Ulixertinib

1 BRAF的生物学特性与治疗意义 BRAF的生物学特性 ● 基因与蛋白家族定位：BRAF属于RAF激酶家族，该家族包含ARAF、BRAF、CRAF(又称RAF1)三个成员，三者均具有CR1(RAS-GTP结合与自我调节)、CR2(富含丝氨酸的铰链区)、CR3(丝氨酸/苏氨酸磷酸化催化区)三个特征结构域，其中BRAF是家族中最易发生突变的成员，是MAPK/ERK通路的核心成员，正常状态下通过“RTK→RAS→RAF→MEK→ERK”级联调控细胞增殖与存活。但其激活突变是肿瘤驱动关键，且具有泛瘤种靶向潜力。 ● BRAF分子结构：BRAF位于7q34染色体，编码的蛋白含三个进化保守域，功能分工明确： ①CR1域(159-289位氨基酸)：含RAS结合域(RBD)和富含半胱氨酸域(CRD)，负责与激活态RAS-GTP结合，是信号启动的关键。 ②CR2域(359-374位氨基酸)：富含丝氨酸/苏氨酸，含调控磷酸化位点(如S365、T401)，参与BRAF二聚化及稳定性调控。 ③CR3域(442-734位氨基酸)：催化域，负责丝氨酸/苏氨酸磷酸化，是抑制剂结合的核心区域。 图1 BRAF蛋白结构的示意图 ● BRAF生物学功能 ①正常状态：BRAF以无活性单体形式存在于细胞质中，需与RAS结合后二聚化，才能磷酸化下游MEK1/2，进而激活ERK1/2，调控下游基因转录，传递细胞生长信号。但存在负反馈调节，在ERK激活后会抑制上游RTK、SOS等分子，避免通路过度激活，这一机制是后续治疗耐药的关键诱因。 ②突变后：Gain-of-function突变(如V600E)导致BRAF激活，无需RAS调控即可持续启动MAPK通路，驱动肿瘤细胞无限增殖、逃避凋亡。 图2 野生型及BRAF突变体的激活机制 ●BRAF的相关信号通路 ①MAPK通路存在两种激活方式：一是配体依赖途径，即生长因子、激素、细胞因子等与细胞表面受体结合后启动信号；二是配体非依赖途径，由辐射、组织损伤等环境应激触发。 ②异常激活：上游RTK(如EGFR、VEGFR)、RAS等基因的异常，会导致RAF通路失调激活，进而驱动肿瘤发生，其中表皮生长因子(EGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子(PDGF-β)等是关键的通路激活信号。 图3 针对BRAF改变和RAS/MAPK信号传导情境定制的组合药理策略 BRAF突变的分类及功能 ●Ⅰ类突变：以BRAF-V600E为典型代表(还包括V600K、V600D等)，可不依赖上游RAS信号和RAF二聚化，自主激活下游ERK通路；因活化的ERK会对RAS产生负反馈，此类突变肿瘤的RAS活性通常较低。 ●Ⅱ类突变：不依赖RAS信号，但需形成RAF二聚体才能激活MEK-ERK通路，涵盖多种非V600位点的突变类型。 ●Ⅲ类突变：需与野生型CRAF形成二聚体，且依赖上游RAS激活(如RAS突变、NF1缺失)或RTK信号(抵消ERK对RAS的负反馈)，此类突变肿瘤的活性RAS-GTP水平显著升高。 图4 常见癌症亚型中BRAF突变的频率 BRAF靶向治疗的作用机制与临床进展 ●经典药物与作用原理 ①单体抑制剂(维莫非尼、达拉非尼、恩考芬尼)：竞争性结合BRAF-V600突变单体的ATP口袋，阻断MAPK通路，仅对Ⅰ类突变有效，对Ⅱ/Ⅲ类及野生型BRAF无效。 ②BRAF+MEK联合疗法(核心标准方案)：MEK抑制剂(曲美替尼、考比替尼)阻断下游信号，既增强疗效(如黑色素瘤5年OS达34%)，又抵消单体抑制剂导致的“悖论性激活”(野生型RAF二聚化引发的正常组织毒性)，且耐受性更优。 ③泛瘤种批准背景：基于ROAR、NCI-MATCH等篮子试验，该联合疗法在131例BRAFV600E突变罕见癌种(如胶质瘤、胆道癌)中应答率达80%，解决了罕见癌种临床试验难招募的困境。 图5 BRAF抑制剂及联合疗法的FDA批准时间线 ●癌种特异性疗效差异 ①高应答癌种：毛细胞白血病、朗格汉斯细胞组织细胞增生症(应答率近100%)、黑色素瘤(单药ORR50%，联合MEK抑制剂ORR提升至60%-70%)。 ②中等应答癌种：NSCLC(BRAF-V600E突变，联合疗法ORR63%)、甲状腺癌(ORR30%-60%)，疗效受共突变(如EGFR、KRAS)影响。 ③低应答癌种：结直肠癌(BRAF-V600E突变单药ORR＜5%)，因EGFR反馈激活导致适应性耐药，联合EGFR抑制剂后ORR提升至20%-26%。 表1 单剂BRAF抑制剂及联合疗法在临床试验中的应用 2 BRAF突变实体瘤的靶向治疗策略 黑色素瘤(BRAF突变率50%-70%) ●核心特点：97%突变位于600号密码子，以V600E(90%)、V600K(8%-20%)为主，肿瘤依赖MAPK通路存活。多见于年轻患者，且与浅表扩散型亚型、高有丝分裂活性相关。单药BRAF抑制剂易引发皮肤毒性(悖论性MAPK激活)，联合MEK抑制剂可增效减毒。 ●一线治疗方案 ①恩考芬尼+比美替尼(FDA2018年批准)：中位PFS14.9个月(维莫非尼单药7.3个月)，5年OS35%(维莫非尼21%)，ORR63%。 ②达拉非尼+曲美替尼(FDA2014年批准)：中位OS25.6个月(维莫非尼18个月)；COMBI-AD辅助治疗试验：3年无复发生存率58%(安慰剂39%)，获批用于III期术后辅助治疗。 ③维莫非尼+考比替尼(FDA2015年批准)：中位PFS12.3个月(维莫非尼单药7.2个月)，OS22.3个月(单药17.4个月)。 ●特殊场景 ①脑转移：达拉非尼+曲美替尼(COMBI-MB-II期，ORR54%)、维莫非尼(单药ORR20%-30%)。 ②单药备选：维莫非尼(BRIM-3-III期，OS13.6个月vs化疗9.7个月)、达拉非尼(BREAK-3-III期，PFS6.9个月vs化疗2.7个月)。 ● 对免疫治疗疗效的影响：BRAF抑制剂可通过悖论性激活野生型细胞的MAPK通路增强T细胞活性，但临床数据显示先免疫治疗、后靶向治疗的序贯方案预后更优(DREAM-seq试验证实)，若先使用BRAF抑制剂，会降低后续免疫治疗的生存获益。 非小细胞肺癌(NSCLC，BRAF突变率5%-8%) ● 核心特点：V600E突变占50%以上，多见于不吸烟女性腺癌；非V600突变(G469A/V、K601E等)与吸烟史、脑转移相关，且对铂类化疗应答不佳，还可作为EGFR酪氨酸激酶抑制剂的耐药机制(占1%~2%)。双靶向抑制(BRAF+MEK)为V600E突变标准方案，非V600突变无统一标准，依赖多激酶抑制剂或下游通路抑制。 ●V600E突变一线治疗(达拉非尼+曲美替尼)：初治患者ORR63%，6个月PFS65%；经治患者ORR64%，6个月PFS72%，获批用于初治及经治患者。 ●非V600突变治疗 ①多激酶抑制剂：索拉非尼(个案报道对G469R/V突变有效)，同时抑制MAPK通路及血管生成。 ②ERK抑制剂：乌利司他丁(Ⅰ期试验，对V600E及非V600突变均有部分缓解)。 ③联合策略：MEK抑制剂+EGFR抑制剂(针对RAS依赖的III类突变)。 ●对免疫治疗疗效的影响：BRAF-V600E突变肿瘤的免疫微环境与野生型相近，但临床中通常按吸烟史分层治疗——吸烟患者优先免疫治疗，非吸烟患者优先BRAF靶向治疗。 甲状腺癌 ● 核心特点：乳头状癌(PTC)突变率44%，间变性癌(ATC)24%。V600E突变与更高的复发率、淋巴结转移、甲状腺外侵犯相关，会使乳头状癌的疾病特异性死亡率升高近3倍；同时该突变会抑制钠碘同向转运体和促甲状腺激素受体表达，导致放射性碘(RAI)治疗抵抗。 ●关键治疗方案 ①达拉非尼+曲美替尼：在复发性/转移性RAI抵抗PTC中，95%患者恢复RAI敏感性，6个月ORR38%。在ATC中，ORR为56%，中位OS14.5个月(FDA2018年批准)。 ②维莫非尼单药：经VEGFR-TKI治疗失败的PTC：Ⅱ期试验，初治队列ORR38%，经治队列27.3%。 转移性结直肠癌(mCRC，BRAF突变率10%) ●核心特点：90%为V600E，好发于老年女性的近端结肠，常表现为低分化、黏液样组织学，且多为微卫星稳定(MSS)型；此类患者对传统化疗应答差，中位总生存期(OS)仅13.4个月(野生型为37个月)，5年生存率(47.5%)也显著低于野生型(60.7%)。肿瘤侵袭性强，对化疗及免疫治疗(MSS亚型)应答差，需联合EGFR抑制剂阻断旁路激活。 ●一线/经治标准方案 ①恩考芬尼+西妥昔单抗(FDA2020年批准)：中位OS8.4个月(化疗5.4个月)，ORR20%，3级以上毒性发生率低于三联方案。 ②三联方案(恩考芬尼+比美替尼+西妥昔单抗)：中位OS9.0个月，但增加视网膜毒性、CPK升高风险，仅推荐体能状态良好患者。 ③正在探索：恩考芬尼+西妥昔单抗+化疗(mFOLFOX6)一线治疗(BREAKWATER-III期，NCT04607421)。 ●对免疫治疗疗效的影响：微卫星高度不稳定(MSI-H)的BRAF突变患者对PD-1抑制剂应答较好，如帕博利珠单抗的客观缓解率(ORR)为20%~55%，纳武利尤单抗联合伊匹木单抗的ORR可达70%；且帕博利珠单抗一线治疗可显著延长MSI-H患者的中位无进展生存期(PFS，16.5个月vs化疗8.2个月)。 图6 肿瘤谱系对达曲非尼联合治疗反应及反应持续时间的影响 泛瘤种罕见肿瘤(BRAF-V600E突变) ●靶向治疗策略 ①核心方案：达拉非尼+曲美替尼(FDA2022年泛瘤种批准) ②适用场景：用于泛瘤种BRAF突变的经治进展、无其他标准治疗的不可切除/转移性实体瘤(成人及≥6岁儿童)。 ●胆道肿瘤(BTCs) ①核心特点：BRAF-V600E突变率5%-7%，以肝内胆管癌(iCCA)为主，占iCCA的1.5%。突变患者多表现为晚期分期、淋巴结转移率高，化疗耐药且预后差(野生型中位OS37.3个月vs突变型13.5个月) ②关键疗效数据：客观缓解率(ORR)53%，中位缓解持续时间(DOR)8.9个月，中位无进展生存期(mPFS)9个月。 ● 中枢神经系统(CNS)肿瘤 ①核心特点：BRAF总突变率7%，高发于特定亚型：多形性黄色星形细胞瘤(60%)、乳头状颅咽管瘤(80%-95%)、星形母细胞瘤(38%)、神经节胶质瘤(20%-70%)、成人胶质母细胞瘤(1%-2%)。突变以Ⅰ类(BRAFV600E)为主(44%-66%)，Ⅱ/Ⅲ类占比14%-34%传统认为BRAF抑制剂难穿透血脑屏障，但黑色素瘤脑转移数据支持其颅内活性。 ②关键疗效数据：在低级别胶质瘤(LGG)中，ROAR试验ORR54%，VE-BASKET试验单药维莫非尼ORR25%、mPFS5.5个月。在高级别胶质瘤(HGG)中，ROAR试验ORR33%、mOS17.6个月；回顾性研究显示50%患者达PR，mPFS6个月。 ●妇科肿瘤(低级别浆液性卵巢癌为主) ①核心特点：低级别浆液性卵巢癌(LGSOC)占上皮性卵巢癌5%-10%，BRAF突变率2%-16%(AACRGENIE队列9.5%)。疾病进展缓慢但化疗应答差，MAPK通路异常为主要驱动因素 ②关键疗效数据：在达拉非尼+曲美替尼(NCIMATCH试验)中，5例PR、1例稳定疾病(SD)。在曲美替尼单药(GOG281/LOGS试验)中，mPFS13.0个月(vs标准治疗7.2个月)，ORR26%(vs6%)。在binimetinib(MILO/ENGOT-ov11试验)中，MAPK通路异常患者ORR41%(vs无异常13%) ●胃肠道间质瘤(GIST) ①核心特点：BRAF-V600E突变率0.6%-3.9%，为罕见驱动突变(传统GIST以KIT/PDGFRA突变为主)。突变可作为“泛瘤种靶向标志物”，对BRAF抑制剂敏感。 ②核心价值：为KIT/PDGFRA野生型、无标准靶向方案的GIST患者提供新选择，机制与其他罕见肿瘤一致(BRAF-V600E驱动MAPK通路激活)。 表2 持续的BRAF靶向治疗：正在进行的临床试验总结 3 BRAF靶向治疗的耐药机制 BRAF靶向治疗的耐药机制主要分为内在耐药(治疗前已存在)和获得性耐药(治疗后诱导产生)两大类，核心是肿瘤通过通路重塑、分子突变或表型适应绕开BRAF抑制，具体机制如下： 图7 RAF抑制剂耐药机制 内在耐药(Intrinsic-Resistance) 指肿瘤细胞在治疗前已存在的分子或细胞特征，导致其对BRAF抑制剂天然不敏感，关键机制包括： ● 旁路通路激活(最常见) ①受体酪氨酸激酶(RTK)介导：肿瘤细胞或基质分泌HGF、IGF、NRG1、EGF等配体，分别激活PI3K/AKT通路(IGF、NRG1)或MAPK通路(EGF、FGF)，绕开BRAF抑制。 ②典型例子：HGF结合MET受体，同时重启MAPK和PI3K信号，使BRAF突变黑色素瘤细胞逃避生长抑制；IGF1R激活可独立于NRAS/PTEN状态，抑制AKT和ERK信号。 ③肿瘤异质性：部分肿瘤亚克隆高表达特定RTK(如MET)，治疗后快速增殖成为优势克隆。 ● 细胞周期调控异常 ①核心机制：BRAF突变驱动MAPK通路激活，导致周期蛋白D1(CCND1)高表达，调控CDK4活性。 ②耐药条件：单独CDK4突变影响有限，但若同时发生CCND1扩增，会显著增强对BRAF抑制剂的耐药性，加速细胞周期进程。 ● MAPK通路自身异常 ①通路关键分子改变：MAP3K8(COT)拷贝数升高，直接激活MAPK通路；NF1基因缺失(RAS/MAPK通路负调控因子)，导致RAS持续激活，抵消BRAF抑制效果。 ②RAC1功能获得性突变：预存的高活性RAC1细胞在治疗压力下被筛选，维持MAPK通路活性。 ● 其他信号通路介导 ①Hippo通路效应因子YAP1：YAP1高表达与BRAF抑制剂耐药相关，通过转录调控促进细胞存活，且在黑色素瘤、NSCLC中与不良预后相关。 ②雄激素受体(AR)信号：AR通过上调CCND1维持MAPK通路活性，促进细胞增殖，男性患者AR信号更强，对BRAF/MEK抑制剂应答更差。 获得性耐药(Acquired-Resistance) 指治疗后肿瘤细胞通过基因突变、表观重塑等方式适应药物压力，逐步产生耐药，核心机制如下： ● MAPK通路再激活(最核心) ①二次突变：KRAS、NRAS、MEK1(MAP2K1)、MEK2(MAP2K2)发生激活突变，直接重启ERK信号；BRAF基因扩增或V600E剪接变体形成，促进RAF二聚化，逃避抑制剂结合。 ②典型例子：BRAFV600E剪接变体可形成同源二聚体，不依赖上游信号激活MAPK通路；MEK1突变(如P124L)降低对MEK抑制剂的敏感性。 ● PI3K/AKT/mTOR通路异常 ①通路激活：PIK3CA、AKT1/3、PIK3R1/2突变，或PTEN基因缺失(负调控因子)，导致PI3K/AKT通路hyperactivation，独立于MAPK通路驱动细胞存活。 ②临床影响：PTEN缺失患者接受BRAF抑制剂治疗后，中位PFS显著缩短，且肿瘤微环境更具免疫抑制性。 ● 表观遗传与表型重塑 ①表观调控：DNA甲基化、组蛋白修饰、miRNA介导的基因沉默，导致耐药相关基因(如凋亡抑制基因)异常表达，无需基因突变即可产生耐药。 ②表型转换：长期BRAF抑制诱导细胞向两种状态分化——增殖型耐药细胞(维持通路活性)和慢循环细胞(对铁死亡敏感)；抗逆转录病毒药物(如多拉韦林)可通过上调p16INK4a/p27Kip1逆转耐药。 ● 补偿信号网络激活 ①EGFR-YAP1-TEAD2轴：激活后上调STIM1，增强钙信号，维持vemurafenib耐药细胞存活。 ②ERK5信号：在dabrafenib耐药细胞中高激活，增强细胞存活并抵抗MEK抑制剂。 ③侵袭性增强：MARCKS蛋白(细胞骨架效应因子)高表达，依赖PKC和RhoA活性，促进耐药细胞迁移和转移，双抑制PKC/RhoA可降低其活性。 ● 共突变协同作用 ①常见共突变：TERT启动子突变(73.6%BRAF-V600突变黑色素瘤)、CDKN2A缺失(17%)、PTEN突变(15.1%)，这些突变与BRAF抑制剂耐药及不良预后相关。 ②突变排他性：BRAF-V600突变与NRAS突变(3.8%)互斥，而BRAF野生型肿瘤中NRAS突变率达44.4%，提示突变背景影响耐药模式。 单靶点BRAF抑制剂的临床局限 ● 疗效覆盖有限：仅对Ⅰ类V600突变(V600E/K/D)有效，对Ⅱ/Ⅲ类非V600突变几乎无应答，而NSCLC中80%以上BRAF突变为非V600型。 ● 耐药机制突出 ①内在耐药：PTEN/NF1缺失、CCND1扩增、RTK旁路激活(如EGFR反馈激活)。 ②获得性耐药：MAPK通路二次突变(RAS/MEK突变)、BRAF-dimer化、PI3K-AKT-mTOR通路代偿激活。 ● 脱靶毒性：抑制野生型BRAF导致皮肤增生、鳞状细胞癌等不良反应，源于悖论性激活野生型细胞MAPK通路。 新一代疗法：耐药突破策略 ● 二聚体抑制剂(针对Ⅱ类突变与二聚化耐药) ①代表药物：FORE8394(悖论breaker)、DAY101(TAK-580)、KIN-2787。 ②作用优势：可抑制Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ类BRAF突变，同时阻断RAF二聚化介导的耐药，部分药物(如DAY101)具有血脑屏障穿透性，适用于脑转移患者。 ③临床进展：FORE8394在Ⅰ/Ⅱ期试验中，对BRAF融合黑色素瘤、甲状腺癌等显示完全应答；KIN-2787在预临床中对三类突变均有效，且对RAS野生型细胞毒性低。 ● 泛RAF抑制剂(覆盖全亚型) ①代表药物：利非拉芬(BGB-283)、BGB-3245。 ②特点：同时抑制BRAF/CRAF/ARAF，部分兼具EGFR抑制活性(如利非拉芬)，可克服EGFR反馈激活(结直肠癌耐药核心)，预临床中对BRAFV600E结直肠癌有效。 ● 新型联合策略 ①垂直通路阻断：BRAF+MEK+ERK三重抑制(如Ulixertinib联合方案)，强效抑制通路反弹，延缓耐药。 ②旁路通路阻断：BRAF抑制剂+PI3K抑制剂(针对PTEN缺失)、BRAF抑制剂+CDK4/6抑制剂(针对CyclinD1扩增)，但需注意毒性叠加。 ③免疫联合：BRAF+MEK抑制剂可重塑肿瘤微环境(增加CD8+T细胞浸润)，与PD-1/PD-L1抑制剂联用(如阿替利珠单抗+维莫非尼+考比替尼)已获批黑色素瘤一线，部分克服免疫冷肿瘤困境。 ● 创新疗法(Preclinical/早期临床) ①PROTAC降解剂：如SJF-0628(靶向BRAFV600E)、P4B，通过降解BRAF蛋白而非仅抑制激酶活性，克服突变型耐药。 ②变构抑制剂：如avutometinib(MEK/RAF双重阻断)，锁定MEK-RAF复合物，阻断通路再激活。 ③肽类抑制剂：如BRAFtide，破坏BRAF二聚体界面，对Ⅱ类突变及融合型肿瘤有效。 图8 克服遗传和表观遗传介导对RAF抑制剂耐药性的治疗策略 4 双重靶点抑制剂的核心策略与进展 双重抑制通过“同时阻断BRAF+旁路靶点”或“BRAF+通路关键节点”，实现协同增效、减少耐药，主要分为7类核心组合： BRAF+EGFR双重抑制 ● 作用机制：EGFR反馈激活是结直肠癌BRAF抑制剂耐药的核心原因，双重抑制可同时阻断MAPK通路与EGFR旁路，避免信号逃逸。 ● 代表化合物： ①化合物2(苯并咪唑类)：BRAF-V600E IC₅₀=32nM，EGFR IC₅₀=29nM，显著抑制结直肠癌移植瘤生长。 ②化合物3(氰基吡啶杂化物)：BRAF-V600E IC₅₀=58nM，EGFR IC₅₀=89nM，优于厄洛替尼单靶点活性。 ● 临床数据：恩考芬尼+西妥昔单抗(±比美替尼)治疗BRAF-V600E结直肠癌，中位OS达8.4-9.0个月(化疗组5.4个月)。 BRAF+PI3K双重抑制 ● 作用机制：PI3K-AKT-mTOR与MAPK通路存在广泛交叉对话，BRAF抑制后PI3K通路会代偿激活，双重抑制可阻断协同致癌信号。 ● 代表化合物： ①化合物12(三嗪类)：BRAF-V600E IC₅₀=118nM，PI3Kα IC₅₀=15.1nM，对结直肠癌(HCT116)、黑色素瘤(A375)均有增殖抑制作用。 ● 优势：解决“BRAF抑制→AKT磷酸化激活BRAF-dimer化”的耐药循环。 BRAF+VEGFR双重抑制 ● 作用机制：VEGFR-2介导肿瘤血管生成，与BRAF协同促进肿瘤增殖转移，双重抑制同时阻断“增殖信号+血管供应”。 ● 代表化合物： ①索拉非尼/瑞戈非尼(多激酶抑制剂)：覆盖BRAF、VEGFR1-3、PDGFR，用于肝癌、肾癌等实体瘤。 ②化合物19(4-氨基-2-硫代嘧啶类)：VEGFR-2 IC₅₀=170nM，野生型BRAF IC₅₀=150nM，兼具抗血管生成与抑增殖活性。 BRAF+HDAC双重抑制 ● 作用机制：HDAC通过表观调控沉默抑癌基因，与BRAF突变协同促癌；双重抑制可重塑染色质乙酰化状态，增强BRAF抑制剂敏感性。 ● 代表化合物： ①化合物29(苯氧基苯甲酰胺类)：BRAF-V600E IC₅₀=73nM，HDAC1 IC₅₀=1.17μM，在HepG2/MDA-MB-468细胞中疗效优于索拉非尼。 ②化合物30(噻唑吡啶-异羟肟酸杂化物)：BRAF-V600E IC₅₀=1.71nM，HDAC6 IC₅₀=49.20nM，对BRAF野生型结直肠癌(HCT116)仍有效(IC₅₀=1.68μM)。 BRAF+mTOR双重抑制 ● 作用机制：mTOR调控细胞代谢与增殖，BRAF抑制后mTORC1会通过反馈激活维持细胞存活，双重抑制可阻断代谢-增殖协同信号。 ● 代表化合物： ①吡啶基咪唑类(31/32/33)：同时抑制BRAF-V600E驱动的ERK活性与mTORC1信号，诱导黑色素瘤细胞空泡化与凋亡。 BRAF+SHP2双重抑制 ● 作用机制：SHP2是RTK下游关键磷酸酶，调控RAS-MAPK通路激活，抑制SHP2可阻断RTK介导的BRAF抑制剂耐药。 ● 代表化合物： ①RLY-1971(SHP2变构抑制剂)：SHP2 IC₅₀＜1.0nM，与BRAF抑制剂联用在KRAS依赖型肿瘤中显示强效antitumor活性，已进入临床Ⅰ期。 BRAF+SRC双重抑制 ●作用机制：SRC激酶激活是BRAF-V600E结直肠癌/黑色素瘤耐药的关键，双重抑制可阻断MAPK-JNK通路交叉激活。 ● 临床前数据：达沙替尼(SRC IC₅₀=0.5nM)+维莫非尼/恩考芬尼，在结直肠癌模型中实现协同抑瘤，为耐药患者提供新方案。 5 结论与未来研究方向 临床应用的关键争议与解决方案 ●癌种特异性治疗差异 ①结直肠癌困境：BRAF-V600E突变患者对BRAF+MEK联合疗法应答差，需采用“BRAF+EGFR+MEK”三联方案(如恩考芬尼+西妥昔单抗+比美替尼)，中位OS达9.0个月(化疗组5.4个月)。 ②罕见癌种突破：通过篮子试验，达拉非尼+曲美替尼已获批用于胆道癌、胶质瘤等BRAF-V600E突变罕见癌种，解决无标准治疗的困境。 ● 给药策略优化 ①间歇给药：部分模型显示，MEK抑制剂间歇使用可减少耐药克隆选择，且增强免疫协同，但临床数据显示尚未显著延长PFS，需个体化评估。 ②序贯治疗：DREAMseq试验证实，BRAF突变黑色素瘤一线采用“双免疫(纳武利尤单抗+伊匹木单抗)→二线BRAF+MEK”，2年OS(71.8%)显著优于“一线BRAF+MEK→二线免疫”(51.5%)，避免长期靶向治疗诱导交叉耐药。 图9 RAF抑制剂临床试验的现状 未来研发方向与挑战 ● 核心挑战 ①耐药机制异质性：同一患者不同病灶、不同治疗阶段耐药机制可能不同(如同时存在RAF二聚化与PI3K激活)，需动态监测。 ②靶点覆盖不足：现有药物对Ⅱ/Ⅲ类突变及BRAF融合疗效有限，且缺乏泛突变覆盖药物。 ③毒性管理：泛RAF抑制剂或多靶点联合易引发皮肤、肝、眼毒性，需优化剂量与给药节奏。 ● 关键研发方向 ①精准分层：基于突变亚型(Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ类)、共突变(如NF1、PI3K)及癌种lineage制定个体化方案。 ②动态监测：通过ctDNA检测耐药突变(如NRAS、BRAF扩增)，指导疗法切换。 ③技术赋能：利用AI设计高选择性二聚体抑制剂、PROTAC降解剂，或开发“BRAF+免疫+抗血管”三联方案，突破多重耐药。 抗体发现服务 & 产品 1 羊驼免疫&骆驼免疫—自建现代化养殖农场 2 万亿级天然抗体库产品—轻松DIY科研抗体 关于仁域生物 成都仁域生物成立于2019年1月，是一家专注基因工程抗体技术和天然抗体库开发的公司，拥有优化的噬菌体展示抗体库技术和现代化的骆驼/羊驼养殖免疫基地。 公司主营业务： ◆ 全人源/纳米抗体定制；◆ 噬菌体展示抗体库定制 ◆ 多肽/多肽库定制；◆ 羊驼/骆驼免疫服务 ◆ 文库相关产品经销商。 protocol 获取 / 产品咨询 邮箱｜find@renyubio.com 电话｜19136178673 地址｜成都市经开区科技产业孵化园 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