with antibiotics for the eradication of granulomas and persistent Mycobacterium tuberculosis infection. Following two-dose inhalational administration, RL-NE@Man displayed potent bactericidal activity against M. tuberculosis while concurrently alleviating pulmonary pathological lesions and hyperinflammatory responses, demonstrating superior bacterial suppression efficacy compared with that of the first-line rifampicin monotherapy. This inhaled combination therapy, which integrates immunomodulators with antibiotics to modulate the local immune landscape and synergistically enhance bactericidal efficacy, represents a novel therapeutic strategy for precision tuberculosis management.

2026-02-01·LEUKEMIA

BET inhibitor-based combinations targeting novel dependencies in MECOM-rearranged (r) AML

Article

作者: Ceribelli, Michele ; Bhalla, Kapil N ; Hou, Hanxi ; Pourebrahim, Rasoul ; Kadia, Tapan M ; DiNardo, Courtney D ; Fiskus, Warren ; Malovannaya, Anna ; Birdwell, Christine E ; Das, Kaberi ; Sasaki, Koji ; Su, Xiaoping ; Flores, Lauren B ; Mill, Christopher P ; Daver, Naval ; Davis, John A ; Jain, Antrix ; Yuan, Selina

MECOM rearrangement in AML involves either inv(3)(q21;q26.2) or t(3;3)(q21;q26.2), where the dislocated GATA2 enhancer drives overexpression of the transcriptional regulator EVI1, causes concomitant GATA2 repression, and promotes AML progression, aggressive phenotype and therapy refractoriness. Treatment with BET protein inhibitor (BETi) induces in vitro and in vivo efficacy in MECOM-r AML cells. Utilizing an unbiased, high-throughput drug screen, focused on mechanistically-annotated drugs, we identified BRD4, PIK3CA, mTOR, BCL-xL and XIAP as dependencies in the MECOM-r AML cells. Monotherapy with mivebresib (BETi), dactolisib (PI3K/mTORi) and LCL161 (IAPi) dose-dependently induced greater lethality in PD MECOM-r versus non-MECOM-r AML cells. RNA-Seq and/or mass spectrometry analyses revealed that treatment with mivebresib or dactolisib downregulated MYC-targets and cell-cycle gene-sets whereas CyTOF and Western analyses also demonstrated reduction in the protein levels of EVI1, c-Myb, c-Myc in MECOM-r AML cells. Combination of mivebresib and dactolisib or LCL161 synergistically induced apoptosis. In a MECOM-r AML PDX model, mivebresib with dactolisib or LCL161, was superior to monotherapy or vehicle in reducing AML burden and increasing mouse survival. These findings highlight that cotreatment with BETi and PI3K/mTOR or IAP inhibitor exerts superior in vitro and in vivo efficacy in MECOM-r AML cells and support further evaluation of these BETi-based combinations.

