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点击上方的 行舟Drug ▲ 添加关注 小核酸药物介绍 新冠疫情让同属核酸药物的mRNA获得了大众的广泛关注，也带动了小核酸药物的迅猛发展。尽管小核酸药物领域内目前仍有非常多的关键技术有待突破，但从全球市场发展来看，与传统的小分子化学药和抗体类药物相比，小核酸药物具有研发周期短、效果持久、研发成功率高、不易产生耐药性和治疗领域广等优点。 主要由于其高度依赖碱基互补配对原则，作用于基因转录和翻译过程，因此可从根源上调控致病基因的表达，并可达到单碱基水平上的特异性，同时可以解决某些疾病的蛋白靶点难以成药的问题。目前在治疗代谢性疾病、遗传疾病、癌症、预防感染性疾病等领域具有巨大潜力。 小核酸药物在2015年之前只有2款药物上市。1998 年，全球首款 ASO 药物 (反义寡核苷酸药物) Vitravene（Fomivirsem）批准上市；2013年Ionis公司的Mipomeren上市；2015年至今，已经有多项小核酸药物上市，适应症主要包括杜氏肌营养不良、肿瘤、囊性纤维化等各类疾病。 小核酸药物目前主要分为包括反义核酸（ASO）、小干扰RNA（siRNA）、微小RNA（miRNA）、小激活RNA（saRNA）、信使RNA（mRNA）适配体（aptamer）、核酶(ribozyme)、抗体核酸偶联药物（ARC）等，PNA(肽核酸)。 小核酸药物常见递送系统 递送方式与效率是小核酸药物能否进入细胞发挥作用的关键。小核酸药物进入细胞通常面临着两大挑战： 一是RNA暴露在血液中容易被血浆和组织中的RNase酶降解； 二是带负电的RNA难以跨膜进入胞内。 尽管不同的RNA疗法可能具有不同的作用机制，但它们都必须避免被非靶器官清除，必须进入正确的组织，而且不会引发有害的免疫反应。 按照不同递送技术分类，可以分为裸露RNA修饰递送技术、脂质体纳米递送技术、共轭连接递送系统（小分子配体、抗体及其他分子）和其他多种类型的新型递送系统（如多聚体纳米粒递送系统、细胞外囊泡递送系统等）。 其中，LNP和GaINac技术相对成熟；GaINac技术主要靶向肝脏，未来靶向其他器官的药物递送系统也有望突破。 LNP：脂质纳米粒（Lipid Nanoparticle）包裹核酸，使其靶向至目标细胞，并将特定基因的核酸递送至细胞内的方法 目前,LNP由结构脂质(模拟细胞膜并屏蔽正电荷)和聚(乙二醇)修饰脂质(防止LNP聚集和与生物环境发生不必要的相互作用)经典的LNP的脂质成分通常包括四种：可电离脂质(或阳离子脂质)、辅助脂质，胆固醇，聚乙二醇化脂质(PEG-脂质)。 GalNAc：基于N-乙酰氨基半乳糖修饰，并通过细胞内吞作用使药物进入细胞和发挥功能 小核酸的合成 小核酸药物的固相合成方法与固相合成多肽方法类似，都是采用固相载体，多肽固相合成经过脱保护、洗涤、偶联、乙酰化，经过多个循环得到目标肽，最后将肽从树脂上切割下来；小分子核酸固相合成脱保护、偶联、氧化、加帽循环。具体合成需要的树脂，偶联剂，原料等如下： 常用的固相载体为可控微孔玻璃珠（CPG）或者聚苯乙烯微珠（PS beads），固相载体通过linker与初始核苷酸核糖的3'-OH共价结合，而核糖的2'-OH用诸如叔丁基二甲基硅基(TBDMS)的保护试剂进行保护，或是核糖的2端有甲氧基、F代、甲氧乙基等修饰，5'-OH则用双甲氧基三苯甲基（DMT）保护。此外，由于腺嘌呤、鸟嘌呤和胞嘧啶存在伯氨基团，也需要用酰基试剂（例如苯甲酰基）进行保护。 固相合成每个循环主要包括四个步骤：脱保护、偶联、氧化和加帽。 第一步 脱保护（Detritylation） 使用溶解在二氯甲烷/甲苯中的二氯乙酸（DCA）或三氯乙酸（TCA）移除核糖5端的DMT基团，暴露5'-OH，以供下一步偶联。脱保护时间取决于流速和柱子尺寸，反应时间不够/脱保护剂酸性太弱会产生n-1杂质（与完整长度为n的寡核苷酸相比仅相差一个核苷酸）；反应时间太长/脱保护剂酸性太强则导致序列中脱嘌呤的产生。反应完成后，用乙腈洗涤去除残留的脱保护剂，此步骤中乙腈含水量一般小于20ppm，乙腈需要使用较高流速去冲洗合成柱，脱保护试剂冲洗不干净导致n+杂质的产生。 第二步 偶联（Coupling） 合成目标的原料，亚磷酰胺保护核苷酸单体，与活化剂四氮唑混合，得到核苷亚磷酸活化中间体，它的3端被活化，5端羟基仍然被DMT保护，与溶液中游离的5端羟基发生偶联反应。为了保证较高的总产率，每个循环中都需要有较高的偶联效率。n-1杂质是偶联中最常见的杂质，它们是偶联效率低于100%的结果。与FLP相比，更高分子量的杂质（例如n+1）也存在于偶联步骤中，n+杂质的形成归因于活化剂四氮唑的弱酸性能移除一部分亚磷酰胺溶液中的DMT基团。 第三步 氧化（Oxidation） 偶联反应后新加上的核苷酸通过亚磷酯键（三价磷）与固相载体上的寡核苷酸链相连。亚磷酯键不稳定，易被酸、碱水解，在下一个循环的脱保护酸性环境中不稳定，因此需要被氧化成稳定的五价的磷。磷酸二酯键中的2-氰乙基保护基团可以使其在后续合成中更稳定。常用碘溶液将亚磷酰转化为磷酸三酯，得到稳定的寡核苷酸。此外通过将一个硫原子转移到P（三价）上也可以将其转化为P（五价），从而形成硫代磷酸酯键。氧化剂与固相载体的接触时间通常为1-4分钟。 第四步 加帽（Capping） 由于不可能达到100%的偶联效率，仍存在脱保护后没有反应的5'-OH活性基团（一般少于2%），如果不加处理，那这些基团在下一个循环中仍能发生偶联，产生n-1杂质。通常使用两种试剂（通常使用醋酸酐和N-甲基咪唑的混合液作为加帽试剂）来酰化5'-OH。 经过以上四个步骤，一个核苷酸碱基被连接到固相载体的核苷酸上，再以酸脱去它的5'-羟基上的保护基团DMT，重复以上步骤，直到所有要求合成的碱基被接上去。 小核算药物的难点： 相比小分子药物，小核酸药物的杂质表征难度较大。小核酸药物在合成过程后会存在多种不同的的杂质，常见杂质包括缺失或增加序列的寡核苷酸、未完全去保护基团其色谱行为并不像普通小分子化药具有规律性，即使存在一些分析方法来对寡核苷酸分子量、分析序列、杂质等进行表征（下表），但是目前的手段其精确灵敏度还是存在很大改进空间。的产物、缺失嘌呤碱基的寡核苷酸以及其他降解产物。 小核酸药物与小分子和单抗相比，分子结构、作用靶标、半衰期、分布、代谢、DDI和免疫原性都存在较大不同，这给小核酸药物的非临床评价带来了极大的挑战。 小核酸药物往往要依靠化学修饰来降低体内的免疫原性，不同的修饰位点对药效、代谢、免疫反应、组织分布影响也不同，因此总的来说，小核酸药物不同产品的治疗原理、体内生物学行为、临床应用存在差别和不确定性。 文章信息源于公众号Biologics CMC，登载该文章目的为更广泛的传递行业信息，不代表赞同其观点或对其真实性负责。文章版权归原作者及原出处所有，文章内容仅供参考。本网拥有对此声明的最终解释权，若无意侵犯版权，请联系小编删除。 学如逆水行舟，不进则退； 心似平原走马，易放难收。 行舟Drug 每日更新 欢迎订阅+ 医药大数据|行业动态|政策解读

摘要：RNA分子的生产、修饰和细胞传递方面的最新进展促进了基于RNA的治疗学的扩展。对RNA生物学的不断深入理解也引发了RNA治疗学的相应增长。在这篇综述中，将讨论五类基于RNA的治疗学的一般概念，包括基于RNA干扰的疗法、反义寡核苷酸、小激活RNA疗法、环状RNA疗法和基于信使RNA的治疗学。此外，我们还提供了已经获得监管批准或目前正在临床试验中评估的基于RNA的治疗学的概述，以及这些技术面临的挑战。基于RNA的药物在临床试验中显示出积极的结果，并有能力解决以前“无法成药”的靶点，这为实现其全部临床潜力提供了巨大的希望，作为一种颠覆性的治疗技术。 1.  引言 从1961年发现信使RNA（mRNA）到2021年首个mRNA疫苗获批上市，已经过去了60年。在这60年的时间里，RNA领域发生了巨大的发展。1977年，Roberts和Sharp发现了RNA剪接，并因此获得了1993年的诺贝尔生理学或医学奖。1982年，Cech发现了四膜虫RNA的自剪接核酸酶，并与Altman共同获得了1989年的诺贝尔化学奖，因为他们的发现。这一发现为RNA领域翻开了新的一页，RNA分子被公认为具有复制和催化双重功能的生物分子。1993年，Ambros发现了第一个微小RNA（miRNA）; 1998年，Fire和Mello发现了RNA干扰（RNAi）现象，并获得了2006年的诺贝尔生理学或医学奖。RNAi成为了基因功能研究的重要工具，20年后，首个RNAi药物成功获批上市。1999年，Ramakrishnan、Steitz和Yonath完成了核糖体晶体结构，证明了核糖体作为一种核酸酶，并因此获得了2009年的诺贝尔化学奖。2011年，Charpentier和Doudna发现了CRISPR基因编辑技术，并因此获得了2020年的诺贝尔化学奖，揭示了sgRNA引导的DNA切割作为关键的基因治疗工具。RNA分子短短60年的历史产生了五个与RNA科学发现相关的诺贝尔奖，这突显了它在化学和生物领域的重要性，并强调了它作为一种不可替代的技术，将彻底改变医学。 基于RNA的药物主要分为两大类：（i）通过化学方法合成的寡核苷酸药物，如反义寡核苷酸（ASOs）、siRNAs（小干扰RNA）和RNA适体；（ii）通过体外转录合成的大分子RNA药物，如mRNA药物。全球近108种寡核苷酸药物进入临床管道，包括ASOs、siRNAs、适体、单导向RNA（sgRNAs）和miRNAs。此外，全球还有56种mRNA药物也进入临床管道。截至本文撰写之日，全球共有16种核酸药物获批上市，见表1。随着Biogen和Ionis开发的Nusinersen的推出，世界上首个治疗脊髓性肌肉萎缩症（SMA）的寡核苷酸药物出现，目前是销售额最高的寡核苷酸药物。 