Fresolimumab

一、肺纤维化小鼠模型：间质性肺病研究的核心临床前平台特发性肺纤维化（Idiopathic Pulmonary Fibrosis, IPF）是最常见且预后最差的间质性肺病，全球患病率持续上升，患者中位生存期仅2-3年，5年死亡率高于多数恶性肿瘤。IPF的核心病理特征为肺泡上皮反复损伤、成纤维细胞异常活化、肌成纤维细胞大量增殖及细胞外基质过度沉积，最终导致肺结构破坏、呼吸功能衰竭。目前临床可用的抗纤维化药物仅有吡非尼酮（Pirfenidone）和尼达尼布（Nintedanib），虽能延缓肺功能下降，但无法逆转已形成的纤维化，且存在胃肠道不耐受、光敏反应等副作用。在这一背景下，肺纤维化小鼠模型凭借其呼吸系统与人类的高度相似性、造模方法成熟、病理进程可控以及评价技术完善等优势，成为IPF机制研究、抗纤维化药物筛选及治疗策略评估不可或缺的黄金标准临床前工具。通过化学诱导、辐射暴露、基因工程或 silica/石棉暴露等手段，研究者可在数周内成功复制出从早期肺泡炎到晚期蜂窝肺的完整病理谱系，为肺纤维化小鼠模型的广泛应用奠定了坚实基础。二、为什么选择小鼠构建肺纤维化模型？1. 肺组织结构与纤维化机制的高度保守性小鼠肺在解剖结构（支气管树分级、肺泡囊结构）、细胞组成（Ⅰ型/Ⅱ型肺泡上皮细胞、成纤维细胞、肺泡巨噬细胞）、细胞外基质成分及纤维化核心信号通路（TGF-β/Smad、Wnt/β-catenin、YAP/TAZ、PDGF）方面与人类高度同源。在肺纤维化小鼠模型中，肺泡上皮损伤、成纤维细胞灶形成、肌成纤维细胞活化、胶原纤维沉积及肺顺应性下降等病理改变，与临床IPF患者的组织学特征（UIP模式：时相不均一、成纤维细胞灶、蜂窝肺）高度一致。2. 基因编辑技术精准可控小鼠拥有最成熟的基因编辑技术体系。通过构建特定基因修饰模型（如SFTPC突变、TERT突变、TGF-α过表达、Col1a2-GFP报告基因等），可在肺纤维化小鼠模型中精准模拟遗传性肺纤维化、追踪胶原合成细胞来源、验证特定信号通路的因果作用。3. 肺功能评价技术成熟现代肺纤维化小鼠模型评价已整合肺功能仪检测、Micro-CT成像、组织病理学评分及分子生物学分析，能够系统评估肺顺应性、气道阻力、肺容积、弥散功能及气体交换效率，与人类IPF的肺功能评估高度对应。4. 成本与伦理优势相比大动物（兔、羊、猪）模型，小鼠饲养成本低、繁殖快、样本量充足。在肺纤维化小鼠模型中，单批次实验可完成多组药物或干预措施的平行比较，兼顾科学严谨性与研发经济性。三、肺纤维化小鼠模型的核心构建技术1. 博来霉素诱导模型博来霉素诱导是肺纤维化小鼠模型中最经典、应用最广泛的方法：造模原理：博来霉素（Bleomycin）是一种抗肿瘤抗生素，通过气管内滴注（1.5-3.5 U/kg，溶于50-100 μL生理盐水）或雾化吸入，直接损伤肺泡上皮细胞（特别是Ⅱ型肺泡上皮细胞），诱导氧化应激、DNA断裂及炎症级联反应。炎症期（0-7天）以中性粒细胞和巨噬细胞浸润为主，增殖期（7-14天）出现成纤维细胞活化，纤维化期（14-28天）形成明显胶原沉积和肺结构重塑；模型特点：造模方法简便、成本低廉、重复性较好，病理进程时序清晰，对抗纤维化药物（吡非尼酮、尼达尼布）反应良好。该模型是评估抗肺纤维化药物疗效的金标准肺纤维化小鼠模型；改良方案：多次低剂量博来霉素给药（每周1次，连续4周）可诱导更持久的纤维化，模拟慢性进展过程；基因修饰背景（如TGF-β过表达）可增强纤维化严重程度。2. 二氧化硅/石棉诱导模型二氧化硅/石棉模型是肺纤维化小鼠模型中模拟职业性尘肺的重要类型：造模方法：通过气管内滴注二氧化硅颗粒（2-5 mg/只，粒径1-5 μm）或石棉纤维，诱导持续性肺泡炎和肉芽肿形成，4-8周进展为弥漫性肺纤维化；模型特点：病理进程缓慢但持久，伴明显巨噬细胞活化、肉芽肿形成及进行性肺功能下降，更接近人类尘肺和慢性 hypersensitivity pneumonitis 的病理特征。