项与 LCL-161 相关的新闻（医药）

2026-06-26

·大橡科技

STTT｜让耐药乳腺癌细胞"自爆"，竟能拉响干扰素警报、唤醒NK细胞？类器官揭示坏死性凋亡或是免疫治疗新策略

点击蓝字关注我们乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤，患者来源的乳腺癌类器官（hMOs）正成为研究化疗耐药与程序性细胞死亡（PCD）抵抗的转化医学工具。坏死性凋亡（necroptosis）是一种裂解性、高免疫原性的细胞死亡方式，可绕过凋亡抵抗并激活抗肿瘤免疫，但仍缺乏理想的人源化模型来系统研究。近日，德国van Wijk研究团队在《Signal Transduction and Targeted Therapy》（IF 52.7）发表研究，利用转移性乳腺癌患者来源hMOs建立了刻画PCD与炎症信号的转化平台。该团队此前已证实LUBAC参与调控胰腺类器官中的坏死性凋亡，本研究通过Smac mimetics诱导凋亡、并在联合泛caspase抑制剂Emricasan模拟凋亡抵抗后，诱导hMOs转向坏死性凋亡；结合单细胞CITE-seq、活死染色及细胞因子检测，刻画了坏死性凋亡相关的炎症性干扰素signature及其对NK细胞活化的影响。研究发现，坏死性凋亡可触发I/II型干扰素应答signature显著上调及炎症介质释放，并使NK细胞出现干扰素相关预激活特征；LUBAC抑制剂HOIPIN-8可有效减弱上述过程，提示Smac mimetic诱导的坏死性凋亡是潜在的乳腺癌免疫治疗策略。 01 研究亮点 Research Highlights 模型创新：搭建患者来源转移性乳腺癌类器官平台，保留患者来源肿瘤/转移病灶异质性与分子特征，可模拟凋亡抵抗、坏死性凋亡及炎症反应，填补传统细胞系与动物模型间的转化研究空白，支持个体化药敏筛选。通路验证：证实Smac模拟物诱导凋亡的基础上，caspase抑制可触发RIPK1-RIPK3-MLKL介导的坏死性凋亡，为凋亡耐药乳腺癌提供非caspase依赖的治疗新路径。免疫突破：首次在患者源类器官中发现坏死性凋亡激活干扰素信号通路，上调炎症因子分泌并诱导NK细胞活化，为肿瘤免疫联合治疗提供机制依据。靶点发现：结果提示LUBAC介导的线性泛素化参与调控MLKL磷酸化下游的坏死性凋亡执行过程，其抑制剂HOIPIN-8可延缓细胞死亡、降低炎症介质表达和分泌，为进一步开发调控坏死性凋亡强度的药理学策略提供线索。 02 研究内容 Research Content 该研究的核心结果围绕“建立平台—表征donor特征—诱导凋亡—诱导坏死性凋亡并药理学逆转—检测炎症及干扰素信号—验证NK细胞活化”展开： 1. 建立用于刻画转移性乳腺癌hMOs中PCD和炎症的转化研究流程一句话总结：建立了三例来自转移性乳腺癌患者的hMOs（donor#1/#2/#3），并通过形态学、免疫荧光和单细胞CITE-seq完成基线表征，为后续PCD和炎症研究搭建了标准化平台。实验设计：三例hMOs来自HUB生物样本库（donor#1为luminal B型，donor#2、#3为luminal A型），在模拟肿瘤微环境的化学成分明确培养基中稳定培养，并通过明场成像、免疫荧光（CK8/CK14、Ki-67、E-cadherin）及scCITEseq进行基线表征。关键结果 ▸ 形态差异（图1a）：三例hMOs在明场显微镜下成像，donor#1和donor#3呈紧密圆形结构，donor#2呈松散的“葡萄状”形态，三者扩增速率也各不相同。这种形态异质性与既往报道的乳腺癌类器官特征一致，反映了不同患者肿瘤的个体化差异，为后续比较donor间药物敏感性奠定了背景。 ▸ 管腔型来源确认：免疫荧光显示三例hMOs均表达管腔细胞标志物CK8、不表达基底细胞标志物CK14；图1b的Ki-67染色显示donor#2阳性细胞比例最高，与其松散、增殖较快的形态一致。Ki-67水平可作为衡量各donor基线增殖活性的参考指标，便于后续解释药物处理后的活力变化。 ▸ E-cadherin表达（图1c）：免疫荧光显示donor#1和donor#3呈E-cadherin阳性，donor#2几乎不表达。结合讨论部分，E-cadherin缺失常伴随ROS升高和TGF-β信号增强，而培养基中的抗氧化剂及TGF-β抑制剂（A83-01、Noggin）可能进一步支持了donor#2（E-cad阴性）的高增殖表型，提示E-cadherin表达水平与增殖能力之间存在潜在关联。 ▸ 单细胞图谱：scCITEseq经UMAP降维分析共识别出22个细胞群（图1d）；MKI67和CDH1表达的小提琴图（图1e）显示donor#3 MKI67表达最低、donor#2几乎不表达CDH1，与免疫荧光结果一致。22个细胞群的存在表明即使同一donor的hMOs内部也具有显著的细胞异质性，这种异质性正是患者来源类器官相较传统细胞系的核心优势，验证了该平台在单细胞分辨率下刻画hMOs异质性的能力。图1 建立用于刻画原代BC hMOs中PCD和炎症的转化研究流程。a hMOs形成后用Zeiss SteREO Discovery.V8明场显微镜成像，比例尺250 µm。b、c hMOs固定后分别进行Ki-67（b，品红）或E-cadherin（c，品红）免疫荧光染色，并用Hoechst33342（青色）复染；经CUBIC-2透明化后用Zeiss LSM780共聚焦显微镜成像，比例尺100 µm，放大图25 µm。d 对照处理（1.5% DMSO处理24小时）的hMOs进行scCITEseq，合并所有数据后进行UMAP分析。e scCITEseq数据中MKI67和CDH1表达水平的小提琴图。 2. 转移性hMOs表达管腔型乳腺癌标志物，并呈现donor特异性表达signature 一句话总结：三例hMOs均具有管腔型乳腺癌特征，但GATA-3表达水平及缺氧/MYC/雌激素等关键信号通路存在显著donor差异，形态特征与分子特征高度对应。实验设计：通过免疫荧光检测GATA-3、CD49f表达，并对scCITEseq数据进行hallmark基因集GSEA分析（合并数据集分析+各donor独立分析）。关键结果： ▸ GATA-3表达（图2a）：免疫荧光显示GATA-3在donor#2中表达最高且呈核定位，donor#1中度表达，donor#3几乎检测不到GATA-3阳性细胞。结合第4-5节坏死性凋亡结果，GATA-3表达较高的donor对Birinapant/Emricasan诱导的坏死性凋亡更敏感，提示GATA-3表达水平可能是预测PCD（尤其是坏死性凋亡）敏感性的潜在生物标志物，但仍需更多研究验证。 ▸ CD49f表达与验证：CD49f（ITGA6）免疫荧光（图2b）显示三例hMOs均可检测到蛋白表达，但scCITEseq中mRNA水平整体偏低；图2c同时验证了GATA3表达趋势与免疫荧光结果一致。CD49f蛋白与mRNA表达水平不完全一致，提示该标志物在蛋白质层面的检测可能更适合用于hMOs的表型鉴定。 ▸ 合并数据集通路分析（图2d）：三例donor的对照组scCITEseq数据合并后进行hallmark GSEA，缺氧信号通路和p53通路显著上调。缺氧信号与乳腺癌进展（糖酵解、血管生成、转移）密切相关，这一结果与hMOs来源于转移性病灶的背景相符，提示这些类器官保留了来源转移性乳腺癌病灶的部分转移相关分子特征。 ▸ donor特异性通路：各donor独立分析显示donor#1以MYC信号为主；donor#2表现为缺氧/糖酵解/TNF-α-NF-κB信号；donor#3以雌激素应答为主，与培养基含β-雌二醇一致。这种donor间通路差异凸显了乳腺癌的个体化分子异质性，是患者来源类器官支持“个体化”药物评估的分子基础。 ▸ 形态-分子对应：紧密形态的donor#1/#3呈现MTORC1信号增强（与不良预后相关），松散形态的donor#2以缺氧/糖酵解为主要特征，进一步印证了形态与分子特征间的对应关系。MTORC1信号常与乳腺癌不良预后及致癌作用相关，提示donor#1/#3在分子层面可能代表预后相对较差的亚组，为后续比较其PCD敏感性提供了重要背景。图2 转移性hMOs呈现管腔型BC亚型特征及donor特异性表达signature。a、b hMOs固定后进行GATA-3（a，品红）或CD49f（b，品红）免疫荧光染色，并用AF647™-鬼笔环肽（黄色）和Hoechst33342（青色）复染，CUBIC-2透明化后用Zeiss LSM780成像，比例尺100 µm。c scCITEseq数据中GATA3和ITGA6表达的小提琴图，验证了免疫荧光结果。d 对scCITEseq数据用hallmark基因集进行GSEA分析，合并所有donor对照（1.5% DMSO）数据，展示上调最显著的信号通路（横轴为–log₁₀校正q值，柱状图按DEG数量着色，虚线为显著性阈值q=0.05）。 3. Smac mimetics诱导cIAP1/2降解，并导致转移性hMOs产生donor特异性的细胞活力下降一句话总结：四种Smac mimetics均可降解cIAP1并诱导caspase-3切割（凋亡激活），但BV6效果最强且donor非依赖，其余三种药物对细胞活力的影响则因donor而异。实验设计：用BV6、Birinapant（TL32711）、ASTX-660（Tolinapant）和LCL-161分别处理hMOs 24小时，通过Western blot检测cIAP1/2、XIAP及caspase-3，并用CellTiter-Glo活力检测及活/死染色评估细胞死亡。关键结果： ▸ 基线表达（图3a未处理/对照泳道）：Western blot显示三例hMOs中cIAP1、XIAP表达均较低，caspase-3表达最高，且donor#1与donor#3之间存在统计学差异；MLKL mRNA水平三donor相近。