Acyl coenzyme A:cholesterol acyltransferase

从抗击各种疾病的新药问世，到对罕见病治疗方法的不断探索，药品研发不仅为人类的健康带来了福音，也极大地丰富了生命科学的研究领域。全球范围内，药品研发的热度不断升温，而中国作为世界第二大经济体，在药品研发领域也展现出强大的实力和潜力，一份专注于药物研发分析的《全球及中国药品研发热度地图》（下文简称《药品研发地图》）应运而生。 本文将基于《药品研发地图》及米内网全球药物研发库的统计数据，聚焦全球及中国药品研发的最新动态和趋势，帮助读者深入了解药品研发的热点领域、关键技术、重要企业......更多精彩内容和核心数据将在2024米思会上以展板形式呈现，干货满满，敬请期待！ 新药研发TOP20“大比拼”，企业、适应症、靶点...... 米内网全球药物研发数据库显示，新药TOP20适应症方面，全球竞争格局中以炎症性疾病、疼痛、阿尔茨海默病、乳腺癌等疾病为主，其相关药物均超过2000个（统计范围自药物发现阶段至已上市阶段，下同）。目前已上市品种数最多的适应症为非胰岛素依赖型糖尿病，有164个；提交上市申请品种数最多的适应症为疼痛，有32个。 而国内竞争格局中，转移性非小细胞肺癌、非胰岛素依赖型糖尿病、非小细胞肺癌、乳腺癌、转移性乳腺癌等位居前五，相关药物均超过300个。目前已上市品种数最多的适应症为非胰岛素依赖型糖尿病和乙型肝炎病毒感染，均有62个；提交上市申请品种数超过10个的适应症有4个，包括转移性非小细胞肺癌、非胰岛素依赖型糖尿病、转移性乳腺癌以及类风湿性关节炎。 全球新药TOP20适应症/品种格局（单位：个） 中国新药TOP20适应症/品种格局（单位：个） 新药TOP20企业方面，在全球竞争格局中，辉瑞、GSK、默沙东、赛诺菲、罗氏等外资厂商遥遥领先，涉及相关药物的数量（含重复计算）均在1000个及以上；而在国内竞争格局中，恒瑞医药、正大制药、国药集团、复星医药和石药集团力压一众外资药企，问鼎榜单前五名，此外，挺进榜单TOP20的国内药企还有先声药业、信达生物、上海医药和百济神州等。 全球新药TOP20企业/项目格局（单位：个） 中国新药TOP20企业/项目格局（单位：个） 新药TOP20靶点格局中，EGFR和HER2是“热门选手”，在全球和中国范围内，涉及的相关药物数量均高居第一位和第二位。此外，PD-L1、CD19、PD-1、GLP-1、CD3、TNF等热门靶点均凭借过百个相关药物踏入榜单前十之列。 阿兹海默症、疼痛、NASH......全球热点适应症“全剖析” 有效选择少、市场潜力大、关注度高等关键指标，是划分全球热点适应症的重要参考依据。对此，米内网将根据上述三大指标，挑选出部分业内高度关注的适应症进行多维度透视和全方位剖析。 比如，阿兹海默症目前有超过2000款药物在研，其中超过1600款药物处于临床前或药物发现阶段，已获批上市的药物约有37款，但疗效大多不太理想。作为“新晋”明星产品，卫材的仑卡奈单抗于2023年1月获FDA咨询委员会全票支持通过、批准上市，并于2023年9月、2024年1月先后登陆日本和中国市场。 阿兹海默症各研发阶段品种格局（单位：个） 疼痛目前有超过2000款药物在研，其中有156款药物获批上市，已提交上市申请的药物有32款，处于Ⅲ期临床的药物有98款。从TOP20靶点上看，OPRM1、OPR、COX、COX2涉及相关药物均超过100个，已上市的药品分别达50个、21个、37个和20个，其合计上市药品数占疼痛适应症已上市药品总数的八成以上。 疼痛TOP20靶点/品种格局（单位：个） 代谢相关脂肪性肝炎(NASH)目前以临床前及药物发现的药物居多，合计超过400款，而已上市的药物及已提交上市申请的药物仅有2款和1款。TOP20企业方面，阿斯利康、勃林格殷格翰、诺华、辉瑞等外资厂商涉及在研药物较多，而众生药业、无锡药明康德药业、上海拓臻生物科技、先为达生物等国内药企也纷纷迈进TOP20之列。 