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*仅供医学专业人士阅读参考肿瘤相关成纤维细胞（CAFs），在奇点糕们这儿的名声可真不算好，虽说它们偶尔也会扮演正面人物，但在肝细胞癌（HCC）等免疫抑制性较强的瘤种中，CAFs当反派的可能性还是大得多，甚至一部分CAFs还能通过多种途径促癌，可以说是罪大恶极了。比如近日，西北工业大学医学研究院温伟红，空军军医大学西京医院秦卫军、杨发团队合作，在Journal for ImmunoTherapy of Cancer期刊发表的研究成果，就揭示了HCC微环境中存在一类特征为内皮唾液酸蛋白（Endosialin/CD248）表达阳性的CAFs，它们的促癌招数之一，就是将CD8+T细胞“拒之门外”，减少抗癌免疫主力军向肿瘤的浸润[1]。该研究显示，内皮唾液酸蛋白会抑制CAFs内STAT1的磷酸化和核转位，进而导致CAFs表达和分泌的趋化因子CXCL9/10减少，肿瘤部位浸润的CD8+T细胞也就少了，因此以内皮唾液酸蛋白为靶点进行干预（单抗类靶向药），能与PD-1/L1抑制剂在HCC治疗中协同增效。论文首页截图西北工业大学和空军军医大学的研究者们在2020年时就发现，HCC中表达内皮唾液酸蛋白的CAFs不是什么好东西，它们可以促进肿瘤微环境中的巨噬细胞向促癌的M2表型极化[2]，但内皮唾液酸蛋白的生理作用本来就有好多层[3]，谁知道它们还会不会祸害其它类型的细胞，特别是免疫细胞呢？研究还得继续做才行。在本次研究中，研究者们首先比对了敲除与未敲除内皮唾液酸蛋白的HCC细胞在小鼠身上形成的肿瘤，发现敲除内皮唾液酸蛋白可有效延缓肿瘤生长，而未敲除内皮唾液酸蛋白的肿瘤内有更多CD8+T细胞浸润和激活，这是早先研究中没发现的现象。导致这种现象的是不是CAFs呢？还是说罪犯另有其人？为明确这一点，研究者们又将HCC细胞与敲除/未敲除内皮唾液酸蛋白的CAFs共同植入小鼠体内，敲除内皮唾液酸蛋白也使CAFs原有的促癌作用消失了，而且同步会发生CD8+T细胞浸润的大增；共培养实验也证实，敲除CAFs的内皮唾液酸蛋白，能增强CD8+T细胞的迁移能力。表达内皮唾液酸蛋白的CAFs可通过减少CD8+T细胞浸润，对HCC起促癌作用接下来就是机制探索了，既然影响的是CD8+T细胞的迁移能力，研究者们自然会想到从趋化因子的角度入手，且基因集富集分析也指示了相关通路基因的明确表达富集；实验显示，敲除内皮唾液酸蛋白显著减少了CAFs分泌的趋化因子CXCL9/10，而它们对T细胞的迁移确实不可或缺。影响CXCL9/10分泌的上游机制则是IFNγ-STAT1调节轴，内皮唾液酸蛋白的存在会导致STAT1的磷酸化和核转位下调，无法响应肿瘤来袭时的IFNγ信号，让CAFs分泌CXCL9/10有效募集CD8+T细胞。最后，研究者们证实，人HCC患者肿瘤组织内的内皮唾液酸蛋白表达水平，也与CD8+T细胞浸润数量负相关，而靶向内皮唾液酸蛋白的的单抗类药物能与PD-1抑制剂实现协同增效，有望成为增敏HCC免疫治疗的新策略。一图总结论文核心内容------奇点糕近期推出了《2024ASCO年会深度盘点》课程，为大家系统盘点了2024ASCO年会上实体瘤领域的重磅进展，让您在100分钟内迅速深入把握前沿。长按识别下图中的二维码即可购买，购买后您可以在「奇点网小程序」收听，或下载奇点网「医学奇点」苹果客户端收听。如果遇到任何技术问题，大家可以戳我们下图中的客服小伙伴来解决~~参考文献：[1]Gan L, Lu T, Lu Y, et al. Endosialin-positive CAFs promote hepatocellular carcinoma progression by suppressing CD8+T cell infiltration[J]. Journal for ImmunoTherapy of Cancer, 2024, 12(9): e009111.