基线cIAP1/XIAP水平均较低，研究随后通过泛caspase抑制剂Emricasan人为模拟caspase依赖性凋亡受阻状态，为比较凋亡与坏死性凋亡提供实验条件。 ▸ IAP降解与凋亡激活（图3a）：四种Smac mimetics均诱导cIAP1降解，与donor背景无关；cIAP2仅donor#3表达并被显著降解；XIAP降解以BV6最明显；所有药物均以donor非依赖方式诱导caspase-3切割。IAP降解会稳定NIK并激活非经典NF-κB通路，进而诱导TNF-α等促炎基因表达，构成“凋亡-炎症”正向反馈环，为第6节观察到的炎症因子上调提供了机制基础。 ▸ 细胞活力（图3b）：CellTiter-Glo检测显示BV6使三例donor活力均下降35%–50%，效应最强且一致；其他药物呈donor特异性，如LCL-161使donor#1/#2活力下降约15%，但donor#3无明显作用。BV6和Birinapant均为双价Smac mimetic、作用更强，而单价的ASTX-660和LCL-161效果较弱，提示药物结构（双价vs单价）与效价相关；BV6相比Birinapant更强的效应也与其对cIAP1/XIAP更低的解离常数（Kd）相符。 ▸ 细胞死亡（图3c）：活/死染色定量显示BV6使死细胞数量较DMSO对照增加4–24倍，其他Smac mimetics增幅相对较小。值得注意的是，Birinapant、ASTX-660和LCL-161诱导的caspase-3切割程度与BV6相近，但细胞死亡幅度明显更小，提示caspase-3切割本身并不能完全预测最终的死亡结局，二者之间可能存在额外的调控环节或时间窗口差异。 ▸ Birinapant处理后通路特征（图3d）：donor#1呈TNF-α信号为主，donor#2呈MYC信号为主，donor#3呈雌激素应答为主；合并数据集亦显示MYC信号显著上调。c-MYC过表达可增强细胞对凋亡的敏感性、形成正向反馈环，可能部分解释了donor间对Smac mimetic响应程度的差异。 ▸ 通路特征（Birinapant处理后）：donor#1呈TNF-α信号为主，donor#2呈MYC信号为主，donor#3呈雌激素应答为主；合并数据集亦显示MYC信号显著上调。图3 Smac mimetics诱导原代hMOs中cIAP1/2降解及donor特异性细胞活力下降。hMOs分别用10 µM BV6、Birinapant、ASTX-660、LCL-161或0.4% DMSO处理。a Western blot检测各处理24小时后cIAP1、cIAP2、XIAP、cleaved caspase-3及全长caspase-3，vinculin为内参。b CellTiter-Glo®活力检测，相对未处理对照标准化（N=3）。c 荧光活/死染色定量，相对未处理对照标准化（N=3）。d 基于hallmark GSEA分析各donor经Birinapant处理后最上调的通路（编码方式同图2d）。统计均采用单因素ANOVA+Tukey检验。 4. Smac mimetics在患者来源乳腺癌hMOs中诱导PCD 一句话总结：Birinapant单药诱导经典凋亡（cleaved caspase-3阳性），联合泛caspase抑制剂Emricasan（BiE）后则转向坏死性凋亡信号（细胞肿胀+pRIPK1阳性），三例donor均可检测到坏死性凋亡相关上游信号（donor #1/#2表现出更完整的坏死性凋亡执行，donor #3受MLKL低表达限制）；BV6效应类似但起效更快。实验设计：聚焦BV6和Birinapant（细胞活力影响最强，且Birinapant已进入临床），联合或不联合泛caspase抑制剂Emricasan处理hMOs，通过明场延时成像、活/死染色及免疫荧光（cleaved caspase-3、pRIPK1）评估PCD模式。关键结果： ▸ Birinapant单药诱导经典凋亡：明场延时成像（图4a）显示12小时后细胞从紧密结构脱离、形态变松散，18小时出现凋亡小体样囊泡；该组在免疫荧光中检测到cleaved caspase-3阳性（图4c）。该结果确认了hMOs对Smac mimetic诱导凋亡的敏感性，为后续比较凋亡与坏死性凋亡两种死亡模式提供了对照基线。 ▸ BiE联合处理诱导坏死性凋亡（图4a、4d）：18小时时整体更紧实，但出现明显细胞肿胀；图4d显示三例donor的BiE组均检测到pRIPK1阳性，确认坏死性凋亡的发生。既往研究显示许多乳腺癌细胞线本身不表达RIPK1/RIPK3/MLKL、对坏死性凋亡不敏感，本研究首次证明患者来源hMOs可表达并磷酸化这三种关键蛋白，确立了原代类器官作为研究乳腺癌坏死性凋亡的有效模型，pRIPK1阳性可作为坏死性凋亡的生物标志物。 ▸ 活/死染色与对照（图4b）：FdA/PI/Hoechst染色显示BiE组PI阳性死细胞数量显著高于Birinapant单药组；阿霉素72小时处理作为阳性对照呈现相似的细胞死亡形态。阳性对照验证了活/死染色体系本身对细胞死亡的检测灵敏度，使BiE组与Birinapant单药组之间的死亡差异更具说服力。 ▸ donor#3的特殊性（图4c）：未处理条件下也检测到一定程度的caspase-3切割，可能与其较低的增殖速率有关。这提示donor#3整体的基础细胞应激水平可能较高，也可能与第5节中donor#3 MLKL本底水平低、坏死性凋亡执行受限的发现存在内在联系。 ▸ BV6效应：与Birinapant相似但6小时即起效，PI信号更强，提示效价更高；BV6单药诱导caspase-3切割，BV6联合Emricasan则诱导pRIPK1。BV6更快的起效时间与第3节中其对cIAP1/XIAP更高亲和力的结论相互印证，进一步支持BV6是本研究中诱导PCD效价最强的Smac mimetic。图4 Smac mimetics在原代hMOs中诱导PCD。a 用Zeiss Z1 Axioimager宽场显微镜对未处理、对照（1.5% DMSO）及10 µM Birinapant或BiE（10 µM Birinapant+10 µM Emricasan）处理的hMOs每30分钟拍摄明场延时图像（共24小时），展示0、6、12、18、24小时时间点。b 24小时活体成像后，对同一批hMOs进行FdA（活细胞，绿色）、PI（死细胞，红色）及Hoechst33342（所有细胞核，蓝色）染色并再次成像。c、d 按(a)处理24小时的hMOs固定后分别进行cleaved caspase-3（c，品红）和S166磷酸化RIPK1（d，pRIPK1，品红）免疫荧光染色，并用AF647™-鬼笔环肽（黄色）和Hoechst33342（青色）复染，CUBIC-2透明化后用Zeiss LSM780成像。a、d为donor#1代表性图像，比例尺100 µm。 5. 对LUBAC及坏死性凋亡效应分子的药理学调控可挽救Birinapant和Emricasan诱导的hMOs PCD 一句话总结：RIPK1抑制剂Nec-1s可阻断BiE诱导的RIPK1/RIPK3/MLKL磷酸化并挽救坏死性凋亡；MLKL抑制剂NSA不影响这些磷酸化，但通过阻断MLKL寡聚化、膜转位和坏死性孔形成等下游执行过程减少细胞死亡；LUBAC抑制剂HOIPIN-8作用于磷酸化下游、挽救作用较弱；donor#3因MLKL本底低，坏死性凋亡执行受限。实验设计：在BiE处理的hMOs中分别加入Nec-1s、NSA或预处理HOIPIN-8，通过明场延时成像、活/死染色、CellTiter-Glo及Western blot（pRIPK1/pRIPK3/pMLKL）评估挽救效果，并对HOIPIN-8预处理组进行hallmark基因表达分析。关键结果： ▸ 形态与活力挽救：明场延时成像（图5a）显示联合Nec-1s、NSA或HOIPIN-8后不再出现坏死性凋亡相关形态改变；donor#1的CellTiter-Glo检测（图5c）显示Nec-1s和NSA显著挽救活力下降，HOIPIN-8挽救作用相对较弱。Nec-1s和NSA的有效挽救进一步验证了第4节观察到的细胞死亡确实由RIPK1-MLKL通路介导，证明该平台可用于坏死性凋亡相关药物的功能学验证。 ▸ 细胞死亡挽救：活/死染色（图5b）及其定量（图5d）显示三种抑制剂均使死细胞数量明显减少，趋势与活力数据一致。形态学（图5a/b）与定量学（图5c/d）数据相互印证，共同构成挽救实验的完整证据链。 ▸ 磷酸化机制（图5e）：Western blot显示BiE可在donor#1、#2中诱导RIPK1/RIPK3/MLKL磷酸化；Nec-1s阻断三者磷酸化；NSA不影响磷酸化（作用于MLKL膜转位下游）；HOIPIN-8同样不影响磷酸化（与团队此前胰腺类器官研究一致，作用于MLKL磷酸化下游）。NSA和HOIPIN-8均不影响磷酸化却仍能挽救细胞死亡，提示二者作用于磷酸化下游的执行环节（如MLKL膜转位/寡聚化），这一“作用于MLKL磷酸化下游”的结论在乳腺癌hMOs中得到了重复验证，提示其具有跨组织的普适性。 ▸ donor#3的特殊性：活力和死亡指标无明显变化，但仍可检测到pRIPK1/pRIPK3，提示坏死性凋亡上游信号被激活，但MLKL本底水平低限制了下游执行。这表明坏死性凋亡的“上游信号激活”与“下游执行（细胞死亡）”是可分离的两个过程，MLKL表达本底水平可能是决定坏死性凋亡能否真正执行的限制性因素，为未来基于MLKL表达预筛选潜在响应患者提供了思路。 ▸ HOIPIN-8诱导ROS通路：前六大上调基因中包含GCLM、GCLC、LUCAT1（抗氧化反应相关）；上调LUCAT1的细胞同时表现为脂肪酸代谢上调、糖酵解下调；HOIPIN-8特异富集的3个细胞簇（cluster 4/14/17）中，cluster 4还伴随UCHL1上调（与化疗耐药相关）。