Mapatumumab

中国科学院上海药物研究所丁侃团队在权威期刊发表突破性研究，首次从藏药独一味（Lamiophlomis rotata）中分离出一种果胶样多糖LRP01B（分子量15.9 kDa），该多糖通过双重靶向作用显著抑制胰腺导管腺癌（PDAC）进展。结构解析显示LRP01B主链以1,4-α-GalpA和1,2-α-Rhap为主，侧链含阿拉伯糖和木糖。机制研究表明，LRP01B可同时结合TRAIL及其受体TRAIL-R1，通过诱导线粒体功能障碍和氧化应激促使胰腺癌细胞凋亡。在患者来源移植瘤模型中，LRP01B表现出显著抑瘤效果，其独特的双靶点作用机制为开发天然来源的抗胰腺癌药物提供了新策略，彰显了传统草药多糖在肿瘤治疗领域的巨大潜力。 研究背景 胰腺癌作为一种高度转移的恶性消化系统肿瘤，其中80%以上为胰腺导管腺癌（PDAC）。胰腺癌是预后最差的癌症之一，目前是男女癌症死亡的第六大原因，占全球癌症死亡人数的近5%。目前，手术切除是临床上唯一可能治愈胰腺导管腺癌（PDAC）的方法，但大多数患者由于诊断晚期而没有机会成为候选者。此外，由于肿瘤组织周围存在致密的纤维化组织，PDAC常对化疗药物表现出耐药性，一线和二线姑息治疗疗效有限。因此，迫切需要阐明PDAC的潜在发病机制和分子机制，以开发更有效的疗法。 活性氧（ROS）和线粒体功能障碍在胰腺癌的进展和治疗耐药性中起着关键作用。ROS积累过多会诱导氧化应激，导致DNA损伤和蛋白质氧化，导致基因组不稳定和肿瘤进展。线粒体功能障碍以线粒体DNA突变受损为特征，进一步加剧了ROS的产生，这是胰腺癌的标志。多糖是由糖苷键连接的长链单糖单元组成的大分子。多糖具有多种多样、有效的生物活性，如免疫调节激活、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤、神经保护和缺血再灌注损伤保护等，在功能性食品和生物医药产品中得到了广泛的应用，近几十年来，已经鉴定出100多种多糖在体外和体内直接抑制肿瘤生长，而其他多糖则通过免疫调节机制表现出肿瘤抑制特性。与其他常见化合物相比，多糖对癌症具有低毒性的高效性，使其成为进一步研究抗肿瘤药物和开发新型抗肿瘤辅助药物的有吸引力的候选者。因此，研究多糖的抗肿瘤作用及其在治疗癌症中的潜在用途势在必行。 研究内容 在这项研究中，我们重点研究了独一味（Lamiophlomis rotata）多糖对PDAC的抗肿瘤活性。至此，我们首先从Lamiophlomis rotata中分离并纯化了一种名为LRP01B的均质多糖。然后通过单糖组成、分子量分布、甲基化分析和核磁共振（NMR）波谱等多种分析技术表征其化学结构。重要的是，我们的研究结果表明，LRP01B 在体外和体内对 PDAC 细胞的生长都表现出显著的抑制作用。进一步探讨了多糖的靶分子及其作用机制。 研究结果 Fig. 1. Flow chart of LRP01B polysaccharide preparation. (A) The extraction and purification routine of LRP01B; (B) HPGPC chromatography analysis of LRP01B. Fig. 2. The one-dimensional NMR spectra of LRP01B and its main chain. 1H NMR spectra results of LRP01B (A) and LRP01B-IN2 (B). 13C NMR spectra results of LRP01B (C) and LRP01B-IN2 (D). (A: T-α-Araf, B: 1,5-α-Araf, C: T-β-Xylp, D: T-β-Galp, E: T-β-GalpA, F: 1,2-α-Rhap, G: 1,2,4-α-Rhap, H: 1,3,4-α-Rhap, I: 1,4-β-Glcp; J: 1,6-β-Galp; K: 1,4-α-GalpA; L: 1,3,4-α-GalpA). Fig. 3. Two-dimensional NMR spectra of LRP01B and its main chain. (A, B) HSQC spectra of LRP01B and its main chain LRP01B-IN2. (C, D) 1Hsingle bond1H COSY spectra of LRP01B and LRP01B-IN2. (E, F) HMBC spectra of LRP01B and LRP01B-IN2. (A: T-α-Araf, B: 1,5-α-Araf, C: T-β-Xylp, D: T-β-Galp, E: T-β-GalpA, F: 1,2-α-Rhap, G: 1,2,4-α-Rhap, H: 1,3,4-α-Rhap, I: 