NASH适应症TOP20企业/项目格局（单位：个） 此外，结直肠肿瘤（不含转移性结直肠肿瘤）、年龄相关性黄斑变性、衰老等热门适应症，已获批上市的药物均少于20款，而处于研发阶段的药物均超过百款；从TOP20地区分布情况看，美国、中国、英国、日本、韩国、德国等为在研药物较多、较集中的地区。 “新”、“快”、“缺”等中国“特色”药物靶点“全透视” “中国新”靶点，指的是全球已上市，中国暂未上市，但已有在研发的靶点。据米内网统计，目前国内共有270多个“中国新”靶点，其中处于Ⅲ期临床的“中国新”靶点最多，有74个，占比约为27%。 “中国新”靶点最高研发阶段格局 在“中国新”靶点中，CLDN18.2是最为突出的靶点之一，目前国内该类靶点在研药物有75个，是“中国新”靶点中涉及在研药物最多的靶点。安斯泰来制药的佐妥昔单抗是目前全球唯一获批上市的CLDN18.2靶向药，在国内正处于申报上市在审阶段。 “中国快”靶点指的是：全球未有上市，国内有处于临床研发阶段及以上的靶点，且该靶点在国内药物最高研发阶段全球最先。据米内网统计，国内该类靶点合计223个，其中处于Ⅱ期临床的数量最多，占比达44%。 此外，处于提交上市申请阶段的“中国快”靶点有8个，包括：GNEF、ITGA5/B3、ITGA2B/B3、NRG1、ACAT、Oxyntomodulin ligand、PTEN、Ubiquitin ligase。其中，巴替非班由百奥泰研发，是一款靶向ITGA5/B3的1类新药，用于不稳定型心绞痛或非Q波心肌梗塞治疗，目前在国内处于报产在审阶段，上市可期。 巴替非班全球研发进度 “中国缺”靶点是指：全球已有研发上市，但中国未有企业布局的靶点。米内网数据显示，目前共有3000余个“中国缺”靶点，其中处于临床前或其更早阶段的合计占比超过五成，处于临床及以上阶段的约有1321个。 值得一提的是，“中国缺”靶点在全球已有布局，是创新药物的摇篮。该类靶点在中国的空窗期可能是创新药企实现“快人一步”的关键时期，研究价值大。 “中国缺”靶点TOP20分布（单位：个） 国产1类新药获批靶点解析，PD-(L)1、EGFR......成热门选手 2023年是国产创新药收获颇丰的一年。伴随兆科药业的索卡佐利单抗、恒瑞医药的阿得贝利单抗、正大天晴药业的派安普利单抗、信达生物的托莱西单抗等1类新药获批上市，PD-1/PD-L1、EGFR、c-Met、ATP4A、PCSK9等相关靶点的表现亦十分亮眼。 米内网数据显示，上述热门靶点目前均涉及不少在研药物，其中，EGFR在全球的在研药物最多，有729个；PD-1/PD-L1在国内在研药物最多，有315个。 部分热门靶点在全球及中国的在研药物数量（单位：个） PD-1/PD-L1为最热门的靶点之一，2023年在国内有3款1类新药获批上市，包括索卡佐利单抗、阿得贝利单抗和派安普利单抗。截至目前，全球已有17款PD-1药物和8款PD-L1药物获批，其中在中国上市的分别有11款和6款。 值得关注的是，目前中国在研的PD-1/PD-L1药物合计超过300个，靶点研发拥挤程度高，其中超过半数的药物仍处于临床前或药物发现阶段，入局的企业需谨慎。 中国在研PD-1/PD-L1药物情况 EGFR是一种跨膜酪氨酸激酶受体，它可促进许多细胞的生长和分化，包括胚胎发育、成年组织的维持和修复、以及癌症细胞的增殖和转移，疗效优势十分突出。 与此同时，EGFR也是一个相当热门的靶点，全球已有36个该靶点相关药物获批上市；在中国开展研究的药物超过200个，其中已上市的有24个（约占9%），提交上市申请的有10个（约占4%），处于Ⅲ期临床的有18个（约占7%），处于Ⅱ期临床的有35个（约占14%），处于Ⅰ期临床的有42个（约占16%）。 全球在研EGFR药物分布（单位：个） c-Met又名肝细胞生长因子受体(HGFR)，能促进细胞增殖、细胞生长、血管生成等。目前，全球已获批上市的c-Met药物有9个，其中4个已在中国获批，分别为克唑替尼、赛沃替尼、伯瑞替尼和谷美替尼。在研c-Met药物中，处于临床前或药物发现早期阶段的占比合计超过五成，提交上市申请的有4个（约占5%），处于Ⅲ期临床的有5个（约占6%）。 ATP4A是一种细胞膜转运蛋白，也是消化系统的一个重要靶点。