这提示HOIPIN-8在抑制坏死性凋亡的同时，可能通过氧化应激和代谢重编程对乳腺癌细胞的化疗敏感性产生潜在影响，是该类药物未来应用中需要关注的维度。图5 对LUBAC和坏死性凋亡效应分子的药理学调控可挽救Birinapant和Emricasan诱导的hMOs PCD。a 用宽场显微镜对BiE处理联合1s（30 µM necrostatin-1s）、NSA（20 µM necrosulfonamide）或H（30 µM HOIPIN-8，预处理30分钟）的hMOs每30分钟拍摄明场延时图像（共24小时）。b 24小时活体成像后，同一批hMOs进行FdA/PI/Hoechst33342染色并再次成像。a、b为donor#1代表性图像，比例尺100 µm。c donor#1 hMOs的CellTiter-Glo®活力检测，相对未处理对照标准化。d 活/死染色定量，相对未处理条件标准化（N=3）。e donor#1 hMOs磷酸化及总RIPK1、RIPK3、MLKL的Western blot，vinculin为内参，展示至少三次独立实验的代表性结果。统计均采用单因素ANOVA+Tukey检验。 6. 坏死性凋亡诱导转移性hMOs分泌炎症介质一句话总结：坏死性凋亡（BiE）显著上调TNF、CXCL10等炎症基因，并增加TNF-α和IP-10（CXCL10）分泌；IL-6、IL-8也呈相似变化趋势。同时，BiE诱导I型/II型干扰素应答通路，并上调多个ISGs。HOIPIN-8预处理可降低坏死性凋亡相关炎症因子/趋化因子的表达和分泌。实验设计：通过RT-qPCR检测TNF、CXCL10、CXCL1、ICAM1 mRNA水平，CBA法检测上清中TNF-α、IP-10、IL-6、IL-8浓度，并对scCITEseq数据进行donor特异性ISG表达分析及hallmark通路富集分析。关键结果： ▸ mRNA水平（图6a）：RT-qPCR显示BiE处理使三例donor的TNF和CXCL10显著上调；HOIPIN-8预处理可将其降至接近未处理（donor#1）或Birinapant单药水平（donor#2/#3）；CXCL1、ICAM1呈相似趋势但donor间差异更大。HOIPIN-8能将坏死性凋亡诱导的TNF/CXCL10表达逆转至接近基线水平，证实LUBAC活性是坏死性凋亡相关炎症基因转录的重要驱动因素之一。 ▸ 细胞因子分泌（图6b）：CBA检测显示BiE显著增加TNF-α及IP-10分泌，IL-6、IL-8呈相似变化模式；HOIPIN-8预处理可将各指标降至接近未处理水平。分泌型IP-10已知可作用于周围细胞和肿瘤微环境，影响免疫细胞的浸润、分化和功能，因此其在坏死性凋亡条件下的显著释放，是连接“肿瘤细胞死亡”与“免疫微环境重塑”的关键分子事件。 ▸ 干扰素signature（图6c）：scCITEseq的UMAP图显示坏死性凋亡条件下ISGs（MX1、IFIT1、ISG15、OAS3、STAT1）以donor非依赖方式高表达。与下一条通路富集结果共同构成坏死性凋亡诱导干扰素signature的直接证据。 ▸ 通路富集（图6d）：各donor及合并数据集的hallmark分析均显示IFN-γ和IFN-α应答通路、TNF-α/NF-κB信号显著激活——首次将坏死性凋亡与I/II型干扰素信号在乳腺癌类器官中建立起联系。这意味着坏死性凋亡不仅是一种“细胞自毁”过程，还主动驱动了一套类似抗病毒应答的转录程序，这正是其能够进一步激活NK细胞（见第7节）的分子基础。图6 坏死性凋亡诱导转移性hMOs分泌炎症介质。a HOIPIN-8（30 µM）预处理的hMOs经10 µM Birinapant（Bi）和10 µM Emricasan（E）处理24小时后TNF和CXCL10 mRNA表达水平，以RPII、18S-rRNA、TBP、RPL13为内参标准化，结果以log2(倍数变化)表示（N=3）。b FACS-based CBA法检测各处理组hMOs上清液中TNF-α和IP-10浓度（N=3）。c 经Birinapant+Emricasan处理24小时后，scCITEseq数据中各donor上调最显著的6个基因的UMAP图，炎症及干扰素相关基因用浅蓝色圈出。d 各donor经BiE处理后scCITEseq数据的hallmark GSEA分析，展示诱导最强的5条通路（编码方式同图2d）。统计均采用单因素ANOVA+Tukey检验。 7. 坏死性凋亡hMOs诱导NK细胞反应一句话总结：坏死性凋亡hMOs的条件培养液可上调NK-92 MI细胞中IRF9、IFIT1及一定程度的IFNG的表达（donor#2来源效果最显著），但细胞毒性标志物（NCR1/PRF1/GZMB）未见明显变化，提示NK细胞处于“预激活”而非完全活化状态。实验设计：将NK-92 MI细胞与对照或坏死性凋亡（BiE）hMOs的条件培养液共培养4小时，通过RT-qPCR检测NK细胞活化标志（IRF9、IFIT1、IFNG）及细胞毒性标志（NCR1、PRF1、GZMB）的mRNA表达。关键结果： ▸ NK细胞活化标志物：将NK-92 MI细胞与对照或坏死性凋亡（BiE）hMOs的条件培养液共培养4小时后，RT-qPCR显示IRF9（图7a）和IFIT1（图7b）表达上调，IFNG（图7c）也有一定程度升高，其中donor#2来源的条件培养液效果最显著。IRF9是ISGF3复合体的组成部分，有助于NK细胞在病毒感染等情境下的存活，其上调提示坏死性凋亡分泌物可能通过类似“抗病毒”的信号模式对NK细胞起到预激活作用。 ▸ 细胞毒性标志物：NCR1（图7d）、PRF1（图7e）和GZMB（图7f）在对照与坏死性凋亡条件培养液处理组之间未见显著差异。从“基因表达预激活”到“功能性细胞毒性”之间可能存在时间窗口或需要额外信号，未来可考虑延长共培养时间或采用类器官-免疫细胞共培养体系进一步验证。 ▸ 结论：上述结果提示NK细胞处于活化早期的“预激活”（priming）状态，而非完全细胞毒性激活；该实验为坏死性凋亡hMOs释放的可溶性因子能够旁分泌调节NK细胞状态提供了证据。乳腺癌微环境中免疫抑制性细胞（如肿瘤相关巨噬细胞）占比可达50%且与不良预后相关，本研究提示诱导坏死性凋亡有潜力部分激活免疫细胞、缓解这种免疫抑制状态，为坏死性凋亡联合免疫治疗策略提供了实验依据。图7 坏死性凋亡hMOs诱导NK细胞反应。NK细胞经hMOs条件培养液处理4小时后，IRF9（a）、IFIT1（b）、IFNG（c）、NCR1（d）、PRF1（e）、GZMB（f）的mRNA表达水平，相对未处理条件及内参基因TBP、RPL13、RPII标准化，结果以log2(倍数变化)表示（N=3），单因素ANOVA+Tukey检验。 03 研究意义 Research Significance 类器官模型的转化价值：建立患者来源转移性乳腺类器官平台，保留了原发肿瘤的分子特征与增殖特性，可模拟凋亡耐药、坏死性凋亡及炎症级联反应，支持个体化药物筛选，填补了体外细胞实验与动物模型间的转化研究缺口。坏死性凋亡突破凋亡耐药困境：证实Smac模拟物可有效诱导乳腺癌细胞凋亡；当 caspase 通路被抑制时，肿瘤细胞可通过RIPK1-RIPK3-MLKL轴转向坏死性凋亡，且该效应可被特异性抑制剂逆转，为凋亡耐药的转移性乳腺癌提供了非caspase依赖的治疗新方向。坏死性凋亡介导干扰素免疫激活：首次在患者来源乳腺癌类器官中发现，坏死性凋亡可显著上调干扰素刺激基因与I/II型干扰素信号，促进促炎因子分泌，进而激活NK细胞活化通路，为“坏死性凋亡诱导联合免疫治疗”的策略提供了机制支撑。线性泛素化的靶点价值：证实LUBAC抑制剂HOIPIN-8可作用于MLKL磷酸化下游，延缓坏死性凋亡发生并降低炎症介质表达和分泌；结合作者既往研究，HOIPIN-8可能通过影响MLKL膜定位等过程发挥作用。这为进一步探索如何药理学调控坏死性凋亡强度、降低过度炎症反应提供了潜在靶点线索。扫描二维码可下载原文大橡科技肿瘤类器官药物评价大橡科技依托自主创新的类器官芯片平台与标准化肿瘤类器官样本库，打造精准药物评价解决方案。平台可高度还原肿瘤微环境与异质性，突破传统模型局限，高效支持小分子、抗体、ADC、CGT等多种类型候选药物的敏感性检测与耐药机制研究，助力药企快速筛药，降低研发成本与临床转化风险；依托平台标准化培养体系与稳定的检测流程，为临床个体化用药提供精准导航，全面推动肿瘤药物研发与精准医疗落地。小分子药物更多研究案例，点击下方链接：客户文章解读｜PARP抑制剂耐药了怎么办？中国团队最新发现，铜离子或是破局关键 GUT重磅｜突破肠毒性-疗效困境！类器官共培养精准筛选小分子，革新免疫治疗副作用管理《Cell》详细解读｜首个针对生物分子凝聚体（液-液相分离）机制的抗食管癌药物，类器官参与验证抗体、ADC药物更多研究案例，点击下方链接：类器官新机制：为何HER2低表达的尿路上皮癌仍对靶向治疗敏感？ STTT（IF52.7）皮摩尔级锁定！PDOX模型验证抗CD155纳米抗体携药直捣肺腺癌肿瘤克星：类器官研究为ADC药物研发按下“快进键” CGT药物更多研究案例，点击下方链接：肿瘤显著清除！类器官与动物实验共同验证新型细胞外囊泡递送系统免疫治疗胰腺癌 "鸡尾酒"CAR-T疗法：治疗异质性脑癌的新策略客户文章解读系列｜类器官芯片助力靶向CAR-T细胞疗法的抗肿瘤机制研究珍芯严®全场景解决方案你有思路，我来想！你出方案，我来做！以专业眼光洞察数据，让决策更加清晰！珍芯严®面向药企药物早期研发与高校、医院的基础科研，我们倾力打造类器官芯片全场景解决方案。凭借创新的类器官芯片技术，打破传统细胞与动物研究瓶颈，高效产出优质数据，从实验室到临床，我们与您并肩作战！客服电话/微信:18610798010 扫描二维码可联系我们小红书设计: Summer、Rebecca｜封面: Rebecca 求点赞求分享求喜欢