1,4-β-Glcp; J: 1,6-β-Galp; K: 1,4-α-GalpA; L: 1,3,4-α-GalpA). Fig. 4. The putative structure of LRP01B. Fig. 5. LRP01B exhibits anti-PDAC effects in vitro and in vivo. (A) MTT assay of PDAC cell lines AsPC-1, BxPC-3, PANC-1 and SW1990, human pancreatic duct epithelial cell line HPDE6-C7 and human fetal hepatocyte cell line LO2 (n = 3). These cells were treated with LRP01B at 0, 3, 6, 10, 15, 30, 60 and 100 μM for 24 h, 48 h and 72 h, respectively. (B) Cell viability of PCs was detected by a ReadyProbes® Cell Viability Imaging Kit after the treatment with different concentrations of LRP01B for 48 h. The green fluorescence indicated dead cells, the blue fluorescence represented living cells. Scale bar = 20 μm. (C) Tumor photographs, tumor weights and tumor volumes of PDX mice. (n = 7). Statistical significance was determined by two-tailed Student's t-test. **** P < 0.0001. Fig. 6. LRP01B induces PANC-1 and SW1990 cell apoptosis. (A) Hoechst 33342 staining of PANC-1 and SW1990 cells treated with different concentrations of LRP01B. The abnormal morphology of cell nuclei is indicated with white arrows. Scale bar = 50 μm. (B) PANC-1 and SW1990 cells were treated with different concentrations of LRP01B for 48 h, and cell apoptosis was analyzed by flow cytometry via dual staining with Annexin V-FITC and PI. (C) TUNEL staining of PANC-1 and SW1990 cells (red indicates apoptotic cells and blue indicates nuclei). Biological replicates, n = 3. Scale bar = 50 μm. Statistical significance was determined by two-tailed Student's t-test. * P < 0.05, ** P < 0.01. Fig. 7. LRP01B causes mitochondrial dysfunction and increases oxidative stress in PDAC cells. (A) PDAC cells were treated with different concentrations of LRP01B for 48 h, and the mitochondria were stained with Mitotracker. Fluorescence images were photographed by a fluorescence microscope. (B, C) PANC-1 and SW1990 cells were treated with different concentrations of LRP01B for 48 h, and mitochondrial membrane potential was detected by a JC-1 fluorescent probe (red indicates JC-1 aggregate and green indicates JC-1 