[2]Yang F, Wei Y, Han D, et al. Interaction with CD68 and regulation of GAS6 expression by endosialin in fibroblasts drives recruitment and polarization of macrophages in hepatocellular carcinoma[J]. Cancer Research, 2020, 80(18): 3892-3905.[3]Lu S, Gan L, Lu T, et al. Endosialin in cancer: Expression patterns, mechanistic insights, and therapeutic approaches[J]. Theranostics, 2024, 14(1): 379-391.本文作者丨谭硕

*仅供医学专业人士阅读参考基于各种各样的特征对癌症进行精准细分，这类研究相信大家都不陌生了，不过奇点糕熟悉的精准分型，大多是基于癌细胞本身或部分免疫细胞的基因和分子特征，还很少有分型让一些原本的“配角”，例如免疫微环境中的癌症相关成纤维细胞（CAF）等组分走到前台。但配角也有属于自己的“高光时刻”：近日，瑞士苏黎世大学研究者们在Cancer Cell期刊发表了最新研究成果，提出以微环境中CAFs表型特征，将非小细胞肺癌（NSCLC）分为四种预后不同的亚型，其中肿瘤样CAF（tCAF）和间质CAF（mCAF）两类均提示预后不佳，而炎症型CAF（iCAF）和干扰素应答CAF（ifnCAF）两类亚型则预后较好[1]。论文核心内容总结虽说在奇点糕们介绍的研究里，CAFs大多是促癌的反派角色，比如前段时间提到的肿瘤相关肌成纤维细胞（myCAFs），但CAFs毕竟是个有很强异质性的群体，其中不乏可以增强抗肿瘤免疫、协助机体抑癌的亚群[2]。开发治疗策略时，要针对不利于抗癌的CAFs亚群；而从评估预后的角度出发，就得衡量患者CAFs的整体特征，看看正反派的力量几几开了。基于既往对乳腺癌等实体瘤中CAFs特征的研究和分型经验[2-3]，苏黎世大学团队在此次研究中，仍主要使用成像型质谱流式细胞分析（IMC）和RNA单细胞测序，评估了1070例NSCLC患者的CAFs表型特点，这些患者绝大多数为分期I-II期的早期NSCLC初治患者，且中位随访时间长达15年，足以提供疾病复发（随访期内复发率约45%）和预后相关资料。在抗体标记、IMC分析等一系列处理后，研究者们获取了足以定义NSCLC肿瘤内CAFs表型特征，以及微环境内内皮细胞、上皮细胞及T细胞等免疫细胞特点的数据，并评估CAFs亚型存在与否和患者临床结局的相关性，为后续的分型奠定基础。研究简要流程及方法论研究者们将NSCLC微环境中存在的CAFs划分出了11个亚型，绝大多数都与其它实体瘤存在的CAF亚型对应，其中在本文开头提到的四类CAFs具体特征如下：肿瘤样CAF（tCAF）特征为CD10+/CD73+、干扰素应答CAF（ifnCAF）为IDO+、炎症型CAF（iCAF）为CD34+/CD248+、间质CAF（mCAF）则为MMP11+/SMA+/胶原+。分析还显示，肺腺癌和鳞癌中的CAFs富集特征也明显不同，如mCAF在鳞癌中就更多见。