2026-05-28

·唯尚立德生物

在心肌梗死后 cIAP2 在造血细胞中的表达驱动炎症和心力衰竭

加拿大渥太华大学的研究人员在 nature cardiovascular research 杂志上发表了研究论文 “Hematopoietic expression of cIAP2 drives inflammation and heart failure after myocardial infarction”, 研究了造血细胞中的 cIAP2 蛋白在心肌梗死后加剧心脏炎症与组织损伤的关键作用。研究发现 cIAP2 的存在会阻碍炎症细胞的正常凋亡，导致有害的免疫反应持续存在；而通过基因敲除手段，或使用 Smac 模拟物如 LCL161 特异性抑制 cIAP2 则能有效诱导脾脏来源的炎症单核细胞发生死亡。这种干预不仅显著减轻了心肌局部的炎症浸润和纤维化程度，还大幅改善了梗死后的心脏收缩功能。该研究不仅阐明了心梗后免疫调控的新机制，也为临床上利用靶向 cIAP2 的药物改善心血管预后提供了极具潜力的治疗新策略。缺血性心脏病，主要由心肌梗死(MI)引发，目前仍是导致死亡和疾病负担的首要原因。尽管早期抑制在心肌梗死后的炎症可改善预后但现有疗法的疗效仍十分有限。在这篇文章中，研究人员发现 cIAP2 是一种调控细胞死亡的分子，在心肌梗死后表达上调并促进急性炎症和心脏损伤。全身性敲除 cIAP2 或通过骨髓移植使其缺失，均可减轻心肌梗死后的炎症损伤及心脏功能障碍，这表明 cIAP2 缺失所产生的心脏保护作用主要由造血系统介导。心脏炎症减轻与脾脏髓系细胞数量减少相关，这是由于细胞死亡增加以及促凋亡因子 TRAIL 及其受体 TRAIL-R2/DR5 表达升高所致。在心肌梗死后使用 Smac 模拟物对 cIAP 蛋白进行药理降解，同样可减轻心脏炎症并发挥保护作用。这些发现共同表明 cIAP2 是造血细胞表达的一种关键的生存与炎症调节因子并支持通过抑制 cIAP2 来作为心肌梗死的一种潜在免疫治疗策略。 1、心肌梗死后 cIAP2 表达上调并参与心肌损伤对急性缺血性心力衰竭患者血浆样本进行无偏倚的蛋白质组学筛查发现 cIAP2 及其远缘相关的 BIRC5(Survivin) 水平升高，而 cIAP1 水平未见明显变化(图 1 a)。接下来，研究人员发现，与稳定性冠状动脉疾病(CAD)患者相比，急性心肌梗死(MI)患者的血浆中 cIAP2 水平显著升高(图 1 b)。在人类和小鼠心脏中，急性心肌梗死后 cIAP2 均呈急性升高表现(图 1 c and d)。对已发表的小鼠心脏缺血性梗死样本的芯片数据(GSE4648)进行分析显示，与其他 BIRC 蛋白成员相比 cIAP2 呈现出独特的表达模式，并且其表达趋势与心肌梗死后急性期其他髓系炎症基因转录本的表达趋势高度一致。此外，若干与 cIAP2 相关的基因功能通路也呈现上调状态。另外，敲除 Nod1 (一种已知的可招募并激活 cIAP1/cIAP2 的蛋白)可改善心肌梗死预后，进一步表明 cIAP 蛋白是损伤和炎症反应的早期介导因子。敲除 Tnfrsf1a(TNFR1/p55), Tlr4 或 Nod1 均可降低心肌梗死后 cIAP1 和 cIAP2 的蛋白表达，以及 RIPK1, IRAK4 和 TRAF6 等炎症因子的表达水平。 fig.1 通过比较 cIAP2 基因敲除小鼠(CIap2−/−) 与 CIap1−/− 或 C57BL/6 (野生型 WT)小鼠在冠状动脉结扎后的反应，评估了 MI 后 cIAP2 的作用。心肌梗死组织的组织学分析显示，与 CIap1−/− 和 WT 小鼠相比 CIap2−/− 小鼠的瘢痕面积显著减小(图 1 e)；血管免疫组化结果显示，损伤组织的血管生成增加(图 1 f)。左心室舒张末期和收缩末期内径得到更好保留；左心室射血分数受损程度较轻(图 1 g)；心脏和肺重/胫骨长度的比值也有所降低(图 1 h)。在 MI 后的反应中，未发现性别差异(图 1 i)。此外 CIap2−/− 小鼠在 MI 急性期的心肌梗死周边区域心肌细胞死亡减少(图 1 j)，同时伴随凋亡相关蛋白—annexin A1, PARP 和 cleaved caspase-8 的表达降低。在随后的中期时间点，研究人员观察到与不良重构相关的因子转录水平降低(例如 Nppb, Myh7, Tnfa 和 Tgb1), CIap2−/− 小鼠与 WT 对照组相比表现出明显的差异。最后，在 MI 后第 28 天 CIap2−/− 小鼠体内的 HMGB1 and TGFβ1 的表达均有所降低。总体而言，这些发现表明 cIAP2 的表达有助于增强 MI 后的心脏损伤。 2、造血细胞表达的 cIAP2 驱动心肌梗死后的炎症反应研究人员评估了心肌梗死(MI)后cIAP2 急性缺失对心脏特异性免疫细胞浸润及其功能的影响。心脏组织学分析显示，在MI 后3 天CIap2−/− 小鼠左心室心肌的细胞炎症反应减轻(图2 a)。在MI 后1 天WT 小鼠与CIap2−/− 小鼠的左心室中性粒细胞、Ly6Chi 单核细胞和树突状细胞浸润情况相当(图2 b)；然而，从MI 后第3 天起CIap2−/− 小鼠的细胞浸润显著且持续减少，直至第28 天仍保持这一趋势(图2 b and c)。同时CIap2−/− 小鼠心室组织中促炎趋化因子Cxcl1 和Ccl2 的转录水平也降低(图2 d)，表明其炎症微环境已明显减弱。为了进一步探究cIAP2 在免疫炎症中的作用，研究人员构建了骨髓嵌合小鼠模型，以将cIAP2 缺失仅限制在造血细胞中(图2 e)。与研究人员在全敲CIap2−/− 小鼠中观察到的结果一致CIap2−/− 嵌合体在MI 后28 天表现出左心室瘢痕形成减少、射血分数改善等表型(图2 f and g)。相比之下CIap1−/− 嵌合体与WT 嵌合体相比则显示出更明显的重构加重和射血分数恶化(图2 g)，这支持了cIAP2 在MI 后心肌病发生中发挥更为关键作用的假设。尽管心脏重量变化不大，但CIap2−/− 嵌合体的肺重量却较WT 小鼠有所下降，且CIap2−/− 嵌合体的毛细血管密度得到了改善。此外CIap2−/− 嵌合体的心脏免疫浸润显著减少。在CIap2−/− 嵌合体的脾脏中，免疫调节因子IL-10 的表达升高，而促炎因子IL-23 的表达则降低。研究人员还观察到CIap2−/− 嵌合体中心肌髓系细胞和淋巴细胞数量均显著减少，尤其是促进心肌纤维化和炎症的IL-17 阳性T 细胞。相反，反向嵌合小鼠(将WT 造血细胞移植到CIap2−/−小鼠中(图2 h))则表现出显著加重的瘢痕形成和降低的射血分数(图2 i and j)，以及更严重的心脏重构、血管生成减少和免疫炎症反应。综合上述结果，这些发现支持这样一个观点：cIAP2 缺失所带来的总体心脏保护效应主要源于造血来源免疫炎症的减少。 fig.2 在近期发生心肌梗死(MI)的患者中，血液白细胞分离物中的 cIAP2 蛋白表达上调；类似地，小鼠经手术诱导心肌梗死后7 天，外周血白细胞中的cIAP2 蛋白水平也有所升高。与稳定性冠心病患者相比，急性心肌梗死患者样本中白细胞分离的cIAP2 水平更高，而cIAP1 水平则无明显变化。在小鼠模型中，研究人员观察到，在急性损伤阶段CIap2−/− 小鼠的循环髓系细胞(CD11b+)显著减少，但淋巴细胞(B 细胞或T 细胞)数量并未受到影响；这种减少趋势在损伤后第3 天进一步加剧。因此，研究人员进一步探讨了这一炎症反应受抑的根源是否在于脾脏和骨髓中造血干细胞来源的髓系细胞生成受到了抑制。对脾脏和骨髓细胞数目的分析表明，在心肌梗死后的早期急性期(24 小时)CD11b+ 细胞群出现净减少，同时伴随心脏浸润增加(图2 a 和图3 a and c)。尽管在心肌梗死后第3 天，脾脏和骨髓中的细胞计数均逐步恢复，但与野生型小鼠相比CIap2−/− 小鼠的脾脏恢复过程更为缓慢(图3 a)，这与骨髓中髓系细胞计数似乎已完全恢复形成鲜明对比(图3 c)。总体而言，至心肌梗死后第28 天，野生型和CIap2−/− 小鼠的脾脏和骨髓中白细胞均已完全恢复(图3 b and d)，提示CIap2−/− 小鼠髓系细胞生成受损可能与损伤后的炎症状态密切相关。 fig.3 心肌梗死(MI)后对脾脏进行的生化分析表明 cIAP2 在促进炎症反应中发挥着重要作用。