3. 辐射诱导模型辐射模型是肺纤维化小鼠模型中模拟放射性肺损伤的特殊类型：造模方法：胸部局部照射（12-20 Gy，单次或分次），诱导急性放射性肺炎（1-3个月）后继发慢性肺纤维化（3-6个月）；模型特点：病理进程与人类放射性肺纤维化高度一致，适用于研究肿瘤放疗后的肺损伤机制及防护策略。4. 基因工程自发模型基因工程模型是研究遗传性肺纤维化机制最精准的肺纤维化小鼠模型：TGF-α过表达模型：在肺上皮细胞特异性过表达TGF-α，诱导慢性肺泡上皮损伤、成纤维细胞活化及进行性肺纤维化，模拟慢性炎症性肺纤维化；SFTPC突变模型：携带SFTPC I73T或L188Q突变，模拟遗传性肺表面活性物质代谢障碍相关的家族性肺纤维化；TERT/TERC突变模型：端粒酶基因突变导致端粒缩短，诱导肺泡上皮细胞衰老及肺纤维化，模拟短端粒综合征相关IPF；Col1a2-GFP报告基因模型：实时追踪胶原合成细胞来源和动态变化。5. 复合与加速模型博来霉素+衰老模型：在老年小鼠（18-24月龄）上进行博来霉素诱导，加速纤维化进程，模拟衰老相关的肺纤维化易感性；博来霉素+基因修饰模型：在TGF-β信号增强或抗氧化缺陷（如Nrf2-/-）背景下诱导，加重纤维化表型；流感病毒感染后模型：病毒感染诱导急性肺损伤后继发肺纤维化，模拟病毒性肺炎后的肺纤维化。四、肺纤维化小鼠模型的评价指标体系1. 肺功能检测肺功能仪（FlexiVent）：在麻醉、气管插管、机械通气条件下，检测：肺顺应性（Compliance, C）：反映肺组织弹性，纤维化时显著降低；气道阻力（Resistance, R）：反映气道通畅程度；用力肺活量（FVC）及第0.1秒用力呼气容积（FEV0.1）；压力-容积（P-V）曲线：评估肺扩张能力；血气分析：动脉血氧分压（PaO₂）、二氧化碳分压（PaCO₂）、氧合指数（PaO₂/FiO₂），评估气体交换功能。2. 影像学评估Micro-CT：活体三维成像，定量肺容积、肺密度、纤维化区域体积及分布，无创动态监测疾病进展；X线/DR：观察肺纹理增粗、网格状阴影及蜂窝样改变；高分辨率CT（HRCT）模拟：离体肺组织HRCT样成像，评估纤维化程度。3. 组织病理学与纤维化评分HE染色：观察肺泡结构破坏、炎症细胞浸润、成纤维细胞灶及蜂窝样改变；Masson三色染色：胶原纤维呈蓝色，定量纤维化面积占比；天狼星红染色：偏振光下区分Ⅰ型胶原（橙红色，成熟）与Ⅲ型胶原（绿色，新生），评估胶原成熟度与重塑；免疫组化/免疫荧光：α-SMA：肌成纤维细胞标志；FSP-1/S100A4：成纤维细胞标志；E-cadherin/Vimentin：评估上皮-间质转化（EMT）；TGF-β1、p-Smad2/3：TGF-β信号通路激活；Surfactant Protein C（SPC）：Ⅱ型肺泡上皮细胞标志；Aquaporin-5（AQP5）：Ⅰ型肺泡上皮细胞标志；Ashcroft评分：标准化半定量评分系统（0-8分），评估肺纤维化严重程度；改良Ashcroft评分/Hrubec评分：更精细的纤维化分级。4. 细胞外基质与胶原代谢羟脯氨酸（HYP）含量：胶原特征氨基酸，生化法定量肺组织总胶原含量，是评估肺纤维化小鼠模型胶原沉积的经典指标；Sircol可溶性胶原定量试剂盒：区分酸溶性胶原和肽溶性胶原；ELISA：检测肺组织或支气管肺泡灌洗液（BALF）中Col1a1、Col3a1、Fibronectin、Laminin含量；基质金属蛋白酶（MMPs）与组织抑制剂（TIMPs）：MMP-2、MMP-9、MMP-13、TIMP-1、TIMP-2表达及活性检测。