表1 全球上市的基于RNA的药物 由于大分子结构和负电荷，寡核苷酸药物容易被核糖核酸酶降解，难以穿透细胞膜，2008年至2013年因安全问题和递送系统问题而陷入低谷。药物递送在保护RNA结构、增加靶向能力、降低给药剂量和减少毒副作用方面起着至关重要的作用。随着关键递送系统的技术突破，寡核苷酸药物行业迎来了蓬勃发展。RNAi治疗是治疗遗传疾病和“无法成药”靶点的重要策略。siRNA和miRNA是有意义的基因沉默工具；四种siRNA药物候选已经获批，然而许多miRNA药物大多因安全问题而终止，只有五个候选药物继续进入临床开发，没有一个进入III期临床试验。siRNA和miRNA药物之间最大的区别是它们的作用机制。siRNAs是完全互补的靶向基因沉默序列，进入体内作用于特定的目标基因。相比之下，一个miRNA可以调节成百上千个基因，一个基因也可以被许多不同的miRNAs调节。因此，很难指定miRNA来调节一个特定的基因，并可能导致意想不到的副作用。只有解决miRNA药物的特异性问题，miRNA才能在临床环境中应用。 作为一种具有巨大潜力的技术平台，基于mRNA的治疗可用于传染病预防、肿瘤免疫治疗、蛋白质替代治疗，甚至基因编辑。mRNA的治疗途径可分为三类：预防性疫苗、治疗性疫苗和治疗药物。Pfizer和BioNTech开发的Comirnaty，以及Moderna开发的Spikevax，分别于2020年12月获得美国食品药品监督管理局（FDA）的紧急使用授权，以预防由SARS-CoV-2引起的COVID-19。2021年，Comirnaty和Spikevax的销售额分别达到368亿美元和177亿美元。这两种疫苗在全球大流行病的预防中大放异彩，标志着mRNA技术正式进入商业化时代。 RNA分子长期以来被认为在细胞过程中发挥着重要作用，从基因调控和表达到酶促反应。RNA治疗学是一个迅速扩大的药物和治疗类别，从实验室到临床实践的速度前所未有。最初认为RNA分子由于其不稳定性和相对较短的半衰期，将是一种较差的治疗剂。然而，随着稳定化学的进步和对其瞬时特性的应用，RNA分子作为治疗剂在临床上显示出价值。在这里，我们简要回顾了五类基于RNA的治疗：（i）基于RNAi的治疗，（ii）ASO治疗，（iii）小激活RNA（saRNA）治疗，（iv）环状RNA（circRNA）治疗，和（v）基于mRNA的治疗，以及其在后期临床开发中的药物候选。有数百种寡核苷酸和mRNA药物候选正在进行发现和临床前开发，目前有超过150种寡核苷酸药物和mRNA治疗正在进行临床试验。2018年和2020年是RNAi和mRNA领域的里程碑，因为基于RNA的治疗获批上市。随着更多的RNA治疗正在开发中，RNA基础治疗的未来是光明的。 2.  RNAi基治疗 近几十年来，小非编码RNA的发现及其在基因调控中的作用彻底改变了RNA生物学领域。RNAi最初由Andrew Fire和Craig Mello描述，他们因对RNAi的贡献而获得了诺贝尔生理学或医学奖。他们在秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)中发现了由外源RNA介导的基因沉默机制。像siRNA这样的小非编码RNA形成称为RNA诱导的沉默复合体(RISC)的复合物，它指导目标信使RNA(mRNA)的降解，如图1所示。RNAi的转录后基因沉默机制使其成为通过抑制基因的特定碱基序列来控制基因表达的强大工具，彻底改变了药物的发现和开发。 图1 siRNA生物生成的示意图，用于沉默目标mRNA。siRNA前体是一个双链RNA，可以由病毒、转座子或其他来源在内源或外源产生。前体被酶切割，以便正确装载Argonaute蛋白，并由一个双链RNA结合蛋白协助，这允许导向链与Argonaute结合，随后乘客链被排出。最后，沉默活动可以通过目标结合和切割发生。 鉴于RNAi的特异性和效力，许多基于RNAi的策略已经开发出来用于治疗目的，包括siRNA和miRNA治疗，它们在临床试验中作为医疗干预药物显示出有希望的结果。截至2021年底，已有四种RNAi药物获得欧洲委员会(EC)和FDA的批准和授权，为RNAi治疗的有效性和安全性提供了概念验证。siRNA和miRNA治疗的作用机制及其候选药物的例子将在讨论中。 3.  siRNA治疗 2018年，美国FDA和欧洲药品管理局(EMA)批准了patisiran(ONPATTRO; Alnylam Pharmaceuticals)，这是一种siRNA药物，用于治疗由遗传性转甲状腺素(hATTR)淀粉样变性引起的多发性神经病变的成年患者。这种siRNA药物是首个获批的基于RNAi的治疗药物，标志着RNAi治疗的新时代。目前，已有四种siRNA药物获批上市，还有许多正在进行临床试验，如表2所示。 表2 已批准上市或正在进行/已完成2期和3期临床试验的代表性siRNA药物列表 siRNA属于dsRNA类分子。顾名思义，siRNA的长度很短，大约为18到25个核苷酸(nt)，每个链的3'端有无两个悬出的磷酸化碱基。siRNA治疗的机制利用了其自然能力，即通过Argonaute 2(Ago2)的催化域切割完全互补的mRNA的特定序列。设计成模仿Dicer切割的合成siRNA，称为"Dicer-ready" siRNA，可以被传递到感兴趣的细胞并直接被Ago2-RISC复合物识别和装载，使其作为药物特别有吸引力。通过设计所需效力和特异性的siRNA序列针对目标mRNA，可以沉默疾病引起的mRNA。 最新获批用于治疗ASCVD和HeFH的siRNA药物inclisiran(LEQVIO; Novartis)，是一种首创的N-乙酰半乳糖胺(GalNac)修饰的siRNA共轭物，显示出显著降低血浆胆固醇水平。动脉粥样硬化被描述为一种慢性动脉炎症性疾病，导致慢性斑块积聚阻塞血管，导致狭窄和组织缺氧，是ASCVD的主要原因。动脉粥样硬化的发病机制复杂; 然而，已知它与增加的低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)水平有关。Inclisiran针对前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/半胱氨酸蛋白酶9型(PCSK9)的mRNA; PCSK9是一种与LDL受体(LDLR)结合的丝氨酸蛋白酶，调节胆固醇和细胞质载脂蛋白B(ApoB)，发现它增加了血浆LDL浓度。通过抑制PCSK9的产生，降低的PCSK9 mRNA表达减少了LDLR的降解，并增加了LDL的摄取，以降低LDL-c的浓度。 2期和3期临床试验显示了inclisiran在ASCVD和HeFH患者中的有希望的结果。ORION-9试验(NCT标识符：NCT033907121)招募了482名HeFH患者; ORION-10试验(NCT标识符：NCT03399370)在1561名ASCVD患者中进行; ORION-11试验(NCT标识符：NCT03400800)招募了1617名ASCVD或其风险等价物患者。在这些3期试验中，患者在第1天、第90天、第270天和第450天接受了1.5毫升皮下注射，注射了284毫克的inclisiran(相当于300毫克的inclisiran钠)。 所有3期研究报告说已经达到了他们的主要疗效终点。上述三项随机临床试验(RCT)的汇总分析显示，与安慰剂组相比，每年两次剂量的LDL-c总体降低了51%，并将主要不良心血管事件率降低了24%。此外，发现inclisiran降低了总胆固醇、ApoB和非高密度脂蛋白胆固醇水平。因此，inclisiran通过每年两次剂量抑制肝脏PCSK9的产生，有效降低LDL-c水平，并维持这种效果。 除了inclisiran的疗效外，其安全性同样可接受。三项RCT的安全性概况与之前的研究一致，并且没有与异常肝功能、肌酸激酶水平和血小板计数相关。与安慰剂相比，注射部位不良事件在使用inclisiran时报告得更频繁。尽管inclisiran的表现显示出LDL-c和PSCK9水平的显著降低，但另一项三项研究的荟萃分析观察到，在心肌梗死风险方面，使用inclisiran的患者与安慰剂相比没有统计学上的显著差异。总体而言，inclisiran通过每年两次剂量抑制肝脏PCSK9的产生，显著降低LDL-c水平，同时展现出理想的安全性概况。inclisiran及其前驱siRNA药物的成功展示了siRNA导向的RNAi治疗的有希望的未来。这也是第一个用于治疗常见慢性病的小核酸药物。 4.  miRNA治疗 miRNA治疗作为一种治疗不同疾病的新型治疗剂，因其在发育中的作用而开始出现。如前所述，miRNA和siRNA都是能够通过转录后基因沉默靶向mRNA的小双链RNA分子。然而，它们的生物合成和作用机制不同。miRNA的生物合成始于核内，其基因转录受到严格调控，如图2所示。miRNA双链——由处理过的pri-miRNA产生的结果——与RISC结合形成miRISC，由成熟的miRNA引导进行目标识别。与siRNA不同，miRNA通过部分互补碱基配对与目标mRNA结合，抑制mRNA翻译而不是目标mRNA的裂解。 图2 miRNA生物生成和作用机制的示意图。前体miRNA（pre-miRNA）由位于细胞核中的初级miRNA（pri-miRNA）产生，它由末端环和不匹配组成。pre-miRNA进入细胞质，由Dicer酶切割末端环，生成miRNA双链。随后的过程与siRNA的生物生成相似，其中RISC与其RNA双链形成，并装载到Argonaute上进行链的选择。最后，成熟的miRNA准备就绪，可以与目标mRNA结合并促进其降解。 miRNA治疗的应用有两种方法：miRNA抑制和miRNA替代。miRNA抑制利用合成的单链RNA类似物，与目标miRNA的活性链互补，并作为miRNA拮抗剂(也称为anti-miRs或antagomiRs)抑制内源性miRNA，这在结构上类似于反义寡核苷酸。