2023年在国内获批上市的ATP4A靶向1类新药包括安奈拉唑钠肠溶片、盐酸凯普拉生片等，适应症为十二指肠溃疡和反流性食管炎。米内网数据显示，ATP4A靶点在全球有140余个药物处于研发阶段，39个药物已获批上市；在中国有35个开展研究的药物，其中13个已获批上市，4个已提交上市申请在审。 PCSK9是一种由肝脏合成分泌的丝氨酸蛋白酶，可与低密度脂蛋白受体(LDLR)结合，促进细胞内降解以防止其再循环。目前已有4个PCSK9靶向药获批上市，包括安进的依洛尤单抗、赛诺菲的阿利西尤单抗、诺华的英克司兰、信达生物的托莱西单抗；在研新品方面，康方生物的伊努西单抗、君实生物的昂戈瑞西单抗、恒瑞医药的瑞卡西单抗等1类新药均处于申报上市阶段。 结语 通过《全球及中国药品研发热度地图》，米内网希望能为读者提供一个更全面、更深入的药品研发视角。让我们共同期待，在不久的未来，更多颇具临床价值、差异化的创新药面世，为人类的健康事业做出更大的贡献！ 数据来源：CDE官网、米内网数据库等注：数据统计截至2024年4月底 本文为原创稿件，转载请注明来源和作者，否则将追究侵权责任。投稿及报料请发邮件到872470254@qq.com稿件要求详询米内微信首页菜单栏商务及内容合作可联系QQ：412539092 【分享、点赞、在看】点一点不失联哦

作者｜景言 近 30 年来，随着生活水平的提高，我国高脂血症患病率明显增加。自从他汀类药物问世以来，高胆固醇的问题解决大半。依折麦布作为首个胆固醇吸收抑制剂，它的发现可以说实力与运气并存，研发人员在无心插柳之时发现了这项足以改变后世降脂方案的用药。令人深思的是其设计研究的过程中没有任何已知的靶点可供参考，是一种完全基于受体外、脱离受体模型的研究方式，是一种“早于受体的抑制剂”。其所走过的路径提供了开拓思维的借鉴意义，本文通过分享其研发与验证的小故事，希望为新药研发领域带来一些启发。 图1：依折麦布的研发历程概览  01  依折麦布的研发历程一直以来，对于药物研发的基本思路是首先发现某一作用靶点，进而研究其增强或抑制剂，再通过不断优化其有机结构完成某一新药的研发与推广。而依折麦布作为首个胆固醇吸收抑制剂，其上市时间远早于其靶点受体的发现，这一不走寻常路的药物研发成为了医疗制药领域的轶事。20世纪80年代末，医药巨头默沙东公司研发的洛伐他汀横空出世，其强大的治疗效果使其名利双收，从此制药领域引发了降脂药物的研发热潮。 图2: 洛伐他汀在这次热潮中，先灵葆雅公司将注意力放在了ACAT上——其是催化胆固醇重新酯化进而进入人体的关键酶。他们以ACAT抑制剂为起点，设计优化分子结构并进行有机结构的改进和筛选，再通过生物测试验证其降脂效果。然而结果却不尽如人意，实际治疗效果远远达不到预期。但在研究过程中得到的一个产率不到5%的副产物有着意想不到的降脂活性。然而这一产物虽然在体外有着优异的ACAT抑制作用，但是在体试验中，对试验动物的高脂血症治疗效果收效甚微。频繁出现的体内和体外疗效差异使得先灵葆雅公司高层在再三讨论后，决定放弃体外试验，直接在试验动物体内开展在体试验进行药物筛选。但随着研究的进展，高额的科研支出并没有换来满意的结果，最终公司决定终止这一研究，以收集数据、发表文章作为项目的收尾。峰回路转，在实验组撰写论文、收集数据时，补充做了两组新化合物的实验，意外的发现这两个化合物具有很强的在体效果，对血脂的降低作用达到了更高的疗效。在此基础上，研究组进一步探索，最终在仓鼠的胆管中发现了与之类似且活性更高的代谢产物，进而对这种复合物进行化学修饰，并研制成了早期的“依折麦布”。然而以动物实验为基础的在体实验由于缺乏相关的机制基础，不仅缺乏分子层面的支持，而且在人体和仓鼠之间的异质性问题也没有得到解决。但先灵葆雅公司决定放手一搏，跳过机制研究直接进行临床试验。幸运的是依折麦布在临床试验中表现出了优异的疗效，并存在更加宽广的安全窗口。但造化弄人，依折麦布的上市又将是一个极具挑战的问题。辉瑞公司在1996年上市的阿托伐他汀（立普妥）的强大降脂作用为整个医药行业的降脂药物研发拉高了门槛。这对只能降低15%左右胆固醇的依折麦布来说是一条难以逾越的鸿沟。于是依折麦布的研发上市再次被先灵葆雅公司搁置。 