5. 炎症与免疫调控支气管肺泡灌洗液（BALF）分析：细胞分类计数：总细胞数、巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞比例；炎症因子：IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β1、MCP-1、CCL18 ELISA；蛋白浓度：反映肺泡-毛细血管屏障通透性；肺组织炎症因子：qPCR或Western blot检测IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β1、IL-10、IL-13；巨噬细胞极化：CD86（M1型）、CD206/Arg-1（M2型）免疫荧光/流式；炎症小体：NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、IL-1β/IL-18 Western blot。6. 氧化应激与细胞死亡ROS水平：DHE荧光探针检测肺组织活性氧；抗氧化酶：SOD、CAT、GSH-Px、HO-1、Nrf2；氧化损伤标志物：MDA、4-HNE、8-OHdG；细胞凋亡：TUNEL、Cleaved Caspase-3、Bax/Bcl-2；细胞焦亡：GSDMD-N、Caspase-1、p-IL-1β；细胞铁死亡：GPX4、ACSL4、FTH1、SLC7A11、脂质过氧化；细胞衰老：p16、p21、SA-β-gal、γ-H2AX。7. 分子机制与多组学分析通过转录组测序、单细胞测序、蛋白质组学、代谢组学及空间转录组学，在肺纤维化小鼠模型中解析：TGF-β/Smad/非Smad信号通路（ERK、JNK、p38、PI3K/Akt）；Wnt/β-catenin与Hedgehog通路；YAP/TAZ机械转导信号；PDGF/FGF/VEGF生长因子网络；表观遗传调控（DNA甲基化、组蛋白修饰、HDAC、miRNA-21、miRNA-29）；代谢重编程（糖酵解、谷氨酰胺代谢、脂肪酸氧化）；衰老相关分泌表型（SASP）与细胞衰老；肠道菌群-肺轴（Gut-Lung Axis）交互作用。五、肺纤维化小鼠模型的主要应用领域1. 抗肺纤维化药物研发在肺纤维化小鼠模型中，可系统评估以下候选药物的抗纤维化效力：TGF-β通路抑制剂：Galunisertib（LY2157299，TGF-βRI激酶抑制剂）、Fresolimumab（抗TGF-β抗体）、Pirfenidone（多靶点，已上市）；酪氨酸激酶抑制剂：Nintedanib（VEGFR/PDGFR/FGFR抑制剂，已上市）；整合素抑制剂：PLN-74809（αvβ1/αvβ6双重抑制剂）、BG00011（抗αvβ6抗体）；LOX/LOXL2抑制剂：Simtuzumab（抗LOXL2抗体）、PXS-5382A；CTGF抑制剂：Pamrevlumab（抗CTGF抗体）；自噬调节剂：HCQ、雷帕霉素；衰老细胞清除剂（Senolytics）：达沙替尼+槲皮素（D+Q）、Navitoclax；干细胞与外泌体：间充质干细胞、外泌体。通过量化Ashcroft评分降低、羟脯氨酸减少、肺功能改善及生存期延长，在早期研发阶段即完成药效学评价。2. 中药复方与天然产物现代化扶正化瘀方、补肺汤、百合固金汤、麦门冬汤及单味药材（如丹参、三七、黄芪、当归、川芎、雷公藤甲素、姜黄素、白藜芦醇）等，可通过肺纤维化小鼠模型现代化验证其抑制TGF-β信号、减少胶原沉积、抗氧化应激及调节免疫的生物学效应。3. 功能性食品与营养干预N-乙酰半胱氨酸（NAC）、维生素E、维生素D、Omega-3脂肪酸、姜黄素、白藜芦醇及特定益生菌（如Lactobacillus rhamnosus GG）等，可在肺纤维化小鼠模型中评估其抗氧化、抗炎及抗纤维化的辅助作用。