Anti-miRs最初由Krützfeldt等人描述，其中这些化学修饰的、胆固醇结合的、与目标miRNA互补的寡核苷酸的静脉注射降低了小鼠中miR-16、miR-122、miR-192和miR-194的水平。后一种方法采用合成miRNA(也称为miRNA模拟物)来模拟目标miRNA的功能，促使mRNA抑制。 miRNA模拟物可以像化学修饰的siRNA一样使用，具有与目标miRNA相同的导向链，它们被装载到RISC上以抑制下游内源性miRNA。由于其与典型miRNA的相似性，miRNA模拟物可能作为癌症管理的治疗剂，因为肿瘤抑制miRNA在癌症发展中的作用。然而，miRNA模拟剂的传递仍然存在挑战。 miRNA治疗的出现尚未转化为医疗干预的批准药物候选。迄今为止，有几种miRNA分子正在进行临床试验。然而，没有进入3期试验。目前，Regulus和Genzyme(Sanofi)开发的lademirsen(RG-012)正在进行2期试验的患者招募(NCT标识符：NCT02855268)。Lademirsen是一种anti-miR药物候选物，通过皮下给药来沉默Alport综合征患者的microRNA-21(miR-21)的功能。Alport综合征是一种X连锁遗传疾病，其特征是由胶原蛋白IV基因突变引起的慢性肾病。Gomez等人的临床前研究发现，化学修饰的anti-miR-21寡核苷酸与磷酸硫酯键和修饰的糖单元增强了对miR-21的亲和力，并改善了Alport神经病变小鼠模型的生存率。关于lademirsen的临床数据在本次审查时尚未发布。 除了lademirsen的临床开发外，MiRagen Therapeutics(现为Viridian Therapeutics)开发的remlarsen(MRG-201)已完成2期试验，用于治疗瘢痕疙瘩患者(NCT标识符：NCT03601052)。Remlarsen是一种microRNA-29(miR-29)模拟物，旨在治疗病理性纤维化。miR-29家族被发现在纤维化调节途径中发挥作用，其中miR-29的表达水平在纤维化疾病中较低。Remlarsen模拟miR-29以抑制纤维化的形成，如皮肤纤维化。Gallant-Behm等人的研究总结了在健康志愿者中皮下给药的remlarsen的1期临床数据，该药物候选物减少了切口皮肤伤口中的胶原蛋白表达和纤维母细胞增生的发展。此外，该候选物在1期研究中所有研究剂量中被认为是安全且耐受性良好的。1期结果表明，remlarsen可能是预防皮肤纤维化的有效的治疗；然而，尚未发布的2期临床结果在有瘢痕疙瘩病史的患者中可能具有更重大的临床意义。尽管miRNA药物有大量的临床前研究，但只有少数miRNA药物候选物进入临床开发，50%的miRNA药物在临床开发阶段经历了终止或暂停。在开发miRNA药物候选物时面临挑战，例如确定不同疾病特定的miRNA靶标及其精确传递，同时避免进入细胞时的降解。 RNAi基治疗，如siRNA和miRNA治疗，是一个不断发展的领域，对许多疾病具有巨大的治疗前景。RNAi药物面临一些挑战，如内体逃逸和传递到非肝脏和非肾脏组织。尽管目前只有四种siRNA治疗获得了监管批准，但预计不久的将来会有更多的siRNA治疗出现。RNAi治疗提供的广泛的临床应用和安全性概况加强了其潜力。 5.  反义寡核苷酸治疗 1978年，Zamecnik和Stephenson利用与Rous肉瘤病毒目标序列互补的13个核苷酸长的反义寡核苷酸（ASO），在体外展示了病毒复制的抑制，这为ASO作为治疗手段的潜力打开了大门。自这一发现以来，寡核苷酸药物的开发取得了显著进展。ASO是短的单链且高度修饰的核酸类似物，旨在针对特定序列的RNA进行降解。如图3所示，ASO有几种作用机制。目标RNA通常是核内的前体mRNA（pre-mRNA），ASO与多聚腺苷酸识别位点结合，利用核糖核酸酶（RNase）H阻止多聚腺苷酸化；ASO也可以结合到细胞质中mRNA的翻译起始位点，以抑制翻译。 图3 ASO作用机制的示意图。A. 细胞质中的ASO与目标RNA结合，导致RNase H切割，引发目标mRNA降解。B. 细胞质中的ASO也可以结合到mRNA上，阻止RNA结合蛋白复合体的结合，抑制目标mRNA的翻译。C. ASO可以进入细胞核，通过结合并阻断剪接位点或外显子/内含子序列来调节剪接，这些可以通过核糖核蛋白(RNP)复合体催化，以跳过或包含目标外显子。 ASO的化学修饰对其作为治疗药物的转化至关重要，这有助于提高稳定性、特异性并减少不良反应。通常，ASO在两个修饰的2'糖的两个侧翼区域之间具有磷酸硫（PS）键，形成骨架。PS部分保护寡核苷酸不受外切酶的降解并提高稳定性。这种设计呈现了一个中心PS寡核苷酸间隙，赋予了“gapmer”的名称，当RNA-DNA双链形成时，可以激活RNase H1对目标RNA进行切割。此外，磷酸二胺吗啉寡核苷酸（PMOs）的修饰也在ASO中广泛使用，其中六元的吗啉环取代了五元的核糖呋喃糖，骨架通过磷酸二胺连接。这种修饰也稳定了PMO对抗核酸酶的能力，但最小化了对互补目标RNA亲和力的降低。此外，另一种ASO的设计是RNase H独立或仅占用途径，其设计为空间上的障碍，以空间上抑制或防止目标RNA的翻译或剪接。一些ASO药物已经获得了FDA和EMA的批准，如表3所示。迄今为止，已有九种基于ASO的药物获得批准，用于商业用途，所有这些药物都治疗罕见疾病。然而，目前正在开发的ASO显示出ASO平台的应用正在向治疗其他常见病迈进。 表3 已批准上市或正在进行/已完成3期临床试验的代表性反义寡核苷酸药物列表 最近获批的基于ASO的药物casimersen获得了美国FDA的加速批准，用于治疗杜氏肌营养不良症（DMD）。DMD是一种X连锁隐性退行性神经肌肉疾病，由DMD基因中的移码或无义突变引起，该基因编码肌营养不良蛋白，这些突变抑制了功能性肌营养不良蛋白的产生。Casimersen利用基于PMO的策略，引起DMD基因中第45个外显子的跳跃，以绕过移码突变，允许内部截断但部分功能性肌营养不良蛋白的产生。在其1/2期研究中，PMO药物候选物在DMD患者中耐受性良好，适合进行第45个外显子跳跃。3期ESSENCE试验（NCT标识符：NCT02500381）的中期结果显示，所有可评估的接受casimersen的患者都显示出第45个外显子跳跃的增加；然而，由于其样本量小和正在进行的3期ESSENCE试验，很难确定casimersen改善运动功能的能力。开发ASO基药物以治疗神经肌肉疾病的剩余挑战是ASO在肌肉组织中的分布和摄取不足。除了罕见疾病，心血管疾病也是ASO的目标领域。与siRNA治疗类似，ASO药物候选物也在开发中，用于治疗心血管疾病。Pelacarsen是一种首创的GalNAc结合PS ASO，它针对载脂蛋白(a)（apo(a)）的mRNA，使用RNase H1依赖性切割。脂蛋白(a)（Lp(a)）是一种含有ApoB和apo(a)的LDL样脂蛋白，通过二硫键连接，已发现与心血管疾病风险增加有关。在其2期研究（NCT标识符：NCT03070782）中，对286名已建立心血管疾病和增加Lp(a)水平的患者，Tsimikas等人观察到通过皮下给药pelacarsen后，Lp(a)水平剂量依赖性降低了35至80%，并具有良好的安全性概况。鉴于pelacarsen在2期研究中取得了有希望的结果，心血管疾病的ASO药物候选物正在进行3期临床试验（NCT标识符：NCT04023552）。反义技术的进步推动了ASO的发展，证明了基于ASO的药物是一种多功能且安全的治疗方法。大量治疗更常见疾病的ASO候选物正处于晚期临床开发阶段，这将在不久的将来产生有意义的结果。ASO需要克服一些现有的挑战，以扩大其临床应用，例如有效靶向传递到其他组织并减少在其他器官的非靶向积累。随着新型传递平台的发展，ASO治疗更常见疾病的前景是乐观的。 6.  小激活RNA治疗 小双链RNA家族还包括小激活RNA（saRNA），首次由Li等人和Janowski等人报道。研究人员发现，这些21个核苷酸长的双链RNA靶向特定基因启动子，诱导了基因转录激活，并被命名为RNA激活（RNAa）。这两项研究描述了由小双链RNA介导的基因表达诱导的自然现象。Li等人描述了设计的21个核苷酸长的双链RNA与E-钙粘蛋白、p21和VEGF（血管内皮生长因子）基因的启动子区域互补，以序列特异性方式诱导基因表达，并依赖于Ago2，类似于RNAi。Janowski等人展示了通过互补双链RNA靶向其启动子区域诱导孕激素受体表达。此外，RNAa已被证明在多种哺乳动物细胞中保守。RNAi和RNAa在分子机制上存在相似之处，如图4所示。在RNAa中，saRNA被装载到Ago2蛋白中，形成RNA诱导的转录激活（RITA）复合物。RITA复合物由saRNA/Ago2复合物、RNA解旋酶A和与RNA聚合酶相关的蛋白CTR9组成，与RNA Pol II相互作用，触发转录启动和有效的延伸。RNAa在其分子动力学、基因组靶向能力和激活核内目标基因转录延伸方面具有独特性。 图4 saRNA作用机制的示意图。引入的saRNA被装载到Ago2蛋白中，随后Ago2切割链选择形成saRNA/Ago2复合物，并被转运到细胞核。活性的RITA复合物目标并结合到基因组目标位点的启动子区域，并与RHA和CTR9结合，通过RNA聚合酶II（RNAP II）介导的转录活性。 RNAa的发现以及saRNA的作用为选择性基因激活研究提供了新的见解。此外，saRNA本身作为上调基因表达的新型治疗方式，在具有抑制性转录或翻译活性的疾病中提供了新的可能性。开发saRNA作为治疗药物有几个优点，包括低免疫原性和位点特异性基因转录激活；然而，其缺点，如对RNase降解敏感性和非靶向效应，也是关键的挑战。