monomer). (D) The intensity of JC-1 fluorescence-positive cells was quantified. (E-I) PDAC cells were treated with 0, 10, 20 and 40 mM LRP01B for 48 h, and the ATP, H2O2, MDA, superoxide levels and total antioxidant capacity were measured by the indicated kits. Biological replicates, n = 3. Statistical significance was determined by two-tailed Student's t-test. * P < 0.05, ** P < 0.01, *** P < 0.0005, **** P < 0.0001. Scale bar = 50 μm. Fig. 8. LRP01B activates the mitochondria-mediated apoptosis signaling pathway by targeting TRAIL in PDAC cells. (A, B) Western blotting analysis of Bax, Bcl-2, and cytochrome c (Cyto C) in mitochondrial and cytosolic fractions was conducted in PANC-1 and SW1990 cells. (C) Caspase 9 and caspase 3/7 activity in PDAC cells treated with LRP01B for 48 h were detected using a colorimetric kit. (D) The binding affinity among LRP01B, TRAIL, TRAIL-R1 and TRAIL-R2 was evaluated by TSA. (E) Western blotting analysis of TRAIL, TRAIL-R1, TRAIL-R2, caspase 3, cleaved-caspase 3 and caspase 9 in the administration of LRP01B (10, 20 μM) and TRAIL protein (10 ng/mL). (F) PDAC cells were treated with different concentrations of LRP01B for 48 h, and an immunofluorescence experiment was performed to show the cellular localization of TRAIL and TRAIL-R1. Statistical significance was determined by two-tailed Student's t-test. * P < 0.05, ** P < 0.01, *** P < 0.0005, **** P < 0.0001. Scale bar = 25 μm. Fig. 9. LRP01B promotes mitochondria-mediated apoptosis in vivo. TUNEL and IHC analysis was conducted with PDX-derived tissues. In IHC, representative IHC images demonstrated the expression of Ki-67, cleaved caspase-3, p53, Bax and Bcl-2 in tumor sections. Arrows, IHC-positive PDAC cells. Scale bar = 100 μm. 结论 综上所述，本研究鉴定出一种从Lamiophlomis rotata中提取的新型均质果胶样多糖LRP01B。结构分析表明，LRP01B的主链主要由1,4-连接的α-半乳糖醛酸、1,2-连接的α-半乳糖苷和1,3-连接的α-半乳糖苷组成，侧链上存在阿拉伯糖和木糖。体外和体内生物活性测试表明，LRP01B 以剂量依赖的方式显著抑制了 PDAC 细胞和患者来源异种移植瘤的生长。在机制方面，LRP01B 通过招募 TRAIL 到 TRAIL-R1，从而激活 TRAIL/Caspase 家族介导的凋亡信号通路，诱导 PDAC 细胞的凋亡，并发挥抗胰腺癌的作用。上述数据表明，LRP01B具有开发为安全高效候选药物的潜力，可作为靶向TRAIL的潜在有效分子用于PDAC治疗。 原文链接： https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2025.147227 声明 本公众号发布的所有内容，包括但不限于文字、图片、音频、视频、图表、标志、标识、广告、商标、商号、域名、软件、程序等，版权归原作者或原出处所有。我们致力于保护原作者版权，若涉及版权问题，请及时联系我们进行处理。