图3: 阿托伐他汀（立普妥）由于立普妥现象级的降脂效果，导致新型他汀类降脂药物的优化在其面前就好似蚍蜉撼树，此时“同是天涯沦落人”的默沙东找到先灵葆雅，由默沙东牵头开展了他汀类药物与依折麦布的联合治疗。令人惊喜的是，两者的联合应用显示出了很好的协同效应导致了更强的降脂效果，更为重要的是他汀与依折麦布的联合应用减少了他汀的使用量，一定程度上避免了他汀大量使用导致的肌肉疼痛等症状。而此时，依折麦布的作用机制以及靶点仍属未知。在临床试验期间，两家公司合力攻坚终于弄清楚依折麦布的作用靶点，同时首次发现胃肠道的胆固醇吸收受体NPC1L1。 图4  02  胆固醇的吸收途径体内胆固醇主要来源于两个方面。一方面是内源性的，主要在肝脏中乙酰辅酶A在羟甲基戊二酸单酰辅酶A（HMG-COA）和角鲨烯单加氧酶（SM）限速酶的作用下，经酶促反应从头合成。他汀类药品作用机制为抑制HMG-COA还原酶以减少内源性胆固醇的生成，实现降低胆固醇的作用。另一方面是外源性的，即食物中胆固醇的吸收和由肝脏分泌的胆汁。而饮食来源的胆固醇约占全部胆固醇的50%。进入肠道的食物胆固醇是酯化胆固醇，必须经消化液中胆固醇酯酶的水解，使之变为游离胆固醇后才能被吸收。游离胆固醇通过形成混合乳糜微粒，与小肠刷状缘充分接触并被其表面的NPC1L1介导进入上皮细胞内，在酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶（ACAT）的作用下又重新酯化，生成胆固醇酯，最后与载脂蛋白一起组成乳糜微粒经由淋巴管、胸导管进入循环血液。一般认为空肠起始段和部分回肠是胆固醇吸收的主要部位。上述即为胆固醇吸收的主要途径。 图5：胆固醇吸收机制示意图此外，小肠近腔侧除了具有NPC1L1之外还有ABCG5/G8等诸多转运蛋白共同辅助完成胆固醇吸收过程。例如ABCG5/G8将ACAT难以酯化的胆固醇（部分植物来源胆固醇）排出体外。因此，有关NPC1L1和ACAT的探索长久以来都是降脂研究的热点。  03  机制与受体的验证先灵葆雅随后在Science上发表文章阐明NPC1L1受体的存在以及依折麦布对其的抑制作用。 图6在人体中，胆固醇的吸收发生在小肠近端空肠，在那里膳食胆固醇和胆汁胆固醇都可以从肠腔吸收。胆固醇吸收的二级动力学、其甾醇特异性以及依折麦布的抑制作用都表明，这一过程是由一种特定的转运蛋白介导的。然而，这种假定的胆固醇转运体的身份仍然难以捉摸。为了确定参与胆固醇摄取的基因，研究者准备了两个cDNA文库进行测序，一个来自大鼠空肠粘膜，另一个来自激光捕获显微解剖分离的空肠肠细胞。将从这些文库中获得的16500个表达序列标签(est)与所有公开的大鼠est相结合，并将大鼠序列与小鼠和人类数据进行交叉比对进行注释。该序列数据库分析了含有胆固醇转运体中预期特征的所有转录本，即预测跨膜结构域、细胞外信号肽、n链糖基化位点以及已知胆固醇相互作用基序(如胆固醇传感结构域)的序列。从这个分析中只有一个可信的候选基因:NPC1L1的大鼠同源基因。而NPC1L1缺失小鼠对胆固醇吸收抑制剂依折麦布完全不敏感，提示NPC1L1或相关蛋白可能是该药物的分子靶点。 图7：NPC1L1的发现之后，我国著名学者宋保亮院士团队也在Cell子刊上面发表了NPC1L1受体的工作机制。 图8简言之，即细胞膜上的NPC1L1受体通过携带胆固醇，向胞内形成与网格蛋白形成网格蛋白复合体，在微丝和肌动蛋白的牵拉下以胞吞的形式进入细胞内吸收胆固醇，而NPC1L1再次回到细胞膜准备下一次的吸收过程。依折麦布的作用则是抑制NPC1L1的内陷，组织网格蛋白复合体的形成，从而抑制胆固醇的吸收。 图9：NPC1L1吸收胆固醇及依折麦布作用机制  写在最后  作为现代新型降脂药物的代表，依折麦布的研发和上市过程可谓是一波三折，但正因如此使之成为医疗制药行业一段脍炙人口的佳话。依折麦布的成功背后离不开研发人员严谨求实的科学态度和及锋而试不离不弃的坚守，企业高层的放手一搏和超凡魄力也常让人不禁为之暗生敬意，拍手叫绝。谨以此则小故事向诸敢想、敢干、肯坚持、不放弃的科研学者和为人类福祉谋进步的制药企业致敬与学习。