NSCLC中的CAFs表型特征汇总基于不同亚型CAFs的分布状况，所有患者可以被分为4组，而这种基于CAFs的亚型划分，就与患者预后明确相关：肿瘤中iCAFs和ifnCAFs富集的患者，中位总生存期（OS）整体超过3年，而其它亚型CAFs富集大多与患者疾病复发、OS较短有关，可以说它们都不是好东西；且经肿瘤组织学类型、性别等因素调整后，CAFs表型特征仍是独立预后因子。基于CAFs表型特征的亚型划分与患者生存预后的相关性当然了，分析CAFs表型特征的价值还不止于此：研究者们进一步根据患者特征细化分析，发现在接受手术和辅助化疗的患者中，术后复发患者的CAFs表型特征也明显不同，腺癌中的tCAFs及胶原CAFs、鳞癌中的乏氧CAFs/tCAFs均与复发显著相关，与此类似，癌症淋巴结扩散和远处转移，也有各自显著相关的CAFs表型特征。CAFs的表型特征，归根结底反映的是不同的肿瘤微环境状态：结合对其它免疫细胞分布的评估，研究者们发现肿瘤中iCAFs和ifnCAFs富集，往往与肿瘤微环境呈炎症性、免疫细胞浸润较多且不乏氧有关，而tCAFs富集毫不意外地也和一大堆负面因素，例如调节性T细胞、髓系来源的免疫抑制细胞，以及各种免疫耗竭特征挂钩。CAFs表型特征与肿瘤微环境整体特征的关系最后，研究者们利用空间组学分析评估了不同CAFs在肿瘤中的分布特征，总结出了一些整体性规律，例如mCAFs几乎仅见于肿瘤间质部位，且它可能通过促进间质纤维化、抑制各类免疫细胞有效浸润来促癌；iCAFs和tCAFs多在肿瘤内部，而ifnCAFs大多位于肿瘤-间质接触界面（interface），且靠近同为IDO+的T细胞，提示了它们的主要影响对象。mCAFs促进纤维化以抑制其它免疫细胞向NSCLC中浸润总而言之，本次研究提出以CAFs表型特征对NSCLC进行分型，对当前的临床诊治有一定的指导价值，但更大的应用前景或许还在前方，对于正在研发中、以CAFs为干预靶标的各种疗法，这可就是把打击目标都标明了。对鱼龙混杂的CAFs来个去芜存菁，打掉促癌亚群、扶植抑癌战友，尽量避免无差别打击，这才是正道嘛。参考文献：[1]Cords L, Engler S, Haberecker M, et al. Cancer-associated fibroblast phenotypes are associated with patient outcome in non-small cell lung cancer[J]. Cancer Cell, 2024.[2]Grout J A, Sirven P, Leader A M, et al. Spatial positioning and matrix programs of cancer-associated fibroblasts promote T-cell exclusion in human lung tumors[J]. Cancer Discovery, 2022, 12(11): 2606-2625.[3]Cords L, Tietscher S, Anzeneder T, et al. Cancer-associated fibroblast classification in single-cell and spatial proteomics data[J]. Nature Communications, 2023, 14: 4294.本文作者丨谭硕