4. 基因治疗与细胞治疗AAV介导的miRNA-21 sponge、CRISPR基因编辑、间充质干细胞（MSC）及MSC来源外泌体，可在肺纤维化小鼠模型中评估其靶向调控纤维化信号、促进肺泡上皮修复的效果。5. 环境污染物与职业防护二氧化硅、石棉、PM2.5、臭氧及金属粉尘等环境/职业暴露因素，可在肺纤维化小鼠模型中评估其致肺纤维化风险及防护策略。六、百环生物：肺纤维化小鼠模型的专业服务平台在肺纤维化临床前研究领域，百环生物建立了完善的技术服务体系，为制药企业、科研院所、生物技术公司及医疗机构提供从模型构建到数据交付的一站式肺纤维化小鼠模型解决方案。标准化肺纤维化模型平台百环生物已成功建立多种成熟的肺纤维化小鼠模型，包括：博来霉素气管滴注模型（经典IPF模型，14-28天纤维化高峰）博来霉素雾化吸入模型（更均匀分布，减少操作变异）多次低剂量博来霉素慢性模型（4周，模拟慢性进展）二氧化硅气管滴注尘肺模型（4-8周，肉芽肿+纤维化）石棉诱导肺纤维化模型胸部辐射诱导肺纤维化模型（12-20 Gy，3-6个月）TGF-α过表达转基因模型（自发进行性纤维化）博来霉素+衰老加速模型（老年小鼠，加重纤维化）所有模型均经过严格的病理表型验证与阳性药物对照测试（吡非尼酮、尼达尼布），确保肺纤维化程度、炎症活动度及肺功能损伤指标的稳定性与可重复性。多维度评价技术体系百环生物配备先进的呼吸功能与病理检测平台，可在肺纤维化小鼠模型中完成：FlexiVent肺功能仪检测肺顺应性、气道阻力、FVC、FEV0.1及P-V曲线；动脉血气分析（PaO₂、PaCO₂、氧合指数）；Micro-CT活体三维成像与肺密度定量；肺组织HE、Masson、天狼星红染色及Ashcroft标准化评分；α-SMA、Col1a1、Col3a1、TGF-β1、p-Smad2/3免疫组化/免疫荧光；羟脯氨酸（HYP）含量及Sircol胶原定量；BALF细胞分类计数与炎症因子（IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β1、CCL18）ELISA；巨噬细胞M1/M2极化流式细胞术分析；NLRP3、NF-κB、Nrf2/HO-1 Western blot；ROS、MDA、SOD、GPX4氧化应激与铁死亡指标；细胞衰老（p16、p21、SA-β-gal）检测；转录组学/单细胞测序/空间转录组学/蛋白质组学/代谢组学机制研究支持。药物筛选与机制研究服务百环生物支持基于肺纤维化小鼠模型的抗纤维化药物、基因治疗、细胞治疗、干细胞外泌体、中药复方、天然产物及功能性食品的系统评价、量效关系分析、预防性/治疗性/逆转性给药方案优化及作用机制探索。专业团队协助客户设计合理的造模参数、给药时机及评价终点，并提供符合NMPA/FDA申报要求的完整数据包。严格的质量与合规管理百环生物遵循实验动物伦理规范与数据完整性管理原则，所有肺纤维化小鼠模型实验均设置正常对照、模型对照及阳性药对照，博来霉素剂量经精确计算，气管滴注操作标准化（深度、体积、速度），肺功能检测由经过专业培训的人员执行，原始数据、影像记录、肺功能数据及统计分析报告完整归档，确保研究结果的科学可信度与可追溯性。全流程项目支持从项目咨询、模型选择、实验方案设计、肺纤维化小鼠模型构建、肺功能动态监测、病理评价到最终报告撰写，百环生物提供全流程技术支持与项目管理服务，助力客户高效推进抗肺纤维化药物研发、IPF机制研究及肺修复策略开发。七、结语肺纤维化小鼠模型以其肺组织结构的保守性、造模方法的成熟性、病理进程的可控性及评价体系的完善性，正在成为间质性肺病研究与抗肺纤维化药物开发领域不可或缺的技术工具。无论是解析TGF-β驱动的成纤维细胞活化机制，还是加速新型整合素抑制剂从实验室到临床的转化，选择一家技术扎实、体系完善的实验服务平台都是确保研究质量与研发效率的关键。百环生物深耕肺纤维化临床前研究领域，以标准化的肺纤维化小鼠模型构建平台、多维度的评价技术体系与严谨的质量管理，为每一位合作伙伴提供高质量的临床前研究服务，共同推动特发性肺纤维化等间质性肺病的精准防治与创新疗法开发。返回搜狐，查看更多