目前，几个saRNA药物候选物正在开发中，如表4所示。尽管大多数候选物仍处于临床前阶段，但MiNA Therapeutics开发的MTL-CEBPA已经进入2期，与蛋白激酶抑制剂索拉非尼联合治疗乙型或丙型肝炎感染的晚期肝细胞癌（HCC）患者（NCT标识符：NCT04710641）。 表4 临床开发中的代表性小激活RNA治疗候选药物列表 MTL-CEBPA是一种首创的saRNA寡核苷酸，具有2′-O-Me修饰，由SMARTICLES脂质体纳米粒子封装，并通过静脉注射给药，治疗HCC患者。转录因子C/EBP-a是一种亮氨酸拉链蛋白，通过与髓系基因的启动子区域结合，启动并激活髓系基因表达，已知与肝细胞调节相关。在小鼠肿瘤模型中，研究人员发现髓系来源的抑制细胞中C/EBP-a的下调；C/EBP-a的上调抑制了肝癌小鼠模型中的肿瘤生长。MTL-CEBPA旨在通过诱导CEBPA基因的转录来上调C/EBP-a。在与肝硬化、非酒精性脂肪性肝炎或肝转移相关的HCC患者中进行的MTL-CEBPA首次人体1期研究结果显示，saRNA药物候选物的安全性概况可接受，建议的初始剂量为130 mg m−2，并通过其药效学分析显示了目标参与。然而，其疗效概况有限：在24名可评估MTL-CEBPA单药疗效的患者中，只有1名患者观察到客观的肿瘤反应和部分反应。在7名患者中使用酪氨酸激酶抑制剂（索拉非尼、lenvatinib或regorafenib）治疗，观察到3名完全反应，2名病情稳定，1名部分反应。1期研究得出结论，MTL-CEBPA对HCC的预处理有助于为酪氨酸激酶抑制剂，如索拉非尼的治疗效应创造更易接受的肿瘤微环境。 除了2期的MTL-CEBPA加索拉非尼外，MiNA Therapeutics还在开发MTL-CEBPA与PD1检查点抑制剂pembrolizumab联合治疗晚期实体瘤患者，已进入1期（NCT标识符：NCT04105335）。 尽管MTL-CEBPA的1期临床结果有希望，但这种新型寡核苷酸治疗方式仍存在不确定性和挑战。在目标序列识别方面仍缺乏明确的机制理解；当涉及额外的DNA元素时，目标基因组的可访问性也不清楚。 7.  环状RNA治疗 除了前述的RNA治疗方法外，另一种新兴的RNA治疗因其显著的研究进展而受到关注。环状RNA（circRNA）是一类具有环状结构的非编码RNA，它们没有末端结构，例如5'帽和3'聚(A)尾部，主要存在于真核细胞中。1976年，Sanger等人首次在类病毒中发现circRNA，现在通过RNA测序发现circRNA在众多物种中高度保守。由于circRNA的环状特性，它们的稳定性可能优于线性RNA，因为它们能够抵抗各种RNA外切酶的降解。此外，Wesselhoeft等人证明了外源性circRNA的蛋白表达比未修饰和修饰的线性RNA持续时间更长。因此，鉴于它们的稳定性和在真核细胞中表达时无需修饰，circRNA为医学应用提供了有希望的应用前景。 与大多数线性RNA不同，circRNA的生物生成涉及外显子的反向剪接，通过共价键将下游的“尾部”（3'）连接到上游的“头部”（5'）。这种共价键的形成使circRNA具有自然能力，能够抵抗主要的RNA降解途径。鉴于circRNA的异常稳定性，其调控和周转在管理其丰度方面非常重要。最近，更多的研究阐明了circRNA的周转机制，其中特定的circRNA，如CDR1as，可以通过完全互补的miRNA结合，然后通过Ago2介导的切割来降解；响应病毒感染的RNase L也可以降解circRNA；高度结构化的circRNA可以通过结构介导的RNA降解来调节。也就是说，需要额外的研究来确定circRNA的分子途径。 与其他RNA治疗方法一样，circRNA作为调节基因表达或携带模块化效应的潜在治疗方法而出现。合成的circRNA已被成功地证明在真核细胞中具有强大且稳定的翻译。Wesselhoeft等人设计了自剪接的前体RNA，使用间隔序列优化了圆环化效率，并能够圆环化长达5 kb的各种长度的RNA。经过工程化的高效液相色谱（HPLC）纯化的circRNA发现，与对照组相比，其翻译效率高达97%。此外，这种纯化的circRNA可以逃避细胞RNA传感器，如Toll样受体和RIG-I，同时提供比未纯化的circRNA更稳定的蛋白表达。此外，circRNA也可以与LNP配制而成，以实现在小鼠和恒河猴中有效的体内传递和翻译。最近，Qu等人展示了一种针对SARS-CoV-2的circRNA疫苗，编码了三聚体RBD的刺突蛋白，为动物提供了足够的保护。此外，他们还展示了使用合成circRNA表达SARS-CoV-2中和抗体和hACE2诱饵来中和假病毒颗粒。 最后，工程化circRNA的另一个应用是RNA编辑，其中循环ADAR招募RNA被用来招募本地ADAR1或ADAR2酶，将特定的腺苷碱基改变为肌苷，以执行精确的内源性RNA编辑。除了工程化circRNA外，circRNA治疗的另一种方法是利用基于circRNA的适体，其中一种名为Tornado（twister优化的RNA，用于持久过表达）的表达系统执行RNA圆环化，并产生能够结合蛋白的RNA适体。尽管在circRNA的研究和应用方面取得了显著进展，但大多数候选物目前仍处于发现阶段或临床前开发阶段。截至本文撰写之日，尚无circRNA治疗候选物进入临床试验。circRNA提供了几种有希望的医学和研究应用，从治疗药物和蛋白替代疗法到预防性疫苗。还应注意，circRNA的另一种潜在治疗方法是使用其他方法（如CRISPR-Cas9或siRNA）调节本native circRNA，以及使用本native circRNA进行生物标记或海绵治疗各种疾病，包括癌症、心血管疾病和神经系统疾病。最后，开发合成circRNA作为治疗剂仍存在许多挑战，例如控制circRNA的表达水平以避免由于其异常稳定性而持续过度表达，大规模生产高纯度的人工circRNA，以及circRNA的靶向传递。因此，进一步的研究伴随着临床研究可能解决和克服这些挑战。尽管如此，从线性RNA治疗方法（如基于mRNA的治疗方法）中获得的理解可以转化为基于circRNA的治疗方法，并为开发circRNA作为治疗剂提供宝贵的见解。 8.  基于信使RNA的治疗 与前面描述的RNA不同，信使RNA（mRNA）是一种生命的关键分子，是一种与DNA反义链互补的单链RNA。顾名思义，mRNA是细胞核中编码蛋白质的DNA翻译和细胞质中蛋白质生产之间的信使。鉴于mRNA在作为分子生物学中心法则中介的蛋白质生产中的关键作用，为这一类新药开发了几种治疗策略，包括基于mRNA的疫苗和mRNA替代疗法。Wolff等人首次描述了在动物中成功引入体外转录（IVT）mRNA。在过去十年中，该领域取得了显著进展，使mRNA治疗成为治疗传染病和癌症等疾病的有希望的模式。 基于mRNA的治疗方法具有许多优势，例如相对较低的插入突变风险，以及在功能性方面无需进入细胞核。此外，mRNA的短暂性质为在需要时更临时地表达蛋白质提供了好处。通过将化学修饰的mRNA引入细胞的细胞质中，可以表达遗传疾病中减少或抑制的蛋白质，以类似于天然蛋白质的方式。此外，这种mRNA也可以用作预防性疫苗，在这种情况下，mRNA可以编码特定的外来抗原，以引发针对传染病的保护性免疫；或者作为治疗性疫苗，以启动免疫系统刺激细胞介导的反应，以靶向肿瘤。 8.1.  mRNA疫苗 疫苗接种预防疾病，是防止传染病传播最有效的公共卫生干预措施之一。疫苗的广泛使用导致了许多传染病的完全根除，并减少了全世界脊髓灰质炎、麻疹和其他疾病的发病率。在过去的几个世纪里，疫苗学随着传统疫苗方法的出现而发展，如减毒活疫苗和灭活疫苗，为一系列疾病提供了持久的保护。尽管传统疫苗方法取得了进展，但在疫苗开发中仍存在挑战，以满足当前的医疗需求，如新出现的传染病病原体具有更好的能力来逃避适应性免疫反应或需求细胞免疫反应。此外，面对新出现的病毒，有必要采用能够快速开发和大规模生产并具有理想特性以广泛分发的疫苗方法。 还需要针对非传染病的疫苗，传统疫苗方法可能不适用。因此，开发更具适应性和效力的疫苗平台至关重要。最近在mRNA疫苗方面的进展，如mRNA序列工程、大规模生产开发和有效的传递方法，进一步加速了该疫苗平台的开发。 9.  预防性疫苗 如前所述，mRNA疫苗可用于预防性或治疗性目的。mRNA设计、制造和传递方法的最新进展使mRNA疫苗成为传统方法的有吸引力的替代品。对于预防性目的，合成的mRNA编码抗原被传递到细胞质中，一旦表达，就能在不穿越核膜屏障的情况下引发免疫反应，如图5所示。有两种主要类型的体外转录（IVT）mRNA，它们都模仿内源mRNA结构：非复制型mRNA和自增强型mRNA。前者结构包括5'帽、5'非翻译区（UTR）、编码抗原的开放阅读框、3'UTR和聚A尾部；自增强型mRNA还包含病毒复制机制，如复制酶基因，以表达依赖RNA的RNA聚合酶，这允许细胞内RNA扩增和充足的抗原表达。 图5 mRNA疫苗作用机制的示意图。mRNA疫苗包含脂质纳米颗粒(LNP)包裹的mRNA序列（绿色），通过肌肉注射进行注射。封装的mRNA编码感兴趣的抗原（蓝色），被肌肉细胞摄取并在细胞的细胞质中表达。内源性产生的抗原被分泌并运送到局部淋巴结，这刺激了细胞介导的免疫和体液免疫，如分化的B细胞分泌抗体（紫色）。mRNA疫苗方法通过主动免疫提供保护，而不包含实际病毒或细菌的部分。 从DNA模板转录的mRNA携带遗传信息，指导细胞内蛋白、膜蛋白和细胞外蛋白的翻译和生产。同样，mRNA疫苗的核心原则是传递编码信息，如抗原蛋白，以在细胞内翻译。从而有效激活细胞免疫和体液免疫，如图6所示。 图6 mRNA疫苗在抗原呈递细胞(APCs)中诱发免疫的示意图。APCs通过内吞作用摄取mRNA疫苗后，mRNA在核糖体中被翻译成抗原肽，并刺激细胞免疫反应。蛋白酶体复合物将抗原肽处理成更小的肽表位，这些表位可以通过主要组织相容性复合体(MHC)I类或II类呈现在细胞表面，具体取决于APC的类型。