近日，来自中科院和温医大的研究团队联合开展的研究，基于中国女性老龄化的多组学分析，开发了一套特定的“衰老时钟”，发现：30岁和50岁是女性的两个“断崖式衰老”时间节点，可作为监测衰老的重要时期，并推测其中的主要影响因素是激素。https://doi.org/10.1016/j.medj.2023.06.010.本研究共招募了113名健康的中国女性志愿者，年龄在20-66岁之间。研究者收集并分析了多维生物标志物，包括表型组学、转录组学（在整体和单细胞水平）、蛋白质组学和代谢组学，并鉴定出一系列随着年龄增长而发生明显变化的指标，在此基础上开发出综合“衰老时钟”。研究流程图1、与衰老相关的表型组学改变：三大明显改变的模式：脂质代谢、循环激素和组织功能系统医学调查涵盖了7类测量值，包括行动能力、人体测量、血脂、激素、血液含量、血细胞以及组织功能。结果显示，全部测量值中有32项与年龄呈正相关，有54项与年龄呈负相关。对衰老相关的临床参数进行深入分析后，研究者发现了三种模式会随着年龄增长出现显著改变，分别为：脂质代谢、循环激素和组织功能。具体来说，在脂质代谢变量中，随着年龄的增长，血胆固醇、低密度脂蛋白（LDL）和载脂蛋白A水平显著增加。相应的，与脂肪分布相关的人体测量特征，如体脂率、内脏脂肪水平和腰臀比，也与年龄呈正相关。与年龄相关的表型测量值变化在循环激素水平中，有4种性激素与年龄高度相关，其中促卵泡激素（FSH）和黄体生成素（LH）是与年龄正相关程度最高的指标，而抗缪勒管激素（AMH）则是下调幅度最大的。更为重要的是，与肝、肺、骨骼和肌肉组织功能相关的指标也与衰老之间存在密切关联。举例来说，随着年龄的增长，慢阻肺的关键指标FEV1和骨密度逐渐下降；而与肝损伤相关的标志物——血清碱性磷酸酶却会伴随着衰老而逐渐升高，这意味着多组织功能的衰退。不同组织功能指标与年龄之间的关联2、与衰老相关的转录组学改变：T细胞扰动是免疫衰老的一大主要特征微观层面，研究者从整体和单细胞水平层面分析了PBMC转录组，发现356个与衰老正相关的和1,372个与衰老负相关的基因。其中，与年龄最大负相关的基因是LRRN3，该基因在初始T细胞中高度表达。随着年龄的增长，LRRN3的表达会显著减少，彰显出T细胞的衰老。另一个与年龄高度负相关的基因为CACHD1，它也在初始T细胞中富集。与之类似，研究者还发现了SATB1、CD248和TCF7等基因，这些参与“维持初始T细胞储蓄库”的基因均显著下调。除了T细胞的衰老之外，生物大分子合成相关通路上衰老基因的富集，也表明了这些衰老的免疫细胞的合成代谢能力下降。比如，随着年龄的增长，编码介导CD8+ T细胞产生腺苷的50核苷酸酶的NT5E基因显著减少。相反，表达高水平炎症细胞因子、易凋亡的衰老T细胞的标志物CD70基因则出现了上调；与炎症升高相关通路，如“白细胞活化调节”和“细胞溶解”相关基因也出现了类似升高。与年龄相关基因的变化3、与衰老相关的蛋白质组学改变：血浆分泌蛋白质组表现出脂质代谢失调、炎症和组织老化研究者依据实际年龄确定了血浆蛋白质的衰老模式，并找出了会随着年龄增长而增长的119种蛋白质，以及随着年龄增长而减少的148种蛋白。从脂质代谢角度切入，糖蛋白NMB和C反应蛋白（CRP）等循环衰老生物标志物，均会随着衰老的发生而显著增加。此外，随着年龄的增加，与低密度脂蛋白和胆固醇浓度升高有关的血浆脂蛋白，如APOF、APOC4、APOA4、APOB和APOC3，也会随之升高。而炎症相关的分析显示，与慢性炎症相关的蛋白同样会随着年龄的增长而不断升高，比如：先天性免疫系统的基本成分——补体系统中的C1R、C2、C4BPA和C5，和炎症免疫过程中的相关蛋白CHIT1、LILRA2、LILRB1、CCL16和CCL18。其中，ELISA测试显示，壳三糖苷酶（CHIT1）和白细胞免疫球蛋白样受体亚家族A成员2（LILRA2），是老年人体内累积最多的两种蛋白质，且与慢性炎症密切相关。与年龄相关的蛋白质组变化情况值得注意的是，研究者推断，1/3的衰老累积蛋白源自肝脏，与衰老正相关的肝源性蛋白，包括脂蛋白、补体蛋白、炎症蛋白，以及常见的肝损伤指标，如PCSK9和ANGPTL3。另有1/5的年龄减少蛋白由肌肉分泌而来。举例来说，与ATP代谢和自噬过程相关的因子属于肌肉来源蛋白，它们会随着年龄的增长而减少，该程度的调节失调会进一步诱发老年人中常见的少肌症。