一、小鼠纤维化模型：器官纤维化研究的核心临床前平台器官纤维化是多种慢性疾病进展至功能衰竭的共同病理结局，可累及肺、肝、肾、心脏、皮肤等多个器官。据统计，纤维化疾病导致的死亡占全球总死亡人数的45%以上，但至今仍缺乏能够有效逆转纤维化进程的特异性治疗药物。特发性肺纤维化（IPF）患者中位生存期仅2-3年，肝纤维化进展为肝硬化后治疗手段极为有限，肾纤维化是终末期肾病的主要病因。开发新型抗纤维化药物、阻断纤维化进展甚至逆转已形成的纤维化，已成为全球医药研发的重点攻关方向。在这一背景下，小鼠纤维化模型凭借其器官结构与人类的高度相似性、基因编辑技术的成熟性、造模方法多样以及评价技术完善等优势，成为纤维化机制研究、药物筛选及治疗策略评估不可或缺的黄金标准临床前工具。通过化学诱导、手术干预、基因编辑或物理损伤等手段，研究者可在小鼠中成功复制出从早期细胞外基质沉积到晚期器官功能衰竭的完整病理谱系，为小鼠纤维化模型的广泛应用奠定了坚实基础。二、为什么选择小鼠构建纤维化模型？1. 纤维化机制的高度保守性小鼠在器官结构、细胞组成（成纤维细胞、肌成纤维细胞、巨噬细胞、上皮细胞）、细胞外基质成分（Ⅰ型、Ⅲ型胶原、纤连蛋白、层粘连蛋白）及纤维化核心信号通路（TGF-β/Smad、Wnt/β-catenin、Hedgehog、YAP/TAZ）方面与人类高度同源。在小鼠纤维化模型中，组织损伤→炎症反应→成纤维细胞活化→肌成纤维细胞转化→细胞外基质过度沉积→器官结构破坏→功能衰竭的病理进程，与临床纤维化患者的组织学改变高度一致。2. 基因背景精准可控近交系小鼠遗传背景均一，便于实验标准化。通过基因编辑技术可构建特定纤维化相关基因修饰模型（如Col1a1-GFP报告基因、Tgfbr2条件性敲除、YAP过表达等），精准追踪胶原合成细胞、验证特定信号通路的因果作用。在小鼠纤维化模型中，这些基因工具为深入解析纤维化发生的分子机制提供了独特优势。3. 多器官纤维化模型成熟针对不同临床需求，已建立肺、肝、肾、心脏、皮肤等多器官小鼠纤维化模型，且各模型均有标准化的造模流程和评价指标，便于开展跨器官比较研究和多靶点药物筛选。4. 成本与伦理优势相比大动物模型，小鼠饲养成本低、繁殖快、样本量充足。在小鼠纤维化模型中，单批次实验可完成多组药物或干预措施的平行比较，兼顾科学严谨性与研发经济性。三、小鼠纤维化模型的核心构建技术1. 肺纤维化模型肺纤维化是小鼠纤维化模型中研究最深入的类型之一：博来霉素（Bleomycin）诱导模型：经气管内滴注或雾化吸入博来霉素（1.5-3.5 U/kg），诱导肺泡上皮细胞损伤、炎症反应及成纤维细胞活化，7-14天出现明显肺纤维化，21-28天达高峰。该模型操作成熟、重复性好，是评估吡非尼酮、尼达尼布等抗肺纤维化药物的经典小鼠纤维化模型；二氧化硅/石棉诱导模型：气管内滴注二氧化硅颗粒或石棉纤维，模拟职业性肺纤维化，适用于研究尘肺发病机制；辐射诱导模型：胸部局部放疗（12-20 Gy），模拟放射性肺纤维化；基因工程模型：如SFTPC突变、TERT突变、TGF-α过表达等，模拟遗传性肺纤维化。2. 肝纤维化模型肝纤维化是小鼠纤维化模型中应用最广泛的类型：四氯化碳（CCl₄）诱导模型：腹腔注射CCl₄（橄榄油稀释，0.5-2 mL/kg，每周2-3次），4-8周形成显著肝纤维化。