MHC I类呈现的表位被CD8+细胞毒性T细胞识别，以激活并杀死感染细胞。MHC II类呈现的表位被CD4+辅助T细胞识别，这些细胞促进B细胞的激活和中和抗体的产生，并通过吞噬细胞启动体液免疫反应。 除了与内源mRNA的相似性外，mRNA疫苗还能表达复杂的抗原，没有包装限制。利用基因序列信息的无细胞制造过程允许快速、可扩展的生产，以迅速应对任何新出现的传染病。经过多年的mRNA治疗研究和投资，解决了其药理学方面的许多挑战，如稳定性和效力。 随着2020年1月严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）大流行的爆发及其完整基因组的发布，对SARS-CoV-2的有效疫苗的开发竞赛开始了。结果，针对SARS-CoV-2开发了多种疫苗，包括几种基于RNA的疫苗，如表5所示。Moderna开发的Spikevax和Pfizer及BioNTech开发的Comirnaty迅速获得了FDA的紧急使用授权（EUA）和EMA的条件性市场授权（CMA）。目前，只有Comirnaty获得了FDA的批准。这些mRNA疫苗展示了它们高效力和理想的安全性概况，以前所未有的速度被开发和施用。此外，这些疫苗的开发验证了基于mRNA的平台，并激发了对mRNA治疗应用的巨大吸引力。 表5 针对COVID-19的基于RNA的疫苗在临床试验中或已批准的列表 2019冠状病毒病（COVID-19）是由SARS-CoV-2病毒引起的一种高度传染性的病毒感染性疾病，已导致全球健康危机，对世界造成了灾难性影响。为了应对全球大流行，辉瑞和BioNTech开发的Comirnaty（BNT162b2或Tozinameran）是首个获得FDA批准的用于预防性指示的mRNA疫苗。Comirnaty疫苗是一种修饰的核苷酸mRNA，编码SARS-CoV-2的刺突（S）蛋白，并由脂质纳米颗粒包裹，允许S抗原的表达。SARS-CoV-2 S蛋白是一种I型融合糖蛋白，是病毒的主要表面蛋白和中和抗体的主要靶标。S蛋白对病毒及其感染至关重要，因为它能够显著的结构重排，将病毒和宿主细胞的细胞膜融合，将其病毒基因组传递到目标宿主细胞进行感染。Comirnaty编码了SARS-CoV-2的前融合稳定和膜锚定的全长S蛋白，这保留了中和敏感表位，有效激发对S抗原的免疫反应 Comirnaty在临床试验中展现了高疫苗效力和良好的安全性。在其2/3期试验中，共有37,706名16岁以上的参与者接受了两次剂量为30微克的接种，两次接种间隔21天。在接种第一剂后，他们观察到对COVID-19有52%的疫苗效力，表明对疾病发作有初步保护作用；在接种第二剂后7天，对COVID-19的疫苗效力达到91%。总体而言，在这项2/3期试验中，所有参与者观察到95%的疫苗效力。此外，该研究还确认了其有利的安全性概况，其中反应原性事件，如疲劳、全身反应和淋巴结病，在出现几天内自行解决。在BNT162b2的早期1/2期研究中，评估了成年参与者的免疫原性，同样的剂量方案和时间表在参与者中引发了强劲的血清SARS-CoV-2中和滴度，在第二剂后7天，并在第二剂后一个月持续存在。最后，利用以色列大规模疫苗接种活动收集的数据进行的一项研究发现，接种两剂BNT162b2的3,159,136名参与者的结果显示与随机试验一致：预防有症状COVID-19的有效性为94%；预防住院的有效性为87%；预防严重COVID-19发作的有效性为92%。因此，mRNA疫苗BNT162b2证明了mRNA预防性疫苗作为一个有效的平台，以保护免受传染病的侵害，同时在反应原性和免疫原性之间显示出有利的平衡。 作为RNA病毒，SARS-CoV-2容易发生基因突变，使其进化，允许与野生型菌株相比具有不同属性的突变变种出现。对BNT162b2疫苗针对各种变种进行了多项初步研究，特别是对全球流行的高传染性B.1.617.2（Delta）和B.1.1.529（Omicron）变种。Tang等人通过匹配的测试阴性病例对照研究评估了BNT162b2针对Delta变种的实际效果，并得出结论，疫苗有效性降低至51.9%，防止有症状或无症状COVID-19。此外，Nemet等人的另一项初步实验室研究发现，两剂BNT162b2针对Delta和Omicron的中和效力显著降低，对这些变种的保护效力降低。需要注意的是，这些是初步结果，需要进一步研究以检查BNT162b2对特定变种的全面影响。也就是说，这些结果表明需要针对新出现的变种调整疫苗，这对于RNA基础的疫苗方法是可能的，因为它可以快速和可扩展地生产。除了COVID-19 mRNA疫苗外，还开发了针对其他传染病的mRNA疫苗，如呼吸道合胞病毒（RSV）、HIV-1、流感和寨卡病毒，这些疫苗已显示出有希望的临床前和临床结果。BNT162b2和mRNA-1273的批准和紧急授权为mRNA疫苗方法的安全性和效力提供了充分的证据，这加速了这种疫苗技术的发展，并为转变现代疫苗策略提供了乐观的前景。 10.  治疗性疫苗 除了mRNA预防性疫苗外，基于mRNA的疫苗还应用于癌症免疫疗法。mRNA癌症疫苗编码癌症抗原，如肿瘤相关自身抗原（TAA）或肿瘤特异性抗原（TSA），以诱导针对肿瘤的特异性T细胞反应，从而实现肿瘤排斥。基于mRNA的方法在癌症免疫疗法中具有优势，因为它具有抗原传递和表达能力，以及通过mRNA设计激活先天免疫的佐剂功能。基于mRNA的癌症疫苗有两种方法：mRNA树突状细胞（DC）疫苗和mRNA直接癌症疫苗。 基于mRNA的DC疫苗涉及将TAA加载到DCs中，因为DCs具有呈递TAA并启动针对肿瘤的强大效应反应的能力。DCs的体外操作需要从患者的血液中分离出的造血前体细胞，并将转染的细胞重新输注到患者体内，这提供了一种个性化的治疗策略，因为DCs是患者衍生的。然而，这个过程也可能是昂贵和劳动密集型的，同时增加了一层复杂性。顾名思义，后一种方法涉及直接注射编码肿瘤抗原的mRNA，可以被局部细胞摄取以进行抗原呈递。目前，有几个癌症疫苗候选物正在进行临床开发，如表6所示。 表6 目前正在进行或已完成2期或3期临床试验的代表性基于RNA的癌症疫苗列表 在Kyte等人（NCT标识符：NCT01278940）的1/2期研究中，用自体肿瘤mRNA转染的黑色素瘤DC疫苗单独或与佐剂白介素-2（IL-2）一起使用，报告说在31名晚期黑色素瘤患者中有16名患者的肿瘤特异性T细胞免疫反应与生存期改善相关，并且安全性可接受。在另一项2期研究（NCT标识符：NCT03480152）中，一种编码20种不同新抗原的mRNA直接癌症疫苗，由自体癌症表达，并与LNP配制而成，被用于四名转移性胃肠道癌症患者。这种疫苗候选物被发现是安全的，并且诱导了针对预测新表位的突变特异性T细胞反应，使用肿瘤浸润性淋巴细胞；然而，由于患者数量有限，其临床疗效尚待确定。鉴于IVT mRNA技术的安全性、稳健性和相对较低的成本，使用mRNA疫苗的癌症免疫疗法的个性化是可能的，伴随着有希望的临床前数据和正在进行的临床试验。 除了预防性和治疗性mRNA疫苗外，LNP-mRNA技术最近在小鼠模型中用于短暂的抗纤维化嵌合抗原受体（CAR）T治疗。Rurik等人证明，含有修饰核苷的mRNA编码针对成纤维细胞激活蛋白（FAP）的CARs，与CD5靶向LNPs配制而成，也称为靶向抗体/LNP-mRNA载体，可以定向传递到CD5细胞以表达功能性CAR T细胞。FAP是在活跃的组织重塑和急性心肌梗死后损伤中表达的细胞表面糖蛋白。鉴于FAP在心脏成纤维细胞中的强烈表达，它是激活的心脏成纤维细胞的可行靶标和标记。在他们的一系列概念验证实验中，Rurik等人成功证明了封装在靶向LNPs中的修饰mRNA能够传递到特定细胞类型，在体内产生功能性工程化T细胞。此外，这种传递产生了短暂有效的抗纤维化CAR T细胞，表现出肌动蛋白吞噬作用。在高血压小鼠心脏损伤和纤维化模型中，58%的CD3+ T细胞是FAPCAR+，表明在CD5/LNP-FAPCAR注射的小鼠中成功转导了FAPCAR mRNA。最后，用CD5/LNP-FAPCAR治疗的小鼠显示出改善的心脏功能和减少的间质纤维化。通过针对特定细胞类型的LNPs，修饰mRNA治疗可能会扩大其应用范围，创造出一种可扩展且相对便宜的通用治疗的可能性，具有工程化免疫功能的能力。 10.1.  mRNA作为蛋白质替代疗法 体外转录（IVT）mRNA的另一个直接应用是蛋白质替代疗法，其中IVT mRNA编码所需的蛋白质，并在目标细胞中表达以实现治疗目的。因此，以蛋白质表达不足或异常蛋白质产生为特征的疾病，如遗传性疾病，可能从蛋白质替代疗法中受益。基于mRNA的蛋白质替代疗法的优势在于其能够表达几乎所有的蛋白质，包括分泌蛋白、细胞内蛋白和跨膜蛋白。蛋白质替代疗法的临床试验主要集中在遗传性代谢性疾病上，如表7所示。 表7 临床开发中的代表性基于mRNA的蛋白质替代疗法列表 在蛋白质替代疗法的临床研究中，由于其特征是必需酶的缺乏，导致酶的缺乏导致过量的代谢产物，从而产生临床表现，因此遗传性代谢性疾病是研究的重点。上述候选药物的临床数据尚未公布。因此，需要进一步证据来证明蛋白质替代疗法的安全性和有效性。除了代谢性疾病外，蛋白质替代治疗方法也被应用于血液疾病，如血友病A和B。Ramaswamy等人使用LNP配方的mRNA编码人凝血因子IX（hFIX）治疗血友病B的FIX缺陷小鼠模型，证明了他们的传递平台LUNAR在小鼠模型中的安全性和有效性；以及传递到肝脏的FIX蛋白的治疗产生。对于这种模式，仍然存在挑战，如传递方法。目前，mRNA蛋白质替代疗法的传递方法主要针对肝脏、肺和心脏。因此，需要进一步开发传递策略以传递到其他器官。 除了传递编码缺失或异常蛋白质的mRNA外，还开发了与单导向RNA（sgRNA）和编码CRISPR相关蛋白9（Cas9）的mRNA配伍的疗法。