至于其他组织（如免疫系统和神经系统）和泛组织来源的蛋白质，在与年龄进行相关性分析后，将有助于缩小组织特异性和系统性的衰老生物标志物的范围。年龄相关的蛋白质变化4、与衰老相关的代谢组学改变：在衰老的过程中，激素和脂质代谢会出现异常鉴于表型、转录和蛋白质组水平均出现了代谢相关的变化，研究者受到启发，进一步追踪了不同年龄受试者之间的代谢差异。结果显示，共有99个和46个代谢物与年龄分别呈现出正相关和负相关。值得注意的是，几乎50%的年龄相关代谢物是脂类或类脂分子，包括甘油磷脂类、脂肪酰基、类固醇和类固醇衍生物。举例来说，脂蛋白的重要组成部分——甘油酸酯，会随着年龄的增长而显著增加。这一现象，也与此前提到的脂蛋白中蛋白质成分的积累，以及LDL和胆固醇浓度的升高相一致。此外，通路富集分析显示，组氨酸代谢上调，导致1-甲基组氨酸（1-MH）和3-MH的积累。这两个参数是肌肉退化和虚弱的生物标志物，它们随着年龄增长而增长也意味着老年人肌肉质量的下降。年龄相关的代谢物变化与之相反，随着年龄的增长，天然类固醇激素出现了明显的减少，比如脱氢表雄酮（DHEA）和硫酸化形式的DHEA硫酸盐（DHEA-S）。这两种代谢物被认为是衰老相关的重要标志物，补充DHEA和DHEA-S能够有效抑制血管内皮细胞的功能障碍。于是，研究者开始思考：要是想减缓衰老表型，补充这些与年龄负相关的代谢物是否有效呢？结果并不出乎意料。在补充了三种最常见“随着年龄增加而减少”的代谢物（戊酸、肉豆蔻酸和胡椒碱）之后，衰老相关的b-半乳糖甘酶水平降低，迁移能力得到提高以及形成了毛细血管样结构。说明在补充了血浆代谢物之后，人主动脉内皮细胞的衰老得到了延缓。研究者表示，这一发现相当令人兴奋！未来，或许能够通过探究衰老相关的血浆代谢物，来开发延缓衰老的策略。年龄相关的代谢物变化情况5、适用于中国女性的综合“衰老时钟”出炉：30岁和50岁是“断崖式衰老”的2个时间点基于上述四个角度的发现，研究者建立了一套匹配中国女性的“衰老时钟”，这是一个涵盖面部、表型、转录、蛋白和代谢时钟的多维度复合时钟。图形显示，30岁和50岁左右出现了两个波峰，这两个峰值也接近生育和绝经的时间节点。当然，这两个波峰仅共享了一小部分的相同变化，可见不同年龄段的衰老是不尽相同的。在30岁时，转录组和代谢组水平上观察到了特定的变化。在这一阶段，三种甘油磷脂和镰孢菌素A的含量显著增加，而属于类固醇和类固醇衍生物的三种代谢物则出现了减少。与此一致的是，研究者还观察到参与激素反应的基因减少，比如AR、NTRK3和PPARG。与30岁相比，50岁的“断崖式衰老”更为明显。在表型组学上，载脂蛋白A的水平显著升高。此外，组织健康指标出现了快速变化，比如骨密度和肺功能在50岁左右显著减弱，同样肌肉组织蛋白也急剧减少。以上改变，与激素水平的变化息息相关。换言之，长期接受激素代替疗法的参与者，多个衰老参数也得到了一定的缓解。两个时间节点的“断崖式衰老”综上，研究者基于四角度、多参数建立了中国女性特有的“衰老时钟”，并发现30岁和50岁是两个关键的“断崖式衰老”时间节点，在这两个岁数可能发生剧烈的生理变化。所以，当你发现某瞬间自己“突然老了”，说不定正是身体给你发出信号！文章来源“生物谷”责编|文竞择校对|文竞择End 往期精选 围观历史性突破！不需卵子和精子就可以合成人类胚胎 热文 富豪用儿子血浆“回春”科学吗？Science：血液牛磺酸缺乏驱动衰老 热文 世界首例！35岁的她，通过机器人操刀移植的子宫，成功诞下宝宝 热文‍为了避免心脏骤停，53岁的他成为“第一个”植入开创性除颤器的心脏病患者 热文 首次披露！175家生物制药公司的薪资数据：薪资中位数达20万美元 点击“阅读原文”，了解更多~