KLF4

学术前沿 单细胞结合空间转录组的研究思路和案例分享 ——肿瘤免疫研究领域（下） 01 引言 单细胞转录组测序是在单个细胞水平进行高通量转录组测序的一项技术，其能有效解决细胞异质性以及之前bulk RNA-seq被掩盖的种种问题。随着该技术在分辨率和通量方面的不断优化，研究者从异质性样本中分析细胞类型特异性基因调控网络的能力也相对提高，但是在细胞的空间位置水平尚有欠缺。空间转录组技术于2020年被《自然》杂志评为年度技术，可以解析时间和空间维度上单个细胞的基因表达模式，以及细胞类群的空间位置关系及生物学特征。其原理是将空间条形码寡核苷酸引物固定在载玻片上，然后将组织贴于载玻片实现组织内转录组序列的捕获与检测。随着10x Genomics的空间Visium技术的登场和不断更新加强，单细胞联合空间转录组的研究如火如荼的开展，遍布了遗传、发育、肿瘤、免疫等多个生物科研和医学热门领域。 一、研究目的 1.某肿瘤中，整体的细胞图谱、空间图谱及细胞间机制探索。 2.某肿瘤中，不同进展期（病变期）、不同亚型、特殊基因表达或原发灶与转移灶样本之间差异机制探索。 3.某肿瘤中，肿瘤对治疗方案的疗效应答中的差异机制探索。 二、样本选择 1. 某癌种中，根据其样本类型的特殊性，选择一定数量的样本，包括新鲜组织、冰冻组织或石蜡样本。 2. 某癌种中，根据原发灶和转移灶、免疫类型（浸润型、沙漠型、排斥型）、基因表达（阴/阳）或不同病理亚型的分组取样。 3. 某癌种中，根据PD1免疫药物治疗/靶向药物治疗/常规放化疗等治疗药物，新辅助、转化治疗等方案，选取应答/无应答、治疗前/治疗后的样本分组取样检测。 三、研究方法 1.主要研究方法：主要应用在发现探索阶段的方法,一般包括流式细胞技术(Facs)、单细胞组学（scRNA-seq）、空间转录组(visium HD)、多重免疫荧光染色(mIF)、探针原位杂交（Xenium）等； 2.其他辅助方法：辅助研究方法应用在机制验证方面，会根据验证模型的不同水平，比如细胞水平、动物模型、人源组织、类器官、网络数据库等等，对应各种生物检测分析方法并没有固定的思路。 四、分析思路 1.单细胞图谱：细胞类型的空间分布特征，亚群的图谱分类； 2.空间图谱绘制：细胞类型的空间分布特征，亚群的定位； 3.各个亚群细胞中的特征，寻找对比差异显著的细胞亚群，从剖析细胞/基因功能空间动态变化、空间细胞分化规律（拟时序）去分析细胞发生的机制和可能作用； 4.各类细胞亚群的相关性，通过细胞通讯、ST定位以及IHC或mIF等图像直观证明细胞亚群间特异的互动关系； 5.实验验证靶点和机制：细胞水平、类器官水平、动物模型水平做敲除干预治疗等验证。 五、文献分享 案例1 《单细胞和空间转录组分析揭示了肝转移性结直肠癌的细胞异质性》 发表期刊：Cell，影响因子：11.5 研究背景：结直肠癌(CRC)是世界上第三大最常见的恶性肿瘤，而转移性 CRC 的生存率很低。CRC转移过程是一个多步骤的过程，包含了癌细胞和基质细胞之间的交流通过分泌细胞因子、生长因子和蛋白酶来促进转移性扩散，从而重塑肿瘤微环境。TME 的细胞组成非常复杂，包括多种成纤维细胞和免疫细胞，它们在癌症逃避、转移和治疗反应中发挥着重要作用。癌症相关成纤维细胞（CAF）是许多类型恶性肿瘤（包括 CRC、乳腺癌和胰腺癌）的主要基质细胞成分。为了全面绘制结直肠癌和匹配的肝转移的细胞景观，研究人员使用scRNA-seq结合空间转录组(ST)和免疫组织化学(IHC)染色以及流式细胞术生成了高分辨率的细胞图谱。 检测技术组合：流式细胞术、单细胞转录组、空间转录组 样本类型：1. 6例CRC患者的27份样本，包括原发性结直肠癌(CC)、邻近正常结直肠粘膜(CN)、肝转移(LM)、邻近正常肝组织(LN)和外周血(PB)五种组织类型用于单细胞转录组检测。 2. 6例CRC患者，包含4例CRC原发性肿瘤（C1至C4）和2例肝转移性肿瘤（L1和L2）采用空间转录组。 主要结果： 1.根据免疫和非免疫细胞群，分别展示了CRC原发肿瘤和CRC肝转移性肿瘤的单细胞转录组图基本分类，以及原发和转移的差异。 