Cas9是一种相关的内切核酸酶，能够进行双链DNA断裂，并通过与导向RNA结合形成核糖核蛋白复合物。通过传递与目标基因互补的特定sgRNA以及Cas9 mRNA，可以通过Cas9对目标基因进行切割以实现基因沉默，从而实现体内基因编辑。多个药物候选物正在使用基于RNA的CRISPR-Cas9基因编辑策略进行临床开发，以治疗遗传性疾病。Intellia Therapeutics开发的NTLA-2001是一种基于CRISPR-Cas9的体内基因编辑疗法，目前正在1期临床试验（NCT标识符：NCT04601051）中用于治疗转甲状腺素（ATTR）淀粉样变性——一种罕见的、进行性的疾病，其特征是异常的转甲状腺素（TTR）蛋白的错误折叠积累。候选药物NTLA-2001由与目标TTR基因互补的sgRNA和Cas9蛋白的修饰mRNA序列配制而成，通过LNP传递到肝脏。临床前研究和首次人体中期临床数据分析显示，在动物模型和遗传性ATTR患者中血清TTR浓度降低，证明了TTR的持久靶向敲除。这些研究为体内基于RNA的CRISPR-Cas9基因编辑作为有希望的治疗策略提供了临床证据和概念验证。 在过去几年中，mRNA疫苗领域取得了关键进展，证实了基于mRNA的治疗的可行性。制造方法和传递材料的进步加速了mRNA治疗的发展。尽管基于mRNA的治疗的临床数据令人鼓舞，但仍需要针对特定细胞类型靶向的传递材料的挑战，以及需要进一步深入理解mRNA治疗的机制，以最小化不良事件并提高效力。 11.  结论和未来展望 RNA治疗学是一个迅速发展的领域，正在经历快速扩张。目前已有超过十五种基于RNA的治疗方法获得监管批准，更多的研究进入后期临床开发阶段。这个强大且多功能的平台能够解决当前治疗方法无法满足的许多医疗需求。由于RNA治疗的基本挑战，如传递、稳定性和免疫原性已得到解决，RNA药物的开发正在迅速增长。仍然有改进和优化的空间，如特定细胞类型的传递、提高内体逃逸和增强效力。 然而，RNA活性和传递平台的持续发现和增加的机制理解为RNA治疗的前景提供了乐观的展望。GalNAc-siRNAs和mRNA疫苗的最新成功，以及CRISPR的潜力，预示着RNA治疗学新时代的到来。

据 Insight 数据库统计，本周（10 月 20 日—10 月 26 日）全球共有 74 款创新药（含改良新）研发进度推进到了新阶段，其中 1 款申报上市，25 款启动临床，15 款获批临床，15 款申报临床。 值得一提的是，对国内创新药企们而言，本周最值得关注的正是每年一度的医保谈判开场。今年的谈判日在 10 月 27 日（今天）至 30 日（下周三），11 月即将公布结果，比往年节奏快些。Insight 也就此密切跟进，读者们可点击跳转阅读以下新鲜报道： 2024 医保谈判首日，这 3 类药物值得关注！丁香园直击现场 2024 国谈专家审评通过率仅 41%？这些重磅品种有望参加「灵魂谈判」 2024 年医保谈判拟于 10 月 27 日开始，11 月份公布结果 下文，Insight 仍将分别摘取本周国内外部分重点项目进展做介绍。 境外创新药进展 境外部分，本周共有 17 款药物研发阶段推进，包括 1 款首次启动 III 期临床、5 款首次启动 I 期临床、5 款首次获批临床。 Insight 新药周报将介绍重点项目的审评审批进展、临床试验进展和审评通道进展。全球医药交易及投融资周报可点击链接跳转阅读周六专栏。    获批上市 据 Insight 数据库显示，本周共有 5 项新药/新适应症在全球主要国家/地区（中国内地、美国、日本、EMA）获批上市。数据详见下图： 截图来自：Insight 数据库网页版 1、辉瑞：RSV 疫苗获批扩大适应症，可用于 18-59 岁人群 10 月 22 日，辉瑞宣布，FDA 已批准其 RSV 疫苗 ABRYSVO® 用于 18 至 59 岁高风险成人以预防 RSV 病毒造成的下呼吸道疾病。这是首个获批用于此人群的 RSV 疫苗。 此前，ABRYSVO 已经获批用于 60 岁以上人群，且是唯一获批用于 32 - 36 周孕妇以预防出生至 6 个月内新生儿的 RSV 感染风险，本次适用人群再获拓展，意味着这款疫苗将在 RSV 市场中夺得更多份额。 截图来自：PR Newswire FDA 的批准是基于关键 3 期临床试验 MONeT（NCT05842967）的结果，相应数据将发布于同行评议的期刊之上，并将在未来的医学会议中公布。 辉瑞此款疫苗最初获批于 2023 年 5 月，并在同年 8 月获批用于孕妇。GSK 开发的 RSVPreF3 疫苗（Arexvy/GSK 3844766A）与辉瑞同月获批，成为主要竞争对手；而 Moderna 的 RSV 疫苗也紧随两者之后。这三款 RSV 疫苗在技术路线、抗原选择、佐剂、适应人群和保护效力等方面均存在显著差异。 对比来看，GSK 和辉瑞的 RSV 疫苗均采用重组蛋白亚单位技术路线，而 Moderna 采用了其擅长的 mRNA 技术，其中辉瑞使用的是双价抗原（来自 RSV A 与 RSV B 病毒亚型的 Pre-F 蛋白），另两者均选择以 DS-Cav1 为基础的 Pre-F 抗原。 此外，辉瑞和 Moderna 的 RSV 疫苗均未使用佐剂，而 GSK 使用了自主研发的 AS01e 佐剂，增加了体液免疫和细胞免疫这一优势。 根据 WHO 估计，全球每年有约 3300 万-6000 万的儿童感染 RSV，以及大约 3%-7% 的 60 岁以上老年人会受到 RSV 感染。据分析师预测，RSV 疫苗的市场规模预计到 2030 年会增长到 100 亿美元以上，接近 13 价肺炎疫苗的市场空间。 2、Iterum Therapeutics：首款口服培南类抗生素获美国 FDA 批准 10 月 25 日，Iterum 公司宣布，ORLYNVAH™ (sulopenem etzadroxil/probenecid) 已获美国 FDA 批准上市，用于治疗由指定微生物（大肠杆菌、肺炎克雷伯菌或奇异变形杆菌）引起的、没有或几乎没有可替代口服抗菌治疗方案的无并发症尿路感染（uUTIs）成年女性。 这是这家公司获批的首款新药，也是 FDA 批准的首款口服培南类抗生素。 截图来自：Globe Newswire FDA 的批准是基于两项关键 3 期临床试验 SURE 1 和 REASSURE，其中 SURE 1 评估了 ORLYNVAH™ 相较于环丙沙星在成年女性 uUTI 中的疗效，而 REASSURE 则评估了该药相较于阿莫西林克拉维酸钾（Augmentin）的疗效。 结果显示，Orlynvah 在对抗氟喹诺酮耐药性感染方面优于活性对照药物，且在对阿莫西林克拉维酸钾敏感的人群中与活性对照药物相比非劣，并在统计学上具有显著优势。    申报上市 1、老花眼新药 NDA 申请获 FDA 受理，国内箕星药业引进 10 月 22 日，箕星合作伙伴 LENZ Therapeutics 宣布，FDA 已受理该公司用于治疗老视的 LNZ100 的新药申请（NDA）。PDUFA 目标行动日期为 2025 年 8 月 8 日。 截图来源：企业官微 此次 NDA 提交是基于关键 III 期临床研究 CLARIFY 的积极数据结果。 在 III 期安全性和有效性试验（CLARITY 1 和 2）中，LNZ100（1.75% 乙酰克利定）达到了主要终点和关键次要终点，近距离最佳矫正视力 (BCDVA) 显著提高三行或更多，同时远距离视力没有下降一行或更多。在 CLARITY 2 中，临床结果显示患者视力快速改善且持久： 起效迅速：71% 的患者在 30 分钟内视力改善≥3 行。 达到主要终点：71% 的患者在 3 小时内视力改善≥3 行。 持续时间长：40％的患者视力改善≥3 行可以持续 10 小时。 在为期四周的研究期间，CLARITY 1 和 2 的近视力改善具有可重复性且一致性。 2022 年 4 月 14 日，箕星药业获得了 LENZ Therapeutics 公司旗下两款用于治疗老花眼药物 LNZ100 和 LNZ101 在大中华地区（包括中国大陆、香港、澳门和台湾）的商业化权利。据 Insight 数据库显示，目前该药在中国正处于III 期临床阶段。    其他重要监管资讯 1、阿斯利康/Ionis：每月一次反义寡核苷酸疗获欧盟 CHMP 推荐批准 10 月 21 日，阿斯利康和 Ionis 宣布 Wainzua (Eplontersen) 已获得欧盟人用药品委员会 (CHMP) 的推荐批准，用于治疗患有 1 期或 2 期多发性神经病（通常称为 hATTR-PN 或 ATTRv-PN）的成人患者的遗传性转甲状腺素蛋白介导的淀粉样变性。 新闻稿指出，如果获得欧盟委员会批准，Eplontersen 将成为欧盟唯一获批的治疗 ATTRv-PN 的药物，患者可通过自动注射器每月自行注射。 截图来源：阿斯利康官网 转甲状腺素介导的淀粉样变性 (ATTR) 是由肝脏来源的错误折叠 TTR 蛋白在心脏和周围神经等组织中积累引起的，导致器官损伤和衰竭。ATTR 有遗传性 (ATTRv) 和非遗传性 (野生型) 两种形式，在诊断后五年内会导致周围神经损伤和运动障碍，如果不进行治疗，通常会在十年内致命。 Eplontersen 是 Ionis 公司开发的一种反义寡核苷酸 (ASO) 疗法，可抑制 TTR 的产生，每月注射一次。它是一种 RNA 靶向药物，旨在减少肝脏中 TTR 蛋白的产生，从而有潜力治疗所有类型的 ATTR。 此前，Eplontersen 已于去年 12 月获美国 FDA 批准上市，用于治疗 ATTRv-PN。今年 9 月，Eplontersen 也已在中国申报上市，根据该药在中国的研究进度，推测其在中国申报的适应症可能为：适用于转甲状腺素蛋白淀粉样变性心肌病（ATTR-CM）成人患者。 