在 MI 后不同时段采集的全脾裂解液显示 cIAP2 蛋白水平逐渐上调，并与已知受 cIAP2 调控而发生降解的 TRAF3 蛋白水平降低呈正相关。与 CIap1 缺陷型脾脏不同，在 CIap2 缺陷型脾脏中 TRAF3 和 XIAP (一种免疫调节性 IAP 蛋白) 均得以保留。在 MI 后 7 天 CIap2−/− 脾脏中 PRR 和 TNFR 信号通路的关键节点性炎症调控蛋白(IRAK4, MyD88, RIPK1 和 TRAF6)的蛋白表达均出现下调。在 MI 损伤后 cIAP2 与 Traf3 的免疫共沉淀现象增强。在 cIAP2 阳性脾细胞中 TRAF3 的 K48 泛素化水平升高，而 RIPK1 则呈现激活性的 K63 泛素化增强。尽管 CIap2 基因敲除并未影响 MI 后 24 小时脾细胞中的非经典 NF-κB 通路，但在 MI 后 3 天 CIap2−/− 脾细胞中核定位的经典 NF-κB 因子 p65/RelA 和 NF-κB1(p50) 的表达却较野生型小鼠显著降低。此外 CIap2−/− 脾脏中 Tnfa, Il1b 和 Il6 的表达水平也均有所下降。综上所述，这些结果提示 cIAP2 通过特异性调控脾脏中的效应细胞，对 MI 后的急性炎症反应发挥至关重要的作用。脾脏细胞对心肌梗死的应答对于维持最大程度的炎症活性至关重要，甚至可能是导致最严重心脏结局的元凶。已有研究证实，脾脏是效应单核细胞及其他炎症细胞的重要储存库，这些细胞可在缺血性心肌中迅速被动员至病灶部位。在 CIap2−/− 小鼠中，研究人员观察到心肌梗死后 7 天从脾脏分离的中性粒细胞和 Ly6Chi 单核细胞数量减少(图 3 e)，这与局部脾细胞死亡增加相吻合(图 3 f)。相比之下，在心肌梗死后急性期的整个过程中，脾脏和心脏中的淋巴细胞水平均未发生显著变化。这些发现与以下观点一致：cIAP2 可促进脾脏髓系细胞的存活，从而支持持续的心脏炎症反应。除了调控 NF-κB 介导的炎症反应外 cIAP 蛋白还能抑制 TNF 超家族死亡复合物的激活，进而调节细胞的凋亡或炎症性(坏死性)细胞死亡。在包括单核细胞的髓系细胞中 CIap1/CIap2 缺陷会导致细胞在暴露于 TNF 后发生死亡。此外 cIAP2 还在调控造血干细胞的 TNF 依赖性存活及髓系分化潜能方面发挥着重要作用。研究人员发现，与心肌梗死后 3 天相比，心肌梗死后 7 天时 CIap2−/− 小鼠脾脏样本中 Tnfa 的 mRNA 和蛋白水平均显著升高。另外，研究人员还观察到，在心肌梗死后 3 天 CIap2−/− 小鼠的脾脏中死亡配体 TRAIL(or TNFSF10/Apo2L) 的蛋白表达升高，而心脏中则无此变化(图 3 g)。心肌梗死后 7 天 CIap2−/− 小鼠脾细胞中 TRAIL 和 TNF 的蛋白水平均升高，同时 Caspase-8 和 Caspase-3 的活性形式以及凋亡标志物 Annexin A1 的表达也显著增加。此外，在 CIap2−/− 小鼠骨髓细胞中 TRAIL 蛋白及促其上调的转录因子 IRF-1 的表达均升高。另外 CIap2−/− 小鼠脾细胞还上调了 TRAIL 受体 TRAIL-R2/DR5 (一种能与 TRAIL 结合并促进细胞死亡的受体) 以及 TNFR1 (该受体可在 IAP 缺陷细胞中促进细胞凋亡)(图 3 h)。免疫组化分析显示 CIap2−/− 小鼠脾脏中 TRAIL 阳性细胞和 DR5 阳性细胞的数量均有所增加，且心肌梗死后 TRAIL 阳性细胞与 DR5 阳性脾细胞之间存在相互作用(图 3 i)。注射 TRAIL 中和抗体可有效阻止 CIap2−/− 小鼠心肌梗死后脾细胞的死亡(图 3 j)。最后，研究人员证实 TRAIL 的表达在心肌梗死后具有保护作用：通过抗体介导的 TRAIL 中和 WT 小鼠和 CIap2−/− 小鼠的心肌损伤和炎症均加重(图 3 k)，并且这种加重效应完全抵消了由 cIAP2 缺陷带来的保护作用。这些数据共同表明 cIAP2 缺失会增强脾细胞对 TNF 相关死亡信号的敏感性，部分原因是上调了 TRAIL 和 DR5 等效应蛋白的表达，从而减少了脾脏内炎症细胞的负荷。 3、cIAP 抑制性 Smac 模拟物在心肌梗死后具有心脏保护作用研究人员的研究结果提示 cIAP2 或可作为心肌梗死后急性早期阶段的潜在药物治疗靶点。研究人员以单价 Smac 模拟物 LCL161 作为模型药物，评估了心肌梗死后抑制 cIAP 的作用效果(图 4 a)。在体内实验中，单次给予 10 毫克/千克体重的 LCL161 即可有效降解脾细胞中的 cIAP1 和 cIAP2 (图 4 b)，并降低循环血液中中性粒细胞及炎性 Ly6Chi 单核细胞的水平，其作用剂量仅为诱导小鼠肿瘤消退所需剂量的五分之一。相比之下 LCL161 在低于一期临床试验耐受剂量范围内的给药浓度下，对心脏 cIAP 蛋白水平并无明显影响。体外实验显示，预先用 LCL161 处理骨髓来源的树突状细胞后，在面对冻融心脏裂解液的刺激时 K63 泛素化的广泛程度以及 IRAK4, MyD88 和 RIPK1 的表达均显著降低。接受心肌梗死手术的小鼠分别于梗死当天和第 4 天给予 LCL161 治疗(图 4 c)。与接受溶剂对照的小鼠相比 LCL161 治疗组小鼠的心肌梗死死亡率显著降低(图 4 d)。此外 LCL161 治疗还减少了左心室瘢痕形成、心脏重量及左心室重构，并伴随左心室射血分数的改善(图 4 e-h)。LCL161 治疗还能减轻心肌梗死后的心脏免疫浸润(图 4 i)。cIAP2 是心肌梗死后主要的炎症靶点，这一点从 LCL161 在 CIap1−/− 心肌梗死小鼠与 CIap2−/− 小鼠中所取得的不同疗效中可见一斑。心肌梗死后 28 天 LCL161 治疗组小鼠的心脏重塑相关基因和炎症相关基因的表达水平均低于溶剂对照组(图 4 j)。 fig.4 在心肌梗死(MI)后 24 小时单次给予 LCL161, 7 天时仍表现出心脏保护作用，具体表现为早期瘢痕形成减少、左心室射血分数改善、心脏重量减轻，以及心脏炎症细胞数量降低(图 5 a-c)。与 cIAP2 缺乏的效应一致 LCL161 处理的小鼠在心肌梗死后 7 天，其脾脏中的髓系炎症细胞数量也有所减少(图 5 d)。总体而言，与溶剂对照组相比 LCL161 处理小鼠的心脏中炎症和重塑相关基因的转录水平并未发生显著变化，仅关键炎症趋化因子 Ccl2 及其受体 Ccr2 的 mRNA 表达出现了变化(图 5 e)。此外 LCL161 能够有效降低 cIAP 介导的炎症活性的进一步证据体现在：LCL161 处理的心肌梗死小鼠脾细胞中 TUNEL 染色强度增加，同时 TRAIL 的表达也显著上调(图 5 f and g)。尤为重要的是，与持续炎症状态对细胞命运具有决定性影响这一发现相一致，心肌梗死后第 28 天，脾脏和骨髓中的白细胞数量均已恢复至基线水平。综上所述，研究人员的研究结果表明 cIAP2 在心肌梗死后小鼠维持最大炎症反应中发挥着关键作用。这种炎症反应由 cIAP2 调控细胞死亡信号通路所介导，从而促进髓系细胞的存活；这一重要作用通过 cIAP 抑制剂 Smac 模拟物在心肌梗死后所展现的保护性炎症细胞减少效应得到了充分证实。 fig.5 原文链接：https://www.nature.com/articles/s44161-026-00782-x viewsolid 北京唯尚立德生物科技有限公司是由来自北京大学、中国医学科学院的科研团队产业转化而来的技术企业，是国内较早提供基因编辑技术服务的技术公司。从2011年至今已为国内外科研院所及医药研发机构提供了水稻、烟草、家蚕、小鼠、大鼠、猪、猴子等多个物种的基因编辑服务。公司拥有实验动物屏障设施、隔离设施共2000余平方米，并获得实验动物生产许可证、使用许可证。搭建了完善的基因工程动物创制平台、表型分析平台和实验技术服务平台、动物模型种源交流平台、实验动物繁育平台，并布局了人源化小鼠开发平台、基因治疗药物开发平台，为生命科学研究和生物医药研发提供高效、优质的服务。地址：北京市昌平区永安路38号6幢电话：010-62963369 网址：http://www.v-solid.com 订购邮箱：order@v-solid.com