Fig.1.CRC原发及肝转移中的全球细胞景观 2.CRC原发性肿瘤和CRC源性肝转移性肿瘤的空间分布 在ST组织中鉴定出B细胞、 T细胞、 NK细胞、浆细胞、髓样细胞、肿瘤细胞、成纤维细胞和内皮细胞。这些细胞簇的比例和分数在每个地区都不同。与C1、C3和C4的肿瘤旁组织相比，肿瘤组织中浆细胞的比率降低。 Fig.2.空间转录组样本的细胞鉴定 3.原发性肿瘤和肝转移性肿瘤之间肿瘤细胞的转录组异质性 亚聚类分析揭示了肿瘤细胞的不同分化谱系。在各群中鉴定出簇状细胞的分化标志基因。肿瘤细胞群的异质性表明肿瘤细胞的分化潜力。 为了进一步研究不同肿瘤细胞簇的功能通路和转录程序，进行了基因集变异分析（GSVA）和转录因子（TF）分析。结果显示，表明CA2可能是TME中的干细胞亚群。 Fig.3.原发性和转移性肿瘤细胞的转录组特征和异质性 4.TME重塑髓系细胞的组成 鉴定出三种髓系细胞：单核细胞/巨噬细胞、树突状细胞和肥大细胞。使用亚聚类分析确定了8个单核细胞/巨噬细胞簇和3个常规DC（cDC）簇，GSVA分析显示，Mac_SPP1亚群参与了与炎症反应相关的通路。拟时序显示Mac_CXCL9 和 Mac_SPP1 亚群均发生终末分化，表明它们是肿瘤激活的Mac亚群。cDC_LAMP3 亚群还表现出高水平的成本刺激分子CD40CD80和CD86 表达，它们是DC成熟的标志物。在LM中，cDC_LAMP3亚群的比例显著增加表明肿瘤细胞对TIME的重塑作用。 Fig.4.骨髓细胞的免疫景观 5.CXCL13T 细胞在肝转移性肿瘤中富集 在 T 细胞中，7个CD8 T细胞簇、5个常规CD4 T（cCD4）细胞簇和2个调节T细胞簇被识别。从细胞比例显示，无论是CD8还是CD4的T细胞，LM的CXCL13T细胞子集比例都很高。GSVA分析显示，CD8_CXCL13亚群富含T细胞增殖通路，CD4_CXCL13 亚群富含G细胞+2-M检查点通路。用流式细胞术鉴定了CD69+CD103+CD8+T细胞。CC和LM的CD69+CD103+CD8+T细胞的Ki67表达水平均高于其他CD8+T细胞。然而，来自CN和LN的不同CD8+T细胞亚群的增殖特性几乎相同。 Fig.5.CXCL13+T细胞在肝转移瘤中富集 6.CXCL13 T细胞与CRC患者的良好预后相关 在上图验证CD8_CXCL13细胞可能是肿瘤激活的亚群。进一步对CD8_CXCL13子集的特征做深入研究。与其他亚群相比，在CD8_CXCL13亚群中观察到高水平的耗竭标志物，且耗竭表型表明它们的肿瘤反应性。IHC难以检测组织中的CXCL13，因此选用CD69和CD103标记CXCL13细胞，结果显示该群T细胞比肿瘤组织中的其他CD8 T细胞更接近CK19肿瘤细胞。将基因表达综合（GEO）队列中的CRC患者分为CXCL13+高和CXCL13低组，发现CC中 CXCL13 的较高表达预示着更好的总生存期。 Fig.6. CXCL13+ T细胞的特性及预后影响 7.成纤维细胞的不同亚群存在于 CRC 的原发性和肝脏转移性肿瘤中 在CRC的TME中鉴定出8个具有不同基因表达模式的成纤维细胞簇，然后研究人员对各类成纤维细胞分别做了转录组数据比较、IHC组化、拟时序分析、以及ST分析，在CRC原发性和肝转移性肿瘤之间观察到不同的表型谱和成纤维细胞的高度可变频率，这表明在不同癌症环境中TME内的细胞异质性。 Fig.7. 原发性和转移性肿瘤中成纤维细胞的转录组特征和异质性 8.在原发性肿瘤中富集的 F3 表达成纤维细胞亚群分泌促肿瘤因子，并与 CRC 患者的不良预后相关 为了研究富含CC和LM的不同成纤维细胞对TME 的重塑，研究人员分析了F2_MCAM和F4_F3的特征。通过差异基因富集以及F4_F3细胞与肿瘤细胞之间揭示了通过NRG1和Erb-B2受体酪氨酸激酶3 （ERBB3）通路进行串扰。在ST中发现了两类细胞 F3与NRG1的共定位并通过transwell细胞实验迁移证明。最后在预后数据中发现F3和NRG1 高表达水平的CRC患者总生存期较差。 