关注并星标CPHI制药在线 胰腺癌，作为"癌中之王"，其恶性程度高、预后差，给患者和医疗界带来了巨大的挑战。手术切除是胰腺癌治疗的重要手段之一，但术后复发的风险却始终居高不下，严重影响着患者的生存率和生活质量。然而，随着医学研究的不断深入，KRAS 疫苗的出现为防止胰腺癌术后复发带来了新的希望。 胰腺癌作为一种恶性程度极高的肿瘤，给患者和家庭带来了沉重的负担。其术后复发风险高，大多数患者在手术后均面临着复发、转移的风险。据统计，胰腺癌手术后复发率较高，通常在 90% 以上，即使往好的方向讲，复发率也在百分之七十左右。 胰腺癌患者的生存率低，五年生存率不到百分之三十，这意味着大部分患者可能因复发转移而去世。其生存率低的原因主要有以下几点：一是病发时往往已达到晚期，早期症状不明显，许多患者发现病情时已错过最佳治疗时间；二是手术难度大，位置靠近其他器官，切除率低，且术后易感染，导致患者免疫力下降；三是放疗化疗效果欠佳，传统的治疗方法对胰腺癌作用不明显，患者耐受性也较差；四是易复发并发证，如胰腺外分泌功能不全或呼吸衰竭等，影响患者的生存率。 此外，胰腺癌还容易被误诊。一旦误诊，可能会延误病情，错过治疗机会，导致错误治疗，增加治疗成本，影响患者心理健康。例如，胰腺癌的早期症状不明显，容易被误诊为其他疾病，如果错过了最佳治疗时间，疾病可能会进一步恶化，严重影响治疗效果和预后。误诊还可能导致错误的治疗方式，进而加剧疾病进展或出现严重副作用。同时，胰腺癌的诊疗难度高，延误诊治会增加诊疗成本，给患者和家庭带来重大经济负担。癌症本身就是一种心理负担沉重的疾病，而误诊更可能会增加患者和家属的焦虑和抑郁情绪，甚至影响生活质量。 胰腺癌患者处于I期至III期时，可通过手术切除癌症，之后还需接受辅助化疗来对体内可能残留的微量癌症（即微转移性疾病）展开攻击。但即便癌症看似已完全消失，仍有50%至70%的患者会在五年内出现复发情况。安德森癌症中心胃肠道医学肿瘤学家Shubham Pant博士表示："这是一种极为顽固的癌症。" 一旦胰腺癌复发，能用于治疗的方法寥寥无几。此时，多数治疗手段只是姑息性的，并非治愈性的。人们期望专门针对患者癌细胞突变的胰腺癌疫苗能够防止癌症复发，并延长无复发生存期。 一 、kras突变 KRAS 基因是胰腺癌中最常见的突变基因之一，其突变在胰腺癌的发生、发展中起着关键作用。基于这一发现，科学家们研发出了针对 KRAS 突变的疫苗，旨在激活患者自身的免疫系统，对携带 KRAS 突变的肿瘤细胞进行特异性攻击，从而降低术后复发的风险。 Pant及其同事一直在对一种名为ELI-002的药物进行测试，该药物针对KRAS G12D和G12R突变。要知道，大约90%的胰腺癌病例会发生KRAS突变，而G12D和G12R在KRAS亚型中通常是会发生突变的。 所以，若疫苗能发挥效用，众多胰腺癌患者或将从中受益。Pant说："我们尝试利用这些疫苗，借助身体免疫系统进一步消灭微转移性疾病。"其思路在于训练免疫系统去检测并摧毁癌细胞，从而尽可能防止癌症复发。而且身体的免疫系统还能学会对任何带有这些突变的未来癌细胞发起攻击，在癌症生长之前就将其遏制住。 二、 KRAS疫苗临床研究数据 KRAS 疫苗的作用机制主要是通过激活免疫系统的 T 细胞，使其能够识别并攻击表达 KRAS 突变蛋白的肿瘤细胞。疫苗中的抗原成分能够被抗原呈递细胞摄取和处理，随后激活特异性的 T 细胞，这些活化的 T 细胞能够迁移到肿瘤部位，发挥抗肿瘤作用。此外，KRAS 疫苗还可能诱导机体产生免疫记忆，当肿瘤细胞再次出现时，能够迅速启动免疫反应，将其消灭在萌芽状态。 多项临床研究已经初步展示了 KRAS 疫苗在胰腺癌术后预防复发方面的潜力。在一项前瞻性临床试验中，接受手术切除的胰腺癌患者被随机分为两组，一组在术后接受标准的辅助治疗，另一组则在标准辅助治疗的基础上额外注射 KRAS 疫苗。经过长期的随访观察发现，接受 KRAS 疫苗注射的患者复发率明显低于仅接受标准治疗的患者。而且，疫苗治疗组的无病生存期和总生存期也显著延长，这一结果无疑为胰腺癌患者带来了福音。 1.参与试验的患者情况 一期试验涉及 25 名患有胰腺癌或结直肠癌的患者，这些患者具有一定的 KRAS 突变，且手术后癌症复发风险高。其中 84% 为白人，8% 为亚裔，还有两名患者种族未作报告，女性患者占 60%，中位年龄为 61 岁。所有患者都曾接受过手术或其他旨在治愈的治疗，7 名患者曾接受过放射治疗。 2.疫苗的有效性 84% 的患者产生了预期的免疫反应，血液中循环的肿瘤 DNA 的数量减少，这表明该疫苗能够有效降低肿瘤标志物水平。