该模型是研究肝星状细胞活化及评估抗肝纤维化药物的经典小鼠纤维化模型；硫代乙酰胺（TAA）模型：饮水或腹腔注射TAA，8-12周诱导肝硬化；胆管结扎（BDL）模型：手术结扎胆总管，诱导胆汁淤积性肝纤维化；高脂饮食+NASH模型：高脂高胆固醇饮食联合化学诱导，模拟代谢相关脂肪性肝病进展为肝纤维化；基因工程模型：如Alb-Cre TAK1敲除、Mdr2-/-、Col1a1-GFP报告基因等。3. 肾纤维化模型单侧输尿管梗阻（UUO）模型：结扎单侧输尿管，诱导肾小管间质纤维化，7-14天形成明显纤维化。该模型操作简便、成模快，是研究肾间质纤维化的经典小鼠纤维化模型；5/6肾切除模型：切除5/6肾组织，诱导残余肾高滤过、肾小球硬化及肾间质纤维化，模拟慢性肾病进展；缺血再灌注（I/R）模型：夹闭肾动脉后恢复血流，诱导急性肾损伤后纤维化；糖尿病肾病模型：STZ诱导糖尿病后长期饲养，自然进展为肾小球硬化和肾间质纤维化；基因工程模型：如Col4a3-/-（Alport综合征）、Pkd1-/-（多囊肾病）等。4. 心脏纤维化模型主动脉缩窄（TAC）模型：手术缩窄升主动脉，诱导压力超负荷性心肌肥厚及间质纤维化，4-8周形成明显纤维化；心肌梗死（MI）模型：结扎左前降支冠状动脉，梗死区替代性纤维化及非梗死区反应性纤维化；异丙肾上腺素（ISO）模型：皮下注射大剂量ISO，诱导心肌坏死及纤维化；阿霉素（Doxorubicin）模型：诱导化疗相关性心肌病及纤维化；糖尿病心肌病模型：db/db或STZ糖尿病小鼠长期饲养，自然出现心肌间质纤维化。5. 皮肤及其他器官纤维化模型博来霉素诱导硬皮病模型：皮下注射博来霉素，诱导皮肤纤维化及系统性硬化症样改变；辐射诱导皮肤纤维化模型：局部放疗诱导皮肤纤维化；瘢痕疙瘩模型：创伤后局部注射TGF-β或机械张力刺激，诱导病理性瘢痕形成；腹膜纤维化模型：腹腔注射氯己定或葡萄糖透析液，诱导腹膜间皮细胞损伤及纤维化。四、小鼠纤维化模型的评价指标体系1. 组织病理学与纤维化评分HE染色：观察组织结构破坏、炎症细胞浸润及细胞外基质沉积；Masson三色染色：胶原纤维呈蓝色，定量纤维化面积占比；天狼星红染色：偏振光下区分Ⅰ型胶原（橙红色）与Ⅲ型胶原（绿色），评估胶原成熟度；Van Gieson染色：胶原呈红色，肌纤维呈黄色；免疫组化/免疫荧光：α-SMA（肌成纤维细胞标志）、Fibronectin、Vimentin、Col1a1、Col3a1；病理评分：采用Ashcroft评分（肺）、Ishak评分（肝）、Banff评分（肾）等标准化评分系统。2. 细胞外基质定量羟脯氨酸（HYP）含量：胶原特征氨基酸，生化法定量总胶原含量；Sircol胶原定量试剂盒：特异性定量可溶性胶原；Fastin弹性蛋白定量：定量弹性纤维含量；透明质酸（HA）：ELISA或浊度法定量。3. 成纤维细胞活化与EMTα-SMA表达：Western blot、免疫组化或流式细胞术定量肌成纤维细胞标志；EMT标志物：E-cadherin（上皮标志）降低、Vimentin（间充质标志）升高、Snail/Slug/ZEB转录因子表达；成纤维细胞增殖：PCNA、Ki-67、EdU标记；成纤维细胞迁移：Transwell、划痕实验。4. 炎症与免疫调控巨噬细胞极化：CD68（总巨噬细胞）、CD86（M1型）、CD206/Arg-1（M2型）免疫荧光/流式；炎症因子：IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β1、MCP-1、IL-10 ELISA或Luminex；炎症小体：NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β/IL-18 Western blot；淋巴细胞亚群：Th1/Th2/Th17/Treg流式分析。5. 