Fig.8. F3+成纤维细胞的特性及预后影响 9. LM的TME中表达MCAM的成纤维细胞通过Notch 信号通路调节CD8_CXCL13细胞的产生 之前发现RBPJ在LM中的表达与CXCL13和ITGAE呈正相关。为了进一步了解两个亚群受到什么类型的细胞调节Notch信号，采用cellphoneDB分析，在内皮细胞中E2_DLL4亚群与CXCL13+ T细胞的相互作用最强，在成纤维细胞中F2_MCAM簇通JAG1-NOTCH1与CD8_CXCL13和CD4_CXCL13亚群相互作用。由于TME中成纤维细胞的分散分布模式，推测F2_MCAM亚群有助于CXCL13+ T细胞中Notch信号的激活。此外根据LM中F2_MCAM的比例高低，发现F2_MCAM高组患者LM中CD8_CXCL13亚群的浸润评分更高，并在ST中得到了验证，使用JASPAR预测表明RBPJ可能作TF影响CXCL13的表达。 Fig.9. TME中的NOTCH信号调节CD8_CXCL13细胞的生成 10.ST组织中的细胞间相互作用网络 原发性肿瘤和肝转移性肿瘤ST中不同簇之间的细胞相互作用，表明ERBB3-NRG1相互作用在原发性肿瘤发生和转移中的潜在作用，发现在CRC原发肿瘤中富集的F3成纤维细胞可以通过产生各种促肿瘤因子（包括 NRG1）来调节发展和/或迁移，这些因子与肿瘤细胞上表达的ERBB3相互作用以发挥其促肿瘤功能。 Fig.10. ST组织中的细胞配体和受体相互作用 案例2 《空间和单细胞转录组学揭示了HNSCC中与癌症相关的成纤维细胞亚群限制了CD8+ T细胞的浸润和抗肿瘤活性》 发表期刊：Cancer Research，影响因子：12.5 样本类型：5例头颈部鳞状细胞癌HNSCC癌和癌旁组织； 技术组合：单细胞RNA转录组、空间转录组、免疫组化、免疫荧光、其他等等； 研究背景：免疫治疗可以延长一些HNSCC患者的生存期，但应答率仍然很低。阐明肿瘤微环境中cd8+t细胞浸润和功能障碍的关键机制有助于最大限度地发挥免疫治疗HNSCC的益处。CD8+T细胞与包括CAFs在内的其他类型细胞之间的相互作用决定了CD8+T细胞如何在这一动态TME中发挥作用，本研究对五对肿瘤和邻近组织的不同免疫浸润和单细胞RNA测序的HNSCC标本进行了空间转录组学分析，揭示了与cd8 + t细胞浸润限制和功能障碍相关的特定癌症相关成纤维细胞(CAF)亚群。 技术路线： 主要结果： 1. HNSCC肿瘤组织对CD8+T细胞具有招募趋化作用，CD8+T细胞存在于肿瘤基质中，且免疫排斥型的HNSCC中CD8a+被受限无法浸润到肿瘤巢中； Fig 1.CD8+T细胞在不同HNSCC肿瘤亚型中的分布 2.MHC-IhiCAFs（5亚群）是肿瘤组织中区别于癌旁组织的最主要的CAFs亚群，高表达CXCLs和MHC-I增强了CAFs与CD8+T的结合，且可通过限制CD8+T细胞的抗肿瘤能力造成预后不良； Fig 2.HNSCC肿瘤及邻近组织成纤维细胞的整体分析 3. MHC-IhiCAFs中存在LGALS9（编码galectin-9蛋白）的富集，大部分HNSCC肿瘤基质中均存在galectin-9蛋白的表达；MHC-IhiCAFs中galectin-9蛋白的表达依赖于干扰素信号； Fig3. TCF1 ~ GZMK ~ CD8 + T细胞与galectin-9的CAF细胞呈负相关 4.在CAFs中敲减LGALS9表达会降低CD8+T表达免疫检查点分子，同时促进干性和细胞毒性分子的表达，且动物实验证明Gal-9+CAFs促进干细胞样CD8+T细胞耗竭转化。 图4. 动物实验验证MHC I类的高表达限制了cd8+T细胞的抗肿瘤功能 案例3 《上皮细胞激活成纤维细胞促进食管癌的发展》 发表期刊：Cancer cell，影响因子：48.8 样本类型：29例ESCC患者79个多期食管病变的正常上皮、癌前病变和癌组织； 技术组合：单细胞RNA转录组、空间转录组、免疫组化、免疫荧光、其他等等； 研究背景：食管鳞状细胞癌(ESCC)的发展经历了多阶段上皮癌的形成，即从正常上皮、低级别和高级别上皮内瘤变到浸润性癌。然而，癌前病变如何发展为癌机制尚未可知。 