本次 CHMP 的批准意见是基于积极的 NEURO-TTRansform III 期试验。该试验数据表明，与安慰剂相比，在 66 周内，接受 Eplontersen 治疗的患者在血清转甲状腺素蛋白 (TTR) 浓度和神经病变损伤的共同主要终点以及生活质量 (QoL) 的关键次要终点方面，表现出一致和持续的益处在。此外，在整个 NEURO-TTRansform 试验中，Eplontersen 继续表现出良好的安全性和耐受性。 2021 年，Ionis 公司和阿斯利康达成合作，双方在美国联合开发和商业化 Eplontersen，并授予阿斯利康在拉丁美洲以外的世界其他地区开发和商业化该药物，该合作总金额超 35 亿美元。2023 年 7 月，双方再次扩大合作，阿斯利康又获得了在拉丁美洲商业化 Eplontersen 的独家权利，此项合作总金额也超过 36 亿美元。 2、百济神州：PD-1 抑制剂获欧盟 CHMP 推荐批准，一线治疗胃癌和食管鳞癌 10 月 21 日，百济神州宣布欧洲药品管理局（EMA）人用药品委员会（CHMP）发布积极意见，推荐批准扩大 PD-1 抑制剂百泽安®（替雷利珠单抗）用于胃或胃食管结合部（G/GEJ）腺癌和食管鳞状细胞癌（ESCC）患者治疗的适应症。 对于 G/GEJ 腺癌患者，CHMP 的积极意见支持百泽安®联合含铂和含氟嘧啶类化疗用于 PD-L1 肿瘤面积阳性（TAP）评分 ≥5% 的 HER-2 阴性、局部晚期、不可切除或转移性 G/GEJ 癌症成年患者一线治疗。对于 ESCC 患者，CHMP 的积极意见支持百泽安®联合含铂化疗用于 PD-L1 TAP 评分 ≥5% 的 HER-2 阴性、局部晚期或转移性 ESCC 成年患者一线治疗。 替雷利珠单抗目前已经在欧盟获批用于治疗符合条件的、既往接受过含铂化疗的晚期或转移性 ESCC 患者，以及用于三项非小细胞肺癌（NSCLC）适应症的一线和二线治疗。 本次拟扩大适应症，主要基于 RATIONALE-305 和 RATIONALE-306 的临床结果： 一线 G/GEJ 适应症扩展申请基于百济神州 RATIONALE-305（NCT03777657）研究结果，该研究是一项随机、双盲、安慰剂对照的全球 3 期试验，旨在评价替雷利珠单抗联合化疗用于晚期不可切除或转移性 G/GEJ 患者一线治疗的有效性和安全性。 该研究在欧洲、北美和亚太地区的研究中心入组了 997 例患者。结果显示，接受百泽安®联合研究者选择的化疗的患者中位 OS 为 15.0 个月，而接受安慰剂联合化疗的患者中位 OS 为 12.9 个月（n=997；HR：0.80 [95% CI：0.70，0.92]；P=0.0011），表明死亡风险降低了 20%。在 PD-L1≥5% 的人群中，百泽安®联合化疗组中位 OS 为 16.4 个月，而安慰剂组中位 OS 为 12.8 个月（HR：0.71[95% CI：0.58 ~ 0.86]），表明死亡风险降低了 29%。 一线 ESCC 适应症扩展申请基于百济神州 RATIONALE-306（NCT03783442）研究结果，该研究是一项随机、安慰剂对照、双盲的全球 3 期研究，旨在评价替雷利珠单抗联合化疗用于不可切除、局部晚期复发或转移性 ESCC 患者一线治疗的有效性和安全性。 该研究在欧洲、北美和亚太地区的研究中心入组了 649 例患者。结果显示，百泽安®联合化疗组中位 OS 为 17.2 个月，而安慰剂联合化疗组中位 OS 为 10.6 个月（HR：0.66 [95% CI：0.54 ~ 0.80，单侧 p 值< 0.0001]），表明死亡风险降低了 34%。PD-L1≥5% 的患者群体中，百泽安®组 3 年 OS 也得到显著改善（中位 OS 为 19.1 个月 vs. 10.0 个月；HR：0.62[95% CI：0.49 ~ 0.79]），表明死亡风险降低了 38%。    重要临床结果 1、诺和诺德：口服司美格鲁肽又一项 3 期临床成功 10 月 21 日， 诺和诺德宣布口服司美格鲁肽的 3 期临床试验 SOUL 研究结果积极。 这项随机、双盲全球多中心临床试验比较了口服司美格鲁肽相较于安慰剂作为标准护理之外的附加疗法对主要心血管事件（MACE）的预防效果，纳入了 9650 例患有 2 型糖尿病和确诊心血管疾病（CVDL）和/或慢性肾病（CKD）患者。试验达到了主要终点，相较于安慰剂显著降低了 14% 的 MACE 发生风险。 截图来源：企业官网 约有三分之一的 2 型糖尿病患者患有心血管疾病，这意味着很大的临床需求。基于此项临床试验的成功，诺和诺德期望在 2025 年初向美国和欧盟提交口服司美格鲁肽（Rybelsus®）的新适应症上市申请。而该项研究的详细结果，则将在 2025 年的医学会议中予以披露。 多肽类药物通过胃肠吸收、实现口服一直是药物研发历程上的难题。借助「SNAC 吸收促进剂」创新技术，诺和诺德突破了这一技术壁垒，实现了 GLP-1RA 类药物经口服途径给药的历史性跨越。SNAC 的促吸收作用可将口服给药途径的司美格鲁肽分子生物利用度提高约 100 倍。司美格鲁肽片每日口服给药，即可强效降糖，获得平稳血药浓度曲线。在 2023 年度，司美格鲁肽口服制剂已经实现 27.23 亿美元全球销售额，同比增幅高达 70%。    MNC 财报 1、罗氏 2024Q3：制药业务前三季度营收 343 亿瑞士法郎，中国区增长 8% 10 月 23 日，罗氏公布三季度报，前九个月，制药业务销售额 343 亿瑞士法郎，增长 7%，基础业务（不包括 COVID-19）增长 9%；第三季度，实现销售额增长 9%（以瑞士法郎计算为 6%），与第二季度持平。 其中，中国地区销售额增长 8%，主要得益于 Xofluza、Perjeta、Polivy 和 Avastin。 诊断业务全球销售额增长了 5%，而基础业务（不包括 COVID-19）销售额由于对免疫诊断、病理学和分子解决方案的需求增加而增长了 8%。 国内创新药进展 本周国内共有 51 款创新药（含改良新）研发进度推进到了新阶段，其中 1 款申报上市，2 款启动 III 期临床，12 款新药获批临床，20 款申报临床。 本周国内首次获批临床的 15 款创新药（含改良新） 来自：Insight 数据库网页版 （下文如无特殊标注，为同一来源）    获批上市 1、百济神州：PD-1 抑制剂在中国获批第 14 项适应症 10 月 21 日，百济神州宣布，其 PD-1 抑制剂百泽安（替雷利珠单抗）正式获得中国国家药监局批准，联合含铂化疗新辅助治疗，并在手术后继续本品单药辅助治疗，用于可切除的 II 期或 IIIA 期非小细胞肺癌患者的治疗。 截图来源：百济神州官微 本次获批是基于 RATIONALE 315（NCT04379635）的临床试验数据。该研究是一项多中心、随机、安慰剂对照、双盲的 3 期研究，评价了替雷利珠单抗联合含铂双药化疗作为新辅助治疗，后续辅以替雷利珠单抗辅助治疗，用于可切除 II 期或 IIIA 期 NSCLC 患者的有效性和安全性。 研究结果显示，无事件生存期（EFS）和主要病理学缓解率（MPR 率）的双重主要终点皆已达到，证实围术期替雷利珠单抗联合新辅助化疗的治疗方式可以显著降低患者的围术期进展或复发转移风险。 与围术期安慰剂联合新辅助化疗相比，围术期替雷利珠单抗联合新辅助化疗显著提高了 MPR 率（56.2% vs 15.0%）和病理学完全缓解率（pCR 率，40.7% vs 5.7%），并显著延长了 EFS（HR：0.56，95% CI: 0.40~0.79），且已观察到总生存期（OS）显示良好的延长趋势（HR：0.62，95% CI: 0.39~0.98）； 该治疗方案的总体耐受性良好，未发现新的安全性信号。 此项研究的结果也已在 2024 年 2 月召开的欧洲肿瘤内科学会年会全体会议（ESMO plenary session）上发布。 2、强生：复方制剂「泽倍珂」在华获批， 治疗前列腺癌 10 月 21 日，强生宣布，旗下创新治疗药物泽倍珂（尼拉帕利阿比特龙片）正式获得国家药品监督管理局批准。作为目前国内首个且唯一获批的双效复方制剂，泽倍珂联合泼尼松或泼尼松龙用于治疗携带胚系和/或体系 BRCA 基因突变的转移性去势抵抗性前列腺癌成人患者（mCRPC）。 截图来源：强生官微 泽倍珂是 BRCA1/2 突变 mCRPC 成人患者的一线靶向治疗方案。作为一种高选择性聚腺苷二磷酸核糖聚合酶 (PARP) 抑制剂，尼拉帕利和醋酸阿比特龙的组合联合泼尼松或泼尼松龙，能够靶向 mCRPC 患者的两种致癌驱动因素——雄激素受体轴和 BRCA1/2 突变。 经临床验证，泽倍珂联合泼尼松或泼尼松龙可显著延长 BRCA1/2 突变 mCRPC 患者的影像学无进展生存期（rPFS）。此外，与安慰剂相比，尼拉帕利还显示出总体生存 (OS) 改善的趋势，可显著延长至症状进展时间（TSP）和至细胞毒性化疗起始时间（TCC），同时并维持了患者的生活质量。 3、罗欣药业：1 类新药「替戈拉生」获批新适应症 10 月 21 日，NMPA 官网显示，罗欣药业替戈拉生片新适应获批上市，与适当的抗菌疗法联用根除幽门螺杆菌。本次是替戈拉生片获批的第 3 项适应症，另外两项已获批的适应症分别是反流性食管炎和十二指肠溃疡。 截图来源：NMPA 官网 替戈拉生片是我国首款自研钾离子竞争性酸阻滞剂类药物（P-CAB），拥有全新抑酸作用机制。和传统抑酸药物相比，替戈拉生片拥有 30 分钟快速起效、黏膜愈合率高、有效改善夜间酸突破、药物相互作用较少，且服药方便不受进食影响等显著优势。 此次获批上市是基于国内开展的一项多中心、随机、双盲双模拟的 III 期临床研究，旨在评价含替戈拉生对比含艾司奥美拉唑的铋剂四联疗法根除幽门螺杆菌的疗效和安全性。该研究结果入选 2024 年 DDW 口头报告。 