纤维化核心信号通路TGF-β/Smad通路：TGF-β1、TGF-βRII、p-Smad2/3、Smad4、Smad7 Western blot/免疫组化；Wnt/β-catenin通路：β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β、Axin2、TCF/LEF；Hedgehog通路：Shh、Ptch1、Gli1、Gli2；YAP/TAZ通路：YAP、TAZ、CTGF、Cyr61；Notch通路：Notch1-4、Jagged1、DLL4、Hes1；PI3K/Akt/mTOR通路：p-Akt、p-mTOR、p-S6K、p-4EBP1。6. 氧化应激与细胞死亡ROS水平：DHE、DCFH-DA荧光探针；抗氧化酶：SOD、CAT、GSH-Px、HO-1；氧化损伤标志物：MDA、4-HNE、8-OHdG；细胞凋亡：TUNEL、Cleaved Caspase-3、Bax/Bcl-2；细胞焦亡：GSDMD、Caspase-1、IL-1β；细胞铁死亡：GPX4、ACSL4、FTH1、SLC7A11；细胞自噬：LC3、p62、Beclin-1、ATG5。7. 器官功能评估肺功能：肺功能仪检测用力肺活量（FVC）、肺顺应性、气道阻力；肝功能：ALT、AST、ALP、GGT、白蛋白、胆红素；肾功能：血肌酐、尿素氮、尿蛋白、肌酐清除率；心功能：超声心动图（EF%、FS%）、有创血流动力学（±dp/dt max）；皮肤功能：皮肤厚度、硬度、弹性测量。8. 多组学与机制探索通过转录组测序、单细胞测序、蛋白质组学、代谢组学及空间转录组学，在小鼠纤维化模型中解析：细胞类型特异性基因表达图谱；细胞间通讯网络（配体-受体分析）；代谢重编程（糖酵解、氧化磷酸化、脂肪酸氧化）；表观遗传调控（DNA甲基化、组蛋白修饰、miRNA/lncRNA/circRNA）；肠道菌群-器官轴交互作用。五、小鼠纤维化模型的主要应用领域1. 抗纤维化药物研发在小鼠纤维化模型中，可系统评估以下候选药物的抗纤维化效力：TGF-β通路抑制剂：Galunisertib（LY2157299，TGF-βRI激酶抑制剂）、Fresolimumab（抗TGF-β抗体）；整合素抑制剂：PLN-74809（αvβ1/αvβ6整合素双重抑制剂）；LOX/LOXL2抑制剂：Simtuzumab（抗LOXL2抗体）、PXS-5382A；CTGF抑制剂：Pamrevlumab（抗CTGF抗体）；PPARγ激动剂：吡格列酮、罗格列酮；FXR激动剂：奥贝胆酸（OCA）；中药成分：吡非尼酮（已上市，IPF）、尼达尼布（已上市，IPF）、丹参酮ⅡA、苦参碱、姜黄素、白藜芦醇。通过量化胶原沉积减少、肌成纤维细胞活化抑制、炎症减轻及器官功能改善，在早期研发阶段即完成药效学评价。2. 中药复方与天然产物现代化扶正化瘀胶囊、复方鳖甲软肝片、安络化纤丸、大黄蛰虫丸及单味药材（如丹参、三七、黄芪、当归、川芎）等，可通过小鼠纤维化模型现代化验证其抑制TGF-β信号、减少胶原合成、促进基质降解及改善器官功能的生物学效应。3. 功能性食品与营养干预维生素D、维生素E、Omega-3脂肪酸、N-乙酰半胱氨酸（NAC）、姜黄素、白藜芦醇及特定益生菌等，可在小鼠纤维化模型中评估其抗氧化、抗炎及抗纤维化的辅助作用。4. 基因治疗与细胞治疗AAV介导的miRNA过表达/敲低、CRISPR基因编辑、间充质干细胞（MSC）及外泌体治疗，可在小鼠纤维化模型中评估其靶向调控纤维化信号、促进组织修复的效果。5. 器官移植与再生医学通过小鼠纤维化模型研究慢性排斥反应中的移植物纤维化机制，及评估抗纤维化策略在延长移植物存活中的作用。六、百环生物：小鼠纤维化模型的专业服务平台在器官纤维化临床前研究领域，百环生物建立了完善的技术服务体系，为制药企业、科研院所、生物技术公司及医疗机构提供从模型构建到数据交付的一站式小鼠纤维化模型解决方案。