主要结果： 1.ESCC多阶段肿瘤发生过程各种细胞类型图谱分析 Fig 1.单细胞转录组学分析揭示了ESCC多阶段肿瘤发生过程中的各种细胞类型 2.上皮细胞中ANXA1的功能失调可能是ESCC肿瘤发生中至关重要的事件； Fig 2.上皮细胞在ESCC肿瘤发生过程中逐渐抑制ANXA1表达 3.ESCC肿瘤发生过程中上皮细胞与成纤维细胞的相互作用，食管上皮细胞产生的ANXA1功能的丧失可能导致NF-CAF转化； Fig 3.上皮细胞抑制ANXA1可促进NF向CAFs转化 4.KLF4、KLF5、CEBPB和FOXA1与ANXA1的RNA水平呈正相关，细胞实验发现只有靶向KFL4的SiRNA可显著抑制ANXA1表达，KLF4调节ANXA1转录，促进NFs向myCAF的转化。 图4.在体外和体内，抑制上皮细胞ANXA1可促进myCAF的激活 参考文献： [1]Wang F, Long J, Li L, Wu ZX, Da TT, Wang XQ, Huang C, Jiang YH, Yao XQ, Ma HQ, Lian ZX, Zhao ZB, Cao J. Single-cell and spatial transcriptome analysis reveals the cellular heterogeneity of liver metastatic colorectal cancer. Sci Adv. 2023 Jun 16;9(24):eadf5464. doi: 10.1126/sciadv.adf5464. Epub 2023 Jun 16. PMID: 37327339; PMCID: PMC10275599. [2]Li C, Guo H, Zhai P, Yan M, Liu C, Wang X, Shi C, Li J, Tong T, Zhang Z, Ma H, Zhang J. Spatial and Single-Cell Transcriptomics Reveal a Cancer-Associated Fibroblast Subset in HNSCC That Restricts Infiltration and Antitumor Activity of CD8+ T Cells. Cancer Res. 2024 Jan 16;84(2):258-275. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-23-1448. PMID: 37930937; PMCID: PMC10790129. [3]Chen Y, Zhu S, Liu T, Zhang S, Lu J, Fan W, Lin L, Xiang T, Yang J, Zhao X, Xi Y, Ma Y, Cheng G, Lin D, Wu C. Epithelial cells activate fibroblasts to promote esophageal cancer development. Cancer Cell. 2023 May 8;41(5):903-918.e8. doi: 10.1016/j.ccell.2023.03.001. Epub 2023 Mar 23. PMID: 36963399. 本文由 科研学术部 何鼎 提供

Data replicate and expand upon the potential of ER-100 to improve retinal ganglion cell function and restore visual function in a nonhuman primate model of nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy (NAION)BOSTON, Oct. 21, 2024 (GLOBE NEWSWIRE) -- Life Biosciences (“Life Bio”), a biotechnology company