Cytarabine/Daunorubicin Liposomal

前言：近日，一起突如其来的收并购点燃了美股投资者：Jazz Pharmaceuticals（Nasdaq:Jazz）和Chimerix（Nasdaq:CMRX）宣布两家公司已达成最终协议，Jazz将以每股8.55美元的现金收购Chimerix，总对价约为9.35亿美元。该交易已获得两家公司的批准，预计将于2025年第二季度完成。 要知道，这场交易前一天的股价也不过5美元出头，也就是说，本次收购费用几乎翻了CMRX的一倍。CMRX的管线确实不算大众，但能让Jazz看上并溢价90%以上进行收购，必定有其独特的魅力。而收购之后的Jazz，又有哪些看点？ 01 CMRX的管线 CMRX的管线来看，目前能进行估值的管线只有一条——ONC201。该条管线目前也已经冲破重重艰难险阻就快修成正果，到了FDA上