Reference1.Scott W. Altmann et al. ,Niemann-Pick C1 Like 1 Protein Is Critical for Intestinal Cholesterol Absorption. Science303,1201-1204(2004).DOI:10.1126/science.10931312.Cannon CP, et al. Ezetimibe Added to Statin Therapy after Acute Coronary Syndromes. N Engl J Med. 2015 Jun 18;372(25):2387-97. doi: 10.1056/NEJMoa14104893.Ge L, Wang J, Qi W, Miao HH, Cao J, Qu YX, Li BL, Song BL. The cholesterol absorption inhibitor ezetimibe acts by blocking the sterol-induced internalization of NPC1L1. Cell Metab. 2008 Jun;7(6):508-19. doi: 10.1016/j.cmet.2008.04.0014.Sudhop T, Lütjohann D, Kodal A, Igel M, Tribble DL, Shah S, Perevozskaya I, von Bergmann K. Inhibition of intestinal cholesterol absorption by ezetimibe in humans. Circulation. 2002 Oct 8;106(15):1943-8. doi:10.1161/01.cir.0000034044.95911.dc5.Scott W. Altmann et al. ,Niemann-Pick C1 Like 1 Protein Is Critical for Intestinal Cholesterol Absorption.Science303,1201-1204(2004).DOI:10.1126/science.1093131声明：发表/转载本文仅仅是出于传播信息的需要，并不意味着代表本公众号观点或证实其内容的真实性。据此内容作出的任何判断，后果自负。若有侵权，告知必删！长按关注本公众号   粉丝群/投稿/授权/广告等请联系公众号助手 觉得本文好看，请点这里↓

作者｜景言 近 30 年来，随着生活水平的提高，我国高脂血症患病率明显增加。自从他汀类药物问世以来，高胆固醇的问题解决大半。依折麦布作为首个胆固醇吸收抑制剂，它的发现可以说实力与运气并存，研发人员在无心插柳之时发现了这项足以改变后世降脂方案的用药。令人深思的是其设计研究的过程中没有任何已知的靶点可供参考，是一种完全基于受体外、脱离受体模型的研究方式，是一种“早于受体的抑制剂”。其所走过的路径提供了开拓思维的借鉴意义，本文通过分享其研发与验证的小故事，希望为新药研发领域带来一些启发。 图1：依折麦布的研发历程概览  01  依折麦布的研发历程一直以来，对于药物研发的基本思路是首先发现某一作用靶点，进而研究其增强或抑制剂，再通过不断优化其有机结构完成某一新药的研发与推广。而依折麦布作为首个胆固醇吸收抑制剂，其上市时间远早于其靶点受体的发现，这一不走寻常路的药物研发成为了医疗制药领域的轶事。20世纪80年代末，医药巨头默沙东公司研发的洛伐他汀横空出世，其强大的治疗效果使其名利双收，从此制药领域引发了降脂药物的研发热潮。 图2: 洛伐他汀在这次热潮中，先灵葆雅公司将注意力放在了ACAT上——其是催化胆固醇重新酯化进而进入人体的关键酶。他们以ACAT抑制剂为起点，设计优化分子结构并进行有机结构的改进和筛选，再通过生物测试验证其降脂效果。然而结果却不尽如人意，实际治疗效果远远达不到预期。但在研究过程中得到的一个产率不到5%的副产物有着意想不到的降脂活性。