2026-05-24

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韩国生技所丨Nat. Commun.丨利用生物纳米孔进行蛋白质-药物相互作用分析

关注我们，热爱分享，共同成长~ 文献解读该文章发表于学术期刊Nature communication杂志。论文标题为“Single-molecule fingerprinting of protein-drug interaction using a funneled biological nanopore”。通讯作者是来自韩国生物科学与生物技术研究所的Mi-Kyung Lee和Seung-WookChi。摘要解读在药物研发过程中，当前生物物理方法的局限性阻碍了对蛋白质-药物相互作用（PDI）的高效筛选。在此，利用成孔毒素 YaxAB 开发了一种生物纳米孔传感器，用于蛋白质及 PDI 的单分子检测。利用该 YaxAB 纳米孔，实现了抗肿瘤蛋白 Bcl-xL 与小分子药物及 Bak-BH3 肽之间相互作用的无标记、单分子水平检测。YaxAB 纳米孔的长漏斗状结构及其纳米流体特性，使得多种折叠蛋白能够被电渗捕获，并实现对 PDI 的高分辨率监测。在二维散点图中观察到的独特纳米孔事件分布，表明 YaxAB 纳米孔能够区分与 Bcl-xL 结合的单个小分子药物与非结合物。综上所述，研究结果表明，YaxAB 纳米孔可作为无标记、超灵敏、单分子水平检测 PDI 的稳健平台，为针对多种药物靶点实现低成本、高效率的药物研发提供了可能性。。研究背景当前的药物研发过程存在成本高昂、效率低下的问题。药物的治疗效果通过与靶点（主要是蛋白质）的物理相互作用来实现。在体外监测蛋白质-药物相互作用对于药物筛选、构效关系研究及作用机制研究等药物发现过程至关重要。尽管已有核磁共振、表面等离子体共振、等温滴定量热法和荧光等多种生物物理方法用于直接监测蛋白质-药物相互作用，但高效药物筛选仍受到严重限制，例如仪器成本高、标记或固定化带来的不准确性、小分子药物检测灵敏度低，以及靶标蛋白和/或药物的溶解度有限等问题。因此，亟需技术创新以突破当前局限，加速制药行业的药物发现进程。纳米孔传感是一种用于生物分子单分子分析的新兴技术。基于外加电压下纳米孔内电驱动分析物导致的离子电流阻断，纳米孔传感器具有单分子分辨率、超灵敏、无标记、实时检测和高通量分析等优势。由通道蛋白制成的生物纳米孔传感器孔径均一、噪声低、分辨率高，并可通过蛋白质工程进行简便修饰。尽管蛋白质的折叠结构和非均匀电荷使其纳米孔分析变得复杂，近期研究已尝试将生物纳米孔应用于折叠蛋白的单分子分析。已有多种生物纳米孔（如ClyA、PlyAB、MspA）及固态纳米孔被用于分析蛋白质构象及蛋白质-配体相互作用。然而，这些纳米孔传感器主要依赖于配体诱导的特定大尺度构象变化。虽然蛋白质-蛋白质相互作用是有前景的药物靶点，但其成药性是药物发现领域的重大挑战之一。在人类相互作用组中，已报道超过64.5万种与疾病相关的蛋白质-蛋白质相互作用，但其中仅有约2%被用于药物开发。因此，市场对低成本、高效的针对这些相互作用的药物筛选技术有着迫切需求。B细胞淋巴瘤-特大蛋白（Bcl-xL）与Bak蛋白的BH3结构域（Bak-BH3）之间的相互作用是一个有吸引力的抗癌治疗靶点。Bak-BH3在诱导细胞死亡中起关键作用，其与Bcl-xL的结合可拮抗Bcl-xL的抗凋亡功能。已有多种BH3模拟化合物被鉴定用于抗癌药物发现，其中ABT-737是著名的Bak-BH3/Bcl-xL相互作用强效小分子抑制剂。YaxAB是一种成孔毒素，由肠道病原体小肠结肠炎耶尔森菌（可引起腹泻和系统性菌血症）产生。研究表明，YaxAB通过在哺乳动物细胞膜上形成孔道引起渗透性裂解，从而发挥细胞毒性并参与致病过程。本研究旨在开发一种新型生物纳米孔传感器，用于实现蛋白质及其与小分子药物相互作用的免标记、单分子检测。研究团队选择并利用来自肠道致病菌Yersinia enterocolitica的孔形成毒素YaxAB构建纳米孔。以抗癌靶标蛋白Bcl-xL及其与Bak-BH3肽以及小分子抑制剂（如ABT-737和A-1331852）的相互作用为模型体系，系统评估了YaxAB纳米孔在单分子水平上检测PDIs的能力，并探索了其在药物发现中的应用潜力。。研究流程一、YaxAB纳米孔的制备与表征研究对象与处理：研究团队表达并纯化了Yersinia enterocolitica的YaxA和YaxB蛋白，通过体外组装和纯化，获得了三种不同寡聚体状态的YaxAB孔复合物：YaxAB-C8（16聚体）、-C9（18聚体）和-C10（20聚体）。通过非变性凝胶电泳和凝胶提取进行分离纯化。结构表征：利用负染电子显微镜（Negative-stain EM）观察了不同寡聚体形态，并通过三维重建确认了YaxAB-C8具有C8对称性。通过冷冻电镜结构分析，揭示了YaxAB-C8纳米孔呈长约18nm的漏斗状结构，其入口（cis侧）直径约10nm，出口（trans侧）直径约2.7nm，最窄收缩区直径约1.9nm。孔道内壁由8个凸起的α螺旋构成，呈“肋骨”状，表面带有显著负电荷。电生理表征：在平面脂双层膜中插入单个YaxAB纳米孔，测量其单通道电导。YaxAB-C8、-C9、-C10在100 mV电压下的单位电导分别为5.0 ± 0.1 nS、7.8 ± 0.2 nS和10.9 ± 0.2 nS。通过电流-电压（I-V）曲线测量，发现所有孔型均表现出不对称性。离子选择性分析：在不对称KCl浓度条件下测量反转电位，并使用Goldman-Hodgkin-Katz方程计算离子选择性。YaxAB-C8表现出强的阳离子选择性（P_K+/P_Cl- = 2.34 ± 0.03），这主要归因于收缩区聚集的负电荷。分子动力学模拟：对YaxAB-C8纳米孔进行了分子动力学模拟，以研究其纳米流体特性。模拟显示，在正电压下，孔道内存在从cis侧指向trans侧的强电渗流，且K+离子和水的通量在收缩区域附近显著增加。 Fig. 1: Characterization of YaxAB nanopores. 流程二：YaxAB纳米孔对未标记折叠蛋白质的单分子分析研究对象：选择了四种不同电荷和尺寸的蛋白质作为分析物：全铁转运蛋白（Holo-transferrin， 77.1 kDa，净电荷 -2.9e）、Bcl-xL（20.8 kDa，净电荷 -11.5e）、FKBP12（12.3 kDa，净电荷 +2.8e）和MDM2（13.0 kDa，净电荷 +0.6e）。通过圆二色光谱验证了这些蛋白质在纳米孔测量缓冲液中保持折叠状态。实验方法：将蛋白质样品添加到脂双层膜的cis侧，施加正电压。利用YaxAB纳米孔的强阳离子选择性产生的电渗流，成功捕获了所有这些折叠蛋白质，无论其净电荷如何都可成功被捕获。记录并分析了蛋白质被捕获时产生的离子电流阻断事件。数据分析与模型构建：对捕获的Bcl-xL分子产生的电流信号进行分析，发现其特征性的多级电流阻断（L1-L3水平）。结合分子动力学模拟计算的自由能景观，提出了一个三阶段的分子模型来解释单个纳米孔事件：捕获（capture）、振荡（Trap）和逃逸（Escape）。模拟显示，被捕获的Bcl-xL分子在孔道内存在两个自由能最小值位置（距离膜约4 nm和10 nm），其在这两个位置间的振荡运动导致了观察到的多级电流信号。通过使用不同净电荷的Bcl-xL突变体进行实验，证实了电渗流和电泳力之间的平衡控制了蛋白质在孔道内的运动，从而产生不同的电流水平。 Fig. 2: Single-molecule analysis of an unlabeled protein using YaxAB nanopores. 流程三：基于电流阻断分析蛋白质-配体相互作用研究对象：以Bcl-xL与Bak-BH3肽以及小分子药物ABT-737的相互作用为模型。实验方法：分别将游离的Bcl-xL、预孵育的Bcl-xL/Bak-BH3复合物和Bcl-xL/ABT-737复合物加入cis室，记录并分析其纳米孔事件。结果分析：游离Bcl-xL产生三个明显的电流阻断水平（L1-L3）。而与Bak-BH3肽结合后，主要诱导两个电流水平（L1和L2），L3水平几乎消失。与ABT-737结合后，也主要检测到L1和L2水平，且L1事件频率略有增加。这些电流分布模式的显著差异表明，YaxAB纳米孔可以灵敏地检测Bcl-xL与不同配体的结合。通过滴定实验，进一步证明了该方法可用于监测小分子药物（ABT-737）对PPI（Bcl-xL/Bak-BH3）的抑制作用。 Fig. 3: Current blockade and noise analyses of protein-ligand interactions using YaxAB nanopores. 流程四：基于电流噪声分析蛋白质-配体相互作用研究方法：除了电流阻断幅度，本研究还创新性地引入了电流噪声分析作为另一个维度的传感指标。通过分析纳米孔事件信号的功率谱密度，计算了电流噪声值。结果分析：在特定的低通滤波条件下（如100 Hz），游离Bcl-xL、Bcl-xL/Bak-BH3复合物和Bcl-xL/ABT-737复合物表现出显著不同的电流噪声水平。这种噪声差异可能源于分析物在孔道内的取向和偶极矩强度的可检测差异。研究进一步进行了基于噪声的剂量依赖性定量分析，测定了Bcl-xL与Bak-BH3肽、ABT-737和A-1331852的结合亲和力，其Kd值分别为66 ± 10 nM、38 ± 8 nM和19 ± 4 nM。这些结果与传统的SPR等方法测得的趋势一致，但数值存在差异，体现了单分子纳米孔传感与基于群体平均的 ensemble 实验之间的内在区别。 Fig. 4: Single-molecule detection of interactions between Bcl-xL and small-molecule drugs using YaxAB nanopores. 流程五：单分子PDI指纹识别与药物筛选应用验证区分结合剂与非结合剂：在Bcl-xL存在下，分别加入非结合小分子（LCL-161, GDC-0152等）和强结合剂（ABT-737, A-1331852）。结果显示，非结合剂/Bcl-xL混合物的电流信号与游离Bcl-xL重叠，而强结合剂/Bcl-xL复合物则产生了明显不同的电流阻断和噪声特征。将归一化电流阻断与电流噪声数据结合，绘制二维密度图，可以清晰地将不同小分子药物与Bcl-xL形成的复合物区分为独立的“指纹”峰，从而实现“基于纳米孔的药物指纹识别”。实时竞争结合监测：将Bcl-xL与包含非结合剂和强结合剂的化合物混合物同时孵育，进行实时电流记录。随着时间的推移，游离Bcl-xL的事件群逐渐减少，而Bcl-xL/强结合剂复合物的事件群逐渐出现并最终占据主导，且能区分出ABT-737和A-1331852两种不同结合剂的事件群。此外，在预形成的Bcl-xL/Bak-BH3或Bcl-xL/ABT-737复合物中滴定竞争性药物，可以实时观察到事件群从一种复合物向另一种复合物的动态转变，证明了该方法可用于研究药物竞争结合和结合位点映射。方法普适性验证：将YaxAB纳米孔传感应用于其他靶标蛋白，如FKBP12与其配体FK506、全铁转运蛋白与其小分子配体奥沙利铂的相互作用检测，均观察到了药物结合引起的电流模式特征性变化，证明了该技术对不同靶标蛋白的适用性。研究还测试了该方法在0-5% DMSO（常用于溶解难溶性小分子化合物）条件下的兼容性。 Fig. 5: YaxAB nanopore measurements of drug competition for binding to Bcl-xL. 结果总结（1）成功开发了基于YaxAB毒素的新型生物纳米孔传感器：研究证实了YaxAB能够形成稳定、均一的纳米孔，其独特的漏斗状长通道结构、内壁“肋骨”状凸起以及强阳离子选择性产生的电渗流，使其能够高效捕获多种不同尺寸和电荷的折叠蛋白质（12-77 kDa），并产生高分辨率的电流信号。（2）实现了对未标记折叠蛋白质的单分子检测与区分：YaxAB纳米孔能够捕获并区分不同蛋白质，其电流信号特征（多级阻断、噪声）与蛋白质在孔道内的动态振荡行为相关，该行为受电渗流和电泳力平衡调控，并受蛋白质净电荷和施加电压影响。（3）建立了基于电流阻断和电流噪声的双重分析策略：该策略能够灵敏检测蛋白质与小分子药物或肽配体的结合。即使配体结合未引起蛋白质显著的构象变化，也能通过电流噪声的差异进行区分。这是本研究的一个关键创新点。（4）实现了单分子水平的“药物指纹识别”：通过结合ΔI/I0和In两个参数，在二维图上可以将与同一靶蛋白结合的不同小分子药物清晰区分开来，形成独特的“指纹”。这为高通量药物筛选提供了前所未有的单分子分辨率。（5）展示了在药物发现中的实际应用潜力：研究成功演示了该方法可用于：a) 区分靶蛋白的结合剂与非结合剂；b) 实时监测竞争性结合动力学；c) 定量测定结合亲和力；d) 适用于多个不同靶标蛋白体系；e) 在一定浓度范围内与药物溶解常用溶剂DMSO兼容。讨论与展望研究成功开发并验证了一种基于YaxAB生物纳米孔的单分子传感平台，用于免标记、超灵敏地检测蛋白质-药物相互作用。该技术的核心价值在于其单分子检测能力，这带来了以下显著优势：（1）超高灵敏度：仅需皮摩尔级别的样品量，有利于分析溶解度差的化合物和蛋白质。（2）免标记：无需对蛋白质或药物进行荧光标记等修饰，避免了标记可能带来的干扰和额外成本。（3）实时动态分析：能够监测瞬态或弱亲和力的相互作用，这是群体平均实验难以捕捉的。（4）高信息维度：通过同时分析电流阻断和噪声，提供了丰富的分子动态信息。（5）潜在低成本与高通量：相较于NMR、SPR等需要昂贵仪器的方法，纳米孔技术硬件成本相对较低，且未来易于与自动化、多通道系统集成以实现高通量筛选。本研究将YaxAB纳米孔的应用从单纯的蛋白质检测拓展到了蛋白质-配体相互作用的精细分析领域，特别是能够区分结合了不同小分子药物的同一蛋白质复合物，这为药物发现，尤其是针对传统上“不可成药”的蛋白质-蛋白质相互作用靶点的药物筛选，提供了一种强大的新工具。该方法有望应用于先导化合物优化中的构效关系分析、作用机制研究以及片段库筛选等环节。原文获取原文链接： Single-molecule fingerprinting of protein-drug interaction using a funneled biological nanopore https://www.nature.com/articles/s41467-023-37098-4 欢迎在留言区评论、建议、讨论、交流~