advancing innovative cellular rejuvenation technologies to reverse diseases of aging and injury and ultimately restore health for patients, today announced new data presented at the 2024 American Association of Ophthalmology (AAO) Annual Meeting that took place in Chicago, Illinois from October 18-21, 2024. Results replicate previously reported nonhuman primate (NHP) data and further expand our knowledge on dosing and timing of treatment. ER-100, a novel partial epigenetic reprogramming gene therapy containing Oct-4, Sox-2 and Klf-4 (OSK), was administered via a single intravitreal injection along with daily systemic doxycycline to NHPs with a NAION-like injury. Immunohistochemistry confirmed expression of each transcription factor (Oct-4, Sox-2 and Klf-4) in discrete cells in the perifoveal regions in ER-100 treated NHPs relative to vehicle. Furthermore, ER-100 significantly reduced deficits in pattern electroretinogram and axon density measures when administered in both prevention and rescue paradigms. Collectively, these results demonstrate that ER-100 successfully targets retinal ganglion cells and reduces the loss of visual function in an NHP model of NAION. Life Bio remains on track to initiate the first human clinical study evaluating ER-100 for optic neuropathies in the second half of 2025. “Partial epigenetic reprogramming has the potential to restore visual function for those with optic neuropathies such as NAION and glaucoma,” said Sharon Rosenzweig-Lipson, Ph.D., Chief Scientific Officer of Life Bio. “The data shared today replicate and build upon our understanding of the dosing of ER-100 and the timing of the treatment window relative to the onset of NAION-related damage. We look forward to advancing this