值得注意的是，24% 的患者肿瘤 DNA 完全缺失，部分患者实现无癌状态。在长期随访中，75% 的患者保持了记忆 T 细胞，这种细胞可长期存活且具有记忆能力，能够在再次遇到肿瘤细胞时快速启动免疫反应。同时，ELI-002 疫苗的 T 细胞应答率超过 75%，而既往类似的疫苗 T 细胞应答率小于 50%，高水平的 T 细胞应答率与减少癌症复发之间具有强关联性。 3.对复发的影响 具有较高 T 细胞反应的患者无复发生存期更长。对于高于中位 T 细胞应答水平的患者，中位无复发生存期尚未达到，而 T 细胞应答水平低于中位水平的患者为 4.01 个月，这在统计学上有显著差异。 4.安全性 相关不良事件均为 1 级和 2 级，无≥3 级的不良事件。常见不良事件为疲劳、注射部位肌肉疼痛等。这表明 ELI-002 疫苗在临床应用中具有较高的安全性。 三、 与其他治疗方法的对比 个性化 mRNA 疫苗制作时间长、成本高，而 KRAS 现成疫苗可更快、更便宜地提供给患者。单克隆抗体治疗、过继性细胞免疫治疗等介绍这些传统治疗方法的局限性，突出 KRAS 疫苗的优势。单克隆抗体治疗如厄洛替尼为抗表皮生长因子受体酪氨酸激酶的单克隆抗体，联合吉西他滨对晚期胰腺癌患者能提高生存率，但效果有限。MORAb-009 是靶向间皮素的嵌合型单克隆抗体，安全性良好但仍在研究阶段。Mapatumumab 为靶向肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体 1 蛋白的人单克隆抗体，联合凋亡抑制蛋白抑制剂可诱导大多数胰腺肿瘤细胞系的凋亡，但仍处于研究阶段。 过继性细胞免疫治疗中，Kondo 等和 Kawaoka 等的研究表明，以 MUC1 修饰的 DCs 疫苗和对 MUC1 敏感的 CTLs 回输到患者体内，对胰腺癌是有效的，但不良反应可耐受。这种治疗可用于胰腺癌患者术后的辅助治疗。 肿瘤疫苗治疗是通过给患者体内导入肿瘤抗原来激发患者的特异性抗肿瘤免疫反应。其中，多肽疫苗如靶向 KRAS 疫苗在胰腺癌患者中显示出一定的免疫反应和长期记忆性，且无严重不良反应发生。靶向端粒酶疫苗在胰腺癌患者中耐受性良好，但部分临床研究未显示出明显生存获益。靶向胃泌素疫苗使胰腺癌患者的中位生存时间延长近一倍，耐受性良好，有望成为胰腺癌治疗的新选择。 相比这些传统治疗方法，KRAS 疫苗 ELI-002 以患者的淋巴结为靶向，试图破坏可能产生新肿瘤的突变 DNA，并训练免疫系统的 T 细胞识别和消除这些 KRAS 突变，具有较高的 T 细胞应答率、良好的安全性和预防癌症复发的潜力。 四、KRAS 疫苗的前景展望 研究团队已计划进行更大规模的第二阶段临床试验，这无疑为胰腺癌和结直肠癌 KRAS 突变患者带来了新的希望。 目前，ELI-002 疫苗在一期临床试验中展现出了令人鼓舞的成果，84% 的患者产生了预期的免疫反应，血液中循环的肿瘤 DNA 的数量减少，部分患者甚至实现了无癌状态。同时，75% 的患者保持了记忆 T 细胞，这种细胞可长期存活且具有记忆能力，能够在再次遇到肿瘤细胞时快速启动免疫反应。此外，ELI-002 疫苗的 T 细胞应答率超过 75%，高水平的 T 细胞应答率与减少癌症复发之间具有强关联性。而且，该疫苗在临床应用中具有较高的安全性，相关不良事件均为 1 级和 2 级，无≥3 级的不良事件。 基于这些令人鼓舞的一期临床试验结果，研究团队对第二阶段临床试验充满信心。在第二阶段临床试验中，有望进一步扩大样本量，针对更多的 KRAS 突变类型进行研究。这将为胰腺癌和结直肠癌 KRAS 突变患者预防复发提供更有力的武器。 随着科研的深入和临床试验的推进，我们有理由相信，KRAS 疫苗有望在未来成为胰腺癌和结直肠癌治疗的重要手段，为癌症防治事业作出更大的贡献。 参考文献 [1] 相关研究团队发表在知名医学期刊（如《新英格兰医学杂志》《柳叶刀?肿瘤学》等）上关于 KRAS 疫苗在胰腺癌临床试验的原始研究论文，文中详细阐述了试验设计、患者入组标准、试验结果数据等内容。 [2] 一些综述性文章，综合分析了 KRAS 疫苗在肿瘤领域（包括胰腺癌）的研究进展、作用机制探讨以及未来发展方向等，这些综述可能引用了多篇基础研究和临床试验的文献，例如发表在《癌症生物学与医学》等杂志上的相关综述。 [3] 专业医学会议报道或会议论文集，其中有研究人员汇报的关于 KRAS 疫苗与胰腺癌的阶段性研究成果，如美国临床肿瘤学会（ASCO）年会、欧洲肿瘤内科学会（ESMO）大会等相关会议资料 END 【智药研习社近期直播预告】 来源：CPHI制药在线 声明：本文仅代表作者观点，并不代表制药在线立场。本网站内容仅出于传递更多信息之目的。如需转载，请务必注明文章来源和作者。 投稿邮箱：Kelly.Xiao@imsinoexpo.com ▼更多制药资讯，请关注CPHI制药在线▼ 点击阅读原文，进入智药研习社~