然而这一产物虽然在体外有着优异的ACAT抑制作用，但是在体试验中，对试验动物的高脂血症治疗效果收效甚微。频繁出现的体内和体外疗效差异使得先灵葆雅公司高层在再三讨论后，决定放弃体外试验，直接在试验动物体内开展在体试验进行药物筛选。但随着研究的进展，高额的科研支出并没有换来满意的结果，最终公司决定终止这一研究，以收集数据、发表文章作为项目的收尾。峰回路转，在实验组撰写论文、收集数据时，补充做了两组新化合物的实验，意外的发现这两个化合物具有很强的在体效果，对血脂的降低作用达到了更高的疗效。在此基础上，研究组进一步探索，最终在仓鼠的胆管中发现了与之类似且活性更高的代谢产物，进而对这种复合物进行化学修饰，并研制成了早期的“依折麦布”。然而以动物实验为基础的在体实验由于缺乏相关的机制基础，不仅缺乏分子层面的支持，而且在人体和仓鼠之间的异质性问题也没有得到解决。但先灵葆雅公司决定放手一搏，跳过机制研究直接进行临床试验。幸运的是依折麦布在临床试验中表现出了优异的疗效，并存在更加宽广的安全窗口。但造化弄人，依折麦布的上市又将是一个极具挑战的问题。辉瑞公司在1996年上市的阿托伐他汀（立普妥）的强大降脂作用为整个医药行业的降脂药物研发拉高了门槛。这对只能降低15%左右胆固醇的依折麦布来说是一条难以逾越的鸿沟。于是依折麦布的研发上市再次被先灵葆雅公司搁置。 图3: 阿托伐他汀（立普妥）由于立普妥现象级的降脂效果，导致新型他汀类降脂药物的优化在其面前就好似蚍蜉撼树，此时“同是天涯沦落人”的默沙东找到先灵葆雅，由默沙东牵头开展了他汀类药物与依折麦布的联合治疗。令人惊喜的是，两者的联合应用显示出了很好的协同效应导致了更强的降脂效果，更为重要的是他汀与依折麦布的联合应用减少了他汀的使用量，一定程度上避免了他汀大量使用导致的肌肉疼痛等症状。而此时，依折麦布的作用机制以及靶点仍属未知。在临床试验期间，两家公司合力攻坚终于弄清楚依折麦布的作用靶点，同时首次发现胃肠道的胆固醇吸收受体NPC1L1。 图4  02  胆固醇的吸收途径体内胆固醇主要来源于两个方面。一方面是内源性的，主要在肝脏中乙酰辅酶A在羟甲基戊二酸单酰辅酶A（HMG-COA）和角鲨烯单加氧酶（SM）限速酶的作用下，经酶促反应从头合成。他汀类药品作用机制为抑制HMG-COA还原酶以减少内源性胆固醇的生成，实现降低胆固醇的作用。另一方面是外源性的，即食物中胆固醇的吸收和由肝脏分泌的胆汁。而饮食来源的胆固醇约占全部胆固醇的50%。进入肠道的食物胆固醇是酯化胆固醇，必须经消化液中胆固醇酯酶的水解，使之变为游离胆固醇后才能被吸收。游离胆固醇通过形成混合乳糜微粒，与小肠刷状缘充分接触并被其表面的NPC1L1介导进入上皮细胞内，在酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶（ACAT）的作用下又重新酯化，生成胆固醇酯，最后与载脂蛋白一起组成乳糜微粒经由淋巴管、胸导管进入循环血液。一般认为空肠起始段和部分回肠是胆固醇吸收的主要部位。上述即为胆固醇吸收的主要途径。 图5：胆固醇吸收机制示意图此外，小肠近腔侧除了具有NPC1L1之外还有ABCG5/G8等诸多转运蛋白共同辅助完成胆固醇吸收过程。例如ABCG5/G8将ACAT难以酯化的胆固醇（部分植物来源胆固醇）排出体外。因此，有关NPC1L1和ACAT的探索长久以来都是降脂研究的热点。  03  机制与受体的验证先灵葆雅随后在Science上发表文章阐明NPC1L1受体的存在以及依折麦布对其的抑制作用。 图6在人体中，胆固醇的吸收发生在小肠近端空肠，在那里膳食胆固醇和胆汁胆固醇都可以从肠腔吸收。胆固醇吸收的二级动力学、其甾醇特异性以及依折麦布的抑制作用都表明，这一过程是由一种特定的转运蛋白介导的。然而，这种假定的胆固醇转运体的身份仍然难以捉摸。为了确定参与胆固醇摄取的基因，研究者准备了两个cDNA文库进行测序，一个来自大鼠空肠粘膜，另一个来自激光捕获显微解剖分离的空肠肠细胞。将从这些文库中获得的16500个表达序列标签(est)与所有公开的大鼠est相结合，并将大鼠序列与小鼠和人类数据进行交叉比对进行注释。