program toward human clinical trials next year for patients affected by these age-related optic neuropathies.” About Life Biosciences Life Biosciences is a biotechnology company advancing innovative cellular rejuvenation platforms to reverse diseases of aging and injury and ultimately restore health for patients. The company is focusing on two platforms targeting key mechanisms underlying aging biology, epigenetic reprogramming and chaperone-mediated autophagy, to restore cells to a more youthful state. Therapies developed within these platforms have the potential to prevent, treat, and/or reverse multiple aging-related diseases. For more information, please visit www.lifebiosciences.com or follow us on Twitter and LinkedIn. Media Contact Kristin Politi, Ph.D.LifeSci Communicationskpoliti@lifescicomms.com(646) 876-4783

2023年10月25日，在FDA生物制品评价与研究中心（CBER）的产品监管建议（INTERACT）会议上，抗衰企业Turn Biotechnologies（以下简称“Turn Bio”）基于mRNA的细胞再生疗法TRN-001获得了FDA的积极反馈。 会议上，Turn Bio与FDA重点讨论了TRN-001的未来发展方向。结果表示，TRN-001有望成为首个在细胞水平上修复受损皮肤、改善皮肤完整性并减少炎症和细胞衰老的治疗方法。此次会议的结果表明，Turn Bio有望成为首家将基于mRNA的细胞再生疗法推向临床试验的公司。 作为抗衰领域的明星企业，Turn Bio成立于2019年，现总部位于硅谷。公司专注于通过表观遗传重编程技术研发mRNA药物，进而从细胞层面修复组织从而使细胞恢复年轻活力，修复衰老过程造成的损害。基于专有的mRNA技术平台ERA™和药物传递平台eTurna™，Turn Bio目前开发了多个候选管线，治疗领域包括皮肤科、骨关节炎和软骨损伤、免疫学、眼科、肌肉组织损伤等。其中，TRN-001进展较快，目前处于临床前研究阶段，即将推向临床试验阶段。 核心技术平台ERA™：可高效逆转细胞老化并维持细胞特性 将成熟细胞重编程转化为干细胞的过程被称为“重编程”。2006年，日本科学家山中伸弥发现4种转录因子（Oct3/4、Sox2、Klf4、c-Myc）可以将高度分化的体细胞逆转为多能干细胞，使其重新具备分化成不同类型细胞的能力，这个过程被称为重编程。重编程技术会产生“去分化”和“年轻化”两种影响，即能够将细胞中与衰老相关的表观遗传信息重编程，使细胞转变为类似于胚胎干细胞的状态，从而将细胞的表观遗传时钟调拨回零，实现细胞水平层面的“返老还童”。 而使细胞发生重编程主要通过两种形式实现，分别是：一、通过递送外源的转录因子系统进入到细胞或动物中；二、激活或调控内源的命运转录因子表达。其中，从第一种形式看，可以通过将细胞命运转录因子包装进病毒或mRNA，而后将其注入细胞或动物中，以传递想要实现的功能。 基于此，Turn Bio在斯坦福大学Vittorio Sebastiano博士实验室的表观遗传重编程技术许可的基础上，开发了利用衰老表观遗传重编程逆转细胞老化的创新技术平台ERA™。 