标准化纤维化模型平台百环生物已成功建立多种成熟的小鼠纤维化模型，包括：肺纤维化模型：博来霉素气管滴注/雾化模型（经典IPF模型，2-4周）二氧化硅/石棉尘肺模型辐射诱导肺纤维化模型肝纤维化模型：CCl₄诱导肝纤维化模型（经典模型，4-8周）TAA诱导肝硬化模型（8-12周）胆管结扎（BDL）胆汁淤积性纤维化模型高脂饮食NASH纤维化模型蛋氨酸-胆碱缺乏（MCD）饮食模型肾纤维化模型：单侧输尿管梗阻（UUO）模型（快速肾间质纤维化，7-14天）5/6肾切除慢性肾病模型缺血再灌注（I/R）后纤维化模型STZ糖尿病肾病模型心脏纤维化模型：主动脉缩窄（TAC）压力超负荷模型心肌梗死（MI）后替代/反应性纤维化模型异丙肾上腺素诱导心肌纤维化模型阿霉素心肌病模型皮肤纤维化模型：博来霉素皮下注射硬皮病模型辐射诱导皮肤纤维化模型所有模型均经过严格的病理表型验证与阳性药物对照测试（如吡非尼酮、尼达尼布、TGF-β抑制剂），确保纤维化程度、炎症活动度及器官功能损伤指标的稳定性与可重复性。多维度评价技术体系百环生物配备先进的病理与分子检测平台，可在小鼠纤维化模型中完成：组织HE、Masson、天狼星红、Van Gieson染色及Ashcroft/Ishak/Banff标准化评分；α-SMA、Col1a1、Col3a1、Fibronectin、Vimentin免疫组化/免疫荧光定量；羟脯氨酸（HYP）含量及Sircol胶原定量；巨噬细胞M1/M2极化流式细胞术分析；TGF-β1、p-Smad2/3、Smad7、β-catenin、YAP/TAZ Western blot；NLRP3、NF-κB、MAPK炎症信号通路检测；ROS、MDA、SOD、GSH-Px氧化应激指标；细胞凋亡（TUNEL）、焦亡（GSDMD）、铁死亡（GPX4）检测；器官功能评估（肺功能、肝功能、肾功能、心功能、超声心动图）；转录组学/单细胞测序/空间转录组学/蛋白质组学/代谢组学机制研究支持。药物筛选与机制研究服务百环生物支持基于小鼠纤维化模型的抗纤维化药物、基因治疗、细胞治疗、干细胞外泌体、中药复方、天然产物及功能性食品的系统评价、量效关系分析、联合用药优化及作用机制探索。专业团队协助客户设计合理的造模方案、给药时机（预防性/治疗性/逆转性）及评价终点，并提供符合NMPA/FDA申报要求的完整数据包。严格的质量与合规管理百环生物遵循实验动物伦理规范与数据完整性管理原则，所有小鼠纤维化模型实验均设置空白对照、模型对照及阳性药对照，化学试剂剂量经精确计算，手术操作由经验丰富的技术人员在无菌条件下完成，组织学切片方向标准化，原始数据、影像记录、流式数据及统计分析报告完整归档，确保研究结果的科学可信度与可追溯性。全流程项目支持从项目咨询、靶器官选择、模型选择、实验方案设计、小鼠纤维化模型构建、动态监测、表型评价到最终报告撰写，百环生物提供全流程技术支持与项目管理服务，助力客户高效推进抗纤维化药物研发、纤维化机制研究及器官修复策略开发。七、结语小鼠纤维化模型以其器官结构的保守性、造模方法的多样性、评价体系的完善性及基因编辑的精准性，正在成为器官纤维化研究与抗纤维化药物开发领域不可或缺的技术工具。无论是解析TGF-β信号驱动的成纤维细胞活化机制，还是加速新型整合素抑制剂从实验室到临床的转化，选择一家技术扎实、体系完善的实验服务平台都是确保研究质量与研发效率的关键。百环生物深耕器官纤维化临床前研究领域，以标准化的小鼠纤维化模型构建平台、多维度的评价技术体系与严谨的质量管理，为每一位合作伙伴提供高质量的临床前研究服务，共同推动肺纤维化、肝纤维化、肾纤维化及心肌纤维化等疾病的精准防治与创新疗法开发。返回搜狐，查看更多