该序列数据库分析了含有胆固醇转运体中预期特征的所有转录本，即预测跨膜结构域、细胞外信号肽、n链糖基化位点以及已知胆固醇相互作用基序(如胆固醇传感结构域)的序列。从这个分析中只有一个可信的候选基因:NPC1L1的大鼠同源基因。而NPC1L1缺失小鼠对胆固醇吸收抑制剂依折麦布完全不敏感，提示NPC1L1或相关蛋白可能是该药物的分子靶点。 图7：NPC1L1的发现之后，我国著名学者宋保亮院士团队也在Cell子刊上面发表了NPC1L1受体的工作机制。 图8简言之，即细胞膜上的NPC1L1受体通过携带胆固醇，向胞内形成与网格蛋白形成网格蛋白复合体，在微丝和肌动蛋白的牵拉下以胞吞的形式进入细胞内吸收胆固醇，而NPC1L1再次回到细胞膜准备下一次的吸收过程。依折麦布的作用则是抑制NPC1L1的内陷，组织网格蛋白复合体的形成，从而抑制胆固醇的吸收。 图9：NPC1L1吸收胆固醇及依折麦布作用机制  写在最后  作为现代新型降脂药物的代表，依折麦布的研发和上市过程可谓是一波三折，但正因如此使之成为医疗制药行业一段脍炙人口的佳话。依折麦布的成功背后离不开研发人员严谨求实的科学态度和及锋而试不离不弃的坚守，企业高层的放手一搏和超凡魄力也常让人不禁为之暗生敬意，拍手叫绝。谨以此则小故事向诸敢想、敢干、肯坚持、不放弃的科研学者和为人类福祉谋进步的制药企业致敬与学习。Reference1.Scott W. Altmann et al. ,Niemann-Pick C1 Like 1 Protein Is Critical for Intestinal Cholesterol Absorption. Science303,1201-1204(2004).DOI:10.1126/science.10931312.Cannon CP, et al. Ezetimibe Added to Statin Therapy after Acute Coronary Syndromes. N Engl J Med. 2015 Jun 18;372(25):2387-97. doi: 10.1056/NEJMoa14104893.Ge L, Wang J, Qi W, Miao HH, Cao J, Qu YX, Li BL, Song BL. The cholesterol absorption inhibitor ezetimibe acts by blocking the sterol-induced internalization of NPC1L1. Cell Metab. 2008 Jun;7(6):508-19. doi: 10.1016/j.cmet.2008.04.0014.Sudhop T, Lütjohann D, Kodal A, Igel M, Tribble DL, Shah S, Perevozskaya I, von Bergmann K. Inhibition of intestinal cholesterol absorption by ezetimibe in humans. Circulation. 2002 Oct 8;106(15):1943-8. doi:10.1161/01.cir.0000034044.95911.dc5.Scott W. Altmann et al. ,Niemann-Pick C1 Like 1 Protein Is Critical for Intestinal Cholesterol Absorption.Science303,1201-1204(2004).DOI:10.1126/science.1093131  BiG 十周年预告  本次BiG十周年庆典，将首次分为国内和国际篇章，以原创科学和临床需求为出发点，讨论创新技术平台和创新疗法（PROTACT/分子胶、双抗/ADC、siRNA/ASO、CGT、AI制药）的重大进展和发展前景，十年一药曙光现，大浪淘沙始见金！▼报名参会 会议门票：审核制(免费)；含主论坛+分论坛，不含餐；优先biotech/Pharma、临床、院校科学家共建Biomedical创新生态圈！如何加入BiG会员？