ERA™旨在利用特定的转录因子mRNA混合物（如Myc、Oct3/4、Sox2和Klf4等特定蛋白质），通过控制遗传信息从DNA到mRNA的转录速率来打开或关闭基因，从而调控细胞功能并记录细胞年龄的表观基因组的“逆转”，最终恢复细胞的最佳基因表达并促进组织再生。基于该技术平台，Turn Bio能够开发用于干细胞治疗的mRNA药物，以修复受损组织或治疗衰老相关性疾病。 据悉，ERA™平台旨在实现安全、快速、高效且可调的重编程过程。通过ERA™平台，Turn Bio能够利用mRNA将转录因子传递至表观基因组。在此过程中，Turn Bio能够严格控制转录因子进入细胞的时间、持续时间和剂量，从而为不同适应症优化mRNA 混合物。例如，Turn Bio可以根据特定组织所获得的益处，添加或去除特定的转录因子。 随后，Turn Bio可通过精确地向细胞脉冲式传递转录因子，逐步控制重编程过程，将表观基因组推向更年轻的状态。每次脉冲都会将表观基因组推向更有活力的状态，在稳步恢复细胞功能的同时保护患者。 值得一提的是，在研发创新疗法的过程中，Turn Bio发现使用静止期干细胞可以显著帮助修复或替换特定类型的受损组织。其中，静止期干细胞是指处于相对不活跃状态、细胞周期停滞的干细胞。诸多研究证实，它具有低代谢活性、长期存活、抗逆性强等特点，并拥有组织修复和再生、维持组织稳态、疾病治疗潜力等作用。因此，在启用这些干细胞前，必须确保其处于静止状态，以确保它们随时可以被激活、增殖和分化。 在此情况下，Turn Bio采用自主研发的“人工生态位（AN™）”技术保护干细胞。AN™技术将干细胞生物学、生物分子材料工程与微加工技术相结合，以生成模拟微环境关键生化或结构方面的新型细胞培养平台。其研究显示，在AN™微环境中培养的肌肉干细胞（MuSC）在移植后表现出更强的植入、组织再生和自我更新潜力。 在Turn Bio联用AN™与ERA™技术用于恢复老年小鼠模型干细胞的研究中，研究结果显示，接受联合治疗的老年MuSCs能够恢复与年龄相关的肌肉功能障碍（如肌肉无力），该治疗效果与移植年轻供体的MuSCs所产生的效果相似。重要的是，AN™技术也适用于从其他组织分离出的干细胞的培养。其中，该技术最有可能应用于那些静止状态是维持干细胞功能的必要条件的组织，例如造血系统、肝脏、大脑、毛囊等不同区域和组织中的某些间充质干细胞。 除此之外，Turn Bio还克服了药物递送问题，开发了一个新型脂质递送平台 eTurna™。该平台克服了传统脂质载体不稳定性、生物利用度差、溶解性差和体内吸收性差等难题，采用更优化的纳米结构载体，能够安全有效地递送需要不同给药途径的各种药物，并且可以针对特定的组织和细胞进行微调和定位，准确地将药物递送并靶向到特定的组织和细胞。 多个管线临床前研究效果显著，核心产品即将进入临床阶段 目前，通过专有技术平台，Turn Bio已布局了多个候选管线，包括皮肤科、骨关节炎和软骨损伤、免疫学、眼科、肌肉组织损伤等治疗领域。  Turn Bio产品管线 图源：Turn Bio官网 目前，TRN-001进展较快。TRN-001是一款拥有独特配方的皮肤抗衰药物，被开发用于治疗毛发和皮肤问题，例如皱纹、脱发、疤痕、炎症、伤口以及晒伤等。临床前研究结果显示，TRN-001可改善皮肤完整性、减少炎症和细胞衰老，并实现毛囊转染，恢复毛囊的毛发生长能力。 在骨关节炎和软骨损伤方面，Turn Bio开发了TRN-002。这是一种修复保护性软骨的候选药物，可有效逆转关节损伤，使人们恢复更健康的生活方式。临床前研究结果显示，TRN-002可减少氧化应激和炎症，并改善细胞分裂周期和细胞扩增。 在与年龄相关的眼部退行性疾病方面，Turn Bio布局了两大候选产品——TRN-003与TRN-004。其中，TRN -004是一种恢复眼部组织活力的候选药物，包括角膜、角膜缘和结膜上皮细胞以及角膜内皮细胞。临床前研究结果显示 TRN-004可减轻炎症和氧化应激并减少细胞衰老。 在肌肉组织损伤方面，Turn Bio正在开发TRN-005。