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适应症	最高研发状态	国家/地区	公司	日期
三阴性乳腺癌	临床2期	美国	Novartis Pharmaceuticals Corp.	2012-08-01
三阴性乳腺癌	临床2期	澳大利亚	Novartis Pharmaceuticals Corp.	2012-08-01
三阴性乳腺癌	临床2期	巴西	Novartis Pharmaceuticals Corp.	2012-08-01
三阴性乳腺癌	临床2期	捷克	Novartis Pharmaceuticals Corp.	2012-08-01
三阴性乳腺癌	临床2期	德国	Novartis Pharmaceuticals Corp.	2012-08-01
三阴性乳腺癌	临床2期	爱尔兰	Novartis Pharmaceuticals Corp.	2012-08-01
三阴性乳腺癌	临床2期	意大利	Novartis Pharmaceuticals Corp.	2012-08-01
三阴性乳腺癌	临床2期	俄罗斯	Novartis Pharmaceuticals Corp.	2012-08-01
三阴性乳腺癌	临床2期	韩国	Novartis Pharmaceuticals Corp.	2012-08-01
三阴性乳腺癌	临床2期	西班牙	Novartis Pharmaceuticals Corp.	2012-08-01

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研究	分期	人群特征	评价人数	分组	结果	评价	发布日期


NCT02649673 (Pubmed \| Oncologist)	临床1期	女性生殖器官肿瘤 \| 小细胞肺癌	35	LCL161 plus Oral Topotecan	顧構憲壓膚憲鏇製獵簾(選遞憲鬱顧鹹淵膚願鑰) = 餘鑰製鏇顧蓋壓廠襯獵築鏇顧鏇製鹽鑰艱襯觸 (鬱糧構淵艱襯製憲鏇顧 ) 更多	不佳	2023-05-02
NCT01617668 (Pubmed) 人工标引	临床2期	三阴性乳腺癌 ER Negative \| PR Negative \| HER2 Negative	209	Paclitaxel+LCL 161	鹹顧繭築製餘憲蓋憲繭(製遞襯鹹顧夢觸遞製膚) = 鏇製窪繭廠壓夢淵製觸顧製選膚觸窪顧艱窪艱 (淵簾鬱鹹鬱窪願築壓鹹 ) 更多	积极	2018-09-20
				Paclitaxel	鹹顧繭築製餘憲蓋憲繭(製遞襯鹹顧夢觸遞製膚) = 顧築廠簾獵窪選醖構觸顧製選膚觸窪顧艱窪艱 (淵簾鬱鹹鬱窪願築壓鹹 ) 更多
NCT01617668 (CTgov)	临床2期	三阴性乳腺癌	209	Paclitaxel (LCL161 + Paclitaxel (Gene Expression Signature Positive))	遞膚觸選願餘衊範選鹽(淵蓋壓憲艱構觸遞艱艱) = 襯鏇選範繭鏇壓夢繭鬱廠顧網選餘遞鬱壓顧壓 (網繭鏇觸獵憲願鏇鹽憲, 糧壓蓋膚鏇顧範範齋積 ~ 鑰積積糧膚膚鏇餘膚範) 更多	-	2016-08-31
				Paclitaxel (Paclitaxel Only (Gene Expression Signature Positive))	遞膚觸選願餘衊範選鹽(淵蓋壓憲艱構觸遞艱艱) = 製積醖齋網顧衊鬱艱鑰廠顧網選餘遞鬱壓顧壓 (網繭鏇觸獵憲願鏇鹽憲, 餘網糧鹹餘獵網膚醖網 ~ 窪獵窪鬱鏇鹹壓顧鏇壓) 更多
NCT01617668 (ASCO2015)	临床2期	三阴性乳腺癌新辅助	209	LCL161 with paclitaxel	願襯艱艱鹹鑰簾遞齋膚(築獵夢壓網鏇鹽製壓鬱) = 觸觸觸壓憲範簾遞範顧齋選鏇鹹鏇膚積鹹選餘 (膚淵淵窪選鹹繭膚蓋窪 )	-	2015-05-20
				Paclitaxel alone	願襯艱艱鹹鑰簾遞齋膚(築獵夢壓網鏇鹽製壓鬱) = 觸壓簾繭淵選鑰餘構膚齋選鏇鹹鏇膚積鹹選餘 (膚淵淵窪選鹹繭膚蓋窪 )
AACR2010	临床1期	晚期癌症	27	LCL161	獵遞餘餘獵築齋醖齋範(蓋膚選鏇網獵鹽艱壓築) = 餘艱願壓醖範餘鹹觸顧簾願鬱憲製簾憲網齋廠 (鹹餘構範遞醖築膚餘廠 )	-	2010-04-15