该研究共纳入561 例受试者，其中 555 例被纳入全分析集（Full Analysis Set，FAS）。受试者被随机分配至替戈拉生（50 mg）组或艾司奥美拉唑（20 mg）组治疗 14 天。主要终点是治疗后通过 13C-尿素呼气试验确定幽门螺杆菌根除率，次要终点是在阿莫西林或克拉霉素不同敏感人群中的幽门螺杆菌根除率。 FAS 中替戈拉生组和艾司奥美拉唑组的幽门螺杆菌根除率分别为 93.5% 和 86.4%（差值 7%；95%CI，2.06-11.99%）。证明了含替戈拉生铋剂四联疗法根除幽门螺杆菌的非劣效性。根据研究方案进行预先设定的优效性检验，含替戈拉生铋剂四联疗法优于含艾司奥美拉唑铋剂四联疗法（P=0.0055）。在阿莫西林或克拉霉素不同敏感人群中，替戈拉生组的Hp根除率均高于艾司奥美拉唑组，但差异无统计学意义（P>0.05）。在 PPS（Per Protocol Set）中也观察到类似的结果。 两组之间的安全性相似。替戈拉生组和艾司奥美拉唑组的治疗中出现的不良事件发生率（TEAE）分别为 75.5% 和 73.4%，分别有 173（62.2%）例和 165（58.5%）例受试者报告了与研究药物有关的不良事件（TRAE）。    申报上市 1、首药控股：新一代 ALK 抑制剂「康太替尼颗粒」申报上市 10 月 23 日，CDE 官网公示，首药控股的 1 类新药康太替尼颗粒申报上市，单药适用于间变性淋巴瘤激酶（ALK）阳性的局部晚期或转移性非小细胞肺癌（NSCLC）患者治疗。 康太替尼（CT-707）是一款第二代 ALK 多靶点激酶抑制剂，靶向 ALK/FAK/PTK2B/IGF1R。今年上半年，该药已在头对头克唑替尼（辉瑞）的 Ⅲ 期临床中达到研究主要终点。 截图来源：CDE 官网 康太替尼本次上市申请是基于一项关键性 Ⅲ 期临床试验（CTR20200770）。该研究旨在比较康太替尼与克唑替尼治疗 ALK 阳性晚期 NSCLC 患者的有效性和安全性。主要研究终点为经过独立影像评价的无进展生存期（PFS），次要研究终点包括研究者评价的 PFS、研究者和独立影像评估的客观缓解率（ORR）、缓解持续时间（DOR）、总生存期（OS）等。 该研究由中国医学科学院肿瘤医院石远凯教授领衔担任主要研究者，全国 80 余家中心共同参与，共纳入 414 例既往最多接受过 1 线化疗方案的治疗、且未接受过任何 ALK 抑制剂治疗的 ALK 阳性晚期 NSCLC 患者。 今年上半年，康太替尼治疗 ALK 阳性 NSCLC 患者的关键性 Ⅲ 期临床试验完整数据读出，主要研究终点结果达到方案预设的优效标准。数据显示，与对照组相比，康太替尼在治疗 ALK 阳性 NSCLC 患者中取得了显著且有临床意义的改善，安全性方面同样展现出独特的优势。    拟优先审评 1、第一三共：「吡昔替尼」拟纳入优先审评，首款治疗 TGCT 10 月 24 日，CDE 官网显示，第一三共新药盐酸吡昔替尼胶囊（PLX3397）拟纳入优先审评，用于治疗伴有重度病变或功能受限且无法通过手术改善的症状性腱鞘巨细胞瘤（TGCT）成年患者。这是目前全球首个也是唯一一个获批治疗 TGCT 的药物。 截图来源：CED 官网 吡昔替尼（Pexidartinib）是一种小分子酪氨酸激酶抑制剂，能够抑制集落刺激因子 1 受体 （CSF1R），CSF1R 配体的过表达促进滑膜中细胞的增殖和积累。此外，吡昔替尼还能抑制 KIT 和 FLT3。 2019 年 8 月 2 日，FDA 批准 Pexidartinib（Turalio） 用于存在严重的发病率或功能限制且不适合手术改善的症状性腱鞘巨细胞瘤（TGCT）成人患者的治疗。该项批准基于一项关键 III 期 ENLIVEN 研究的积极数据。ENLIVEN 研究入组了 120 例患者，1：1 随机分配至 Pexidartinib 组（61 例）和安慰剂组（ 59 例），主要疗效终点是治疗 25 周后总缓解率（ORR）。 数据显示，治疗第 25 周，口服 Pexidartinib 治疗组 ORR 为 39%，安慰剂组为 0%，达到了研究的主要终点。    临床试验结果 1、再鼎医药：DLL3 ADC 广泛期小细胞肺癌临床结果公布，ORR 高达 74% 10 月 25 日，再鼎医药在 2024 年 EORTC-NCI-AACR（ENA）大会上，以口头报告的形式，公布了ADC 新药 ZL-1310 全球 Ia 期临床研究数据，至少接受过一次治疗后评估的患者 ORR 为 74%。 ZL-1310 是一款靶向 Delta 样配体 3（DLL3）潜在的同类最优的新一代 ADC，其包含人源化抗 DLL3 单克隆抗体，该抗体与新型喜树碱衍生物（一种拓扑异构酶 1 抑制剂）连接作为其有效载荷。 本次会议上布了正在进行的 Ia 部分单药治疗剂量递增研究的数据，其中包括四个剂量组（0.8 mg/kg、1.6 mg/kg、2.0 mg/kg 和 2.4 mg/kg）中 25 位患者的研究结果。其中 19 例可评估患者中，至少接受过一次治疗后评估的患者 ORR 为 74%（95%CI, 48.8, 90.9）。 DLL3 H-Score 评分大于 5（范围：5-260）的患者均表现出肿瘤缓解。在 19 位患者中出现应答的 14 位患者中，有 13 位仍基线有脑转移且可评估疗效的六位患者，均获得部分缓解（PR）。 ZL-1310 在所有剂量水平下均具有良好的耐受性，大多数治疗出现的不良事件（TEAE）为 1 级或 2 级。在 2.4 mg/kg 剂量组观察到 DLT 。25 位患者中有 5 位（20%）发生了≥3 级以上的治疗相关不良事件；2 位患者（8%）发生了严重的治疗相关不良事件；3 位患者（12%）需要降低剂量，没有患者因 TEAE 而终止治疗。 19 位患者中，所有患者均在接受标准含铂化疗后出现进展，92% 的患者在接受免疫检查点抑制剂治疗后出现进展。56% 的患者此前至少接受过两种治疗但均失败。28% 的患者在基线时存在脑转移。 这些有潜力的研究数据支持对 ZL-1310 作为单药在正在进行的 1 期临床研究的剂量扩展阶段，以及在联合治疗中的继续评估。 2、兆科眼科：新型「儿童近视眼药水」中国 III 期临床成功 10 月 23 日，兆科眼科宣布，NVK002 为期两年的 III 期临床试验（China CHAMP）取得积极的顶线结果。 NVK002 是一种用于控制儿童及青少年近视加深的试验性新型外用眼部溶液。该药是一项专利配方，可成功解决低浓度阿托品的不稳性。NVK002 不含防腐剂，预计保存期至少 24 个月。NVK002 的目标患者覆盖 3 至 17 岁的儿童及青少年。 NVK002 的临床开发涉及两款不同浓度的阿托品，以便配合个别患者的需要，灵活达致最佳疗效与最少副作用。 China CHAMP 是一项随机、双盲、安慰剂平行对照、多中心、 III 期临床研究，其主要目标为评估 NVK002（0.01% 及 0.02% 的低剂量阿托品）对治疗中国儿童及青少年近视加深的疗效及安全性。该项试验涉及 18 家研究中心，入组 777 名患者。 经过两年的治疗，这项研究分析显示，NVK002 滴眼液组（0.01% 和 0.02% 剂量）对比安慰剂组在主要疗效指标上有统计学意义的显著性差异，NVK002 滴眼液组优于安慰剂组，且具有剂量依赖。两种剂量的 NVK002 安全性良好，患者使用依从性好。    启动 III 期临床 1、恒瑞医药：IL-5 单抗启动三期临床，治疗哮喘 10 月 22 日，恒瑞在 Clinicaltrials 网站登记一项 III 期临床，评价 SHR-1703 治疗嗜酸性粒细胞哮喘的疗效和安全性。 截图来源：Clinicaltrials 官网 该研究计划入组 360 人，主要终点为 48 周时哮喘的加重率。 SHR-1703 是恒瑞研发的一种新型、皮下注射用、人源化抗 IL-5 单克隆抗体（IgG1 亚型），可与 IL-5 结合，抑制 IL-5/IL-5R 信号通路，从而抑制嗜酸性粒细胞的增殖、活化和迁移，降低嗜酸性粒细胞型哮喘患者的哮喘发作次数，改善患者肺功能，提高患者生活质量。 今年 5 月份，恒瑞公布了 SHR-1703 在健康受试者中的 I 期研究结果，数据显示，接受 SHR-1703 后，外周血嗜酸性粒细胞 (EOS) 较基线大幅下降，而安慰剂组与基线相比没有显著变化。随着 SHR-1703 剂量的增加，EOS 减少的幅度和持续时间增加。在 400 mg 剂量下，单次给药后约 6 个月内仍能保持显著的降低 EOS 的效果。此外，SHR-1703 在健康受试者中表现出低免疫原性 (2.9%)、良好的安全性和耐受性。 除了用于哮喘外，SHR-1703 用于变应性肉芽肿血管炎也进展到临床 II/III 期，该研究在 2023 年 11 月份完成首例患者入组，预计会在 2027 年 Q2 完成。 目前全球已有三款针对 IL-5/IL-5R 的单克隆抗体获批上市，分别为葛兰素史克的美泊利珠单抗，优时比/Teva 的瑞替珠单抗和协和麒麟/阿斯利康公司的本瑞利珠单抗；其中只有美泊利珠单抗和本瑞利珠单抗在国内获批。虽然尚无国产 IL-5/IL-5R 单抗获批，但是已有 5 款国产进展到临床阶段，其中最快的就是恒瑞的 SHR-1703 和三生国建 SSGJ-610，都处于 III 期临床。 内容来源：药企官方发布新闻/资料、Insight 数据库 封面来源：站酷海洛 Plus 免责声明：本文仅作信息分享，不代表 Insight 立场和观点，也不作治疗方案推荐和介绍。如有需求，请咨询和联系正规医疗机构。 PR 稿对接：微信 insightxb 投稿：微信 insightxb；邮箱 insight@dxy.cn 点击卡片进入 Insight 小程序 国内审评进度、全球新药开发… 随时随地查！ 多样化功能、可溯源数据…… Insight 数据库网页版等你体验 点击阅读原文，立刻解锁！