这是一种可恢复肌肉质量和力量，并逆转与年龄相关性疾病的候选药物。临床前研究结果表明，接受TRN-005 治疗后，肌肉组织干细胞生长和分化得到改善，肌肉恢复加快，纤维厚度和力量输出增加。此外，经TRN-005治疗后的肌肉对后期损伤具有更强的抵抗力。 值得关注的是，在癌症治疗方面，Turn Bio也布局了相应管线。TRN -010是一款针对T细胞的候选药物。它可以简单地添加到任何CAR-T疗法的制造过程中，并以表观遗传方式重编程患者的T细胞，从而产生更年轻的功能状态，防止T细胞衰竭并产生更高的效力。 Turn Bio表示，恢复T细胞活力和减少细胞衰竭预计将使更多老年患者能够以更低的成本获得CAR-T疗法。临床前研究结果显示，TRN-010治疗可显著提高T细胞增殖和杀死癌细胞的能力，最高可提高5倍。这意味着，对于患者而言，该疗法具有更强的药效和更高的耐受性。 与韩国药企达成3亿美元合作，共同开发眼耳疾病新疗法 自成立以来，Turn Bio的核心技术与候选产品获得了市场和资本的诸多青睐。目前，Turn Bio已完成了4轮融资，投资者包括Astellas Venture Management、LongeVC、Methuselah Funds等在内的11家知名投资机构和企业。 2024年5月28日，Turn Bio宣布与韩国制药巨头HanAll Biopharma签署了全球独家许可协议，共同开发治疗眼耳疾病的表观遗传重编程疗法。其中，该协议授予HanAll Biopharma利用Turn Bio的ERA™技术研究、开发、制造和商业化眼科和耳科疾病药物的权利。据其表示，首款产品的交易价值可能超过3亿美元。 除此之外，韩国制药企业Daewoong Pharmaceutical亦认可了Turn Bio 的技术和研发方向，并通过投资的方式参与了该公司的融资活动，以推动抗衰药物的研发。 超10家企业押注细胞重编程，多个产品已进入临床阶段 作为延缓衰老的前沿技术之一，细胞重编程目前已成为抗衰领域中最热门的研究之一。近年来，随着技术的不断进步和完善，细胞重编程取得了显著的进展，为延缓衰老、治疗与衰老相关疾病提供了新的可能性。 目前，已有多家国内外企业应用细胞重编程方法来开发延缓衰老、治疗年龄相关性疾病的创新疗法，主要包括昕瑞再生、中盛溯源、霍德生物、华夏源细胞工程集团、Retro Bio、Altos Labs、YouthBio Therapeutics、NewLimit、AgeX Therapeutics以及谷歌创立的抗衰生物公司Calico。  部分布局细胞重编程企业（不完全统计，企业排名不分先后） 图源：公开数据整理，动脉网制图 目前，多家公司如昕瑞再生、中盛溯源、艾尔普再生等，已将核心产品推进到临床前或临床研究阶段，验证了细胞重编程技术在抗衰和治疗年龄相关性疾病方面的潜力。与此同时，细胞重编程技术正在不断发展和创新，出现了多种细胞重编程的改进方法，如瞬时重编程、部分重编程等，提高了重编程的效率和安全性。此外，细胞重编程技术不仅应用于组织器官原位再生，还涉及纤维化逆转、免疫疗法等多个领域，未来有望针对不同的疾病类型提供个性化的治疗方案。 不过，细胞重编程技术在应用中仍面临着安全性和稳定性等问题。现有研究结果也显示，细胞重编程技术存在致病风险。2013年，西班牙巴塞罗那生物医学研究所Manuel Serrano团队发表论文称，将山中因子应用在小鼠身上，根据重编程发生程度的不同，部分小鼠显示出组织年轻化的迹象，但另一部分小鼠分化出现畸胎瘤。 但是，随着技术的不断创新和临床研究的深入，细胞重编程技术的风险或将逐渐降低，细胞重编程抗衰赛道也将迎来全新的发展。未来预计将会有诸多产品应用于临床，为抗衰和治疗年龄相关性疾病带来革命性的变化。 如果您想对接文章中提到的项目，或您的项目想被动脉网报道，或者发布融资新闻，请与我们联系；也可加入动脉网行业社群，结交更多志同道合的好友。 近 期 推 荐 声明：动脉网所刊载内容之知识产权为动脉网及相关权利人专属所有或持有。未经许可，禁止进行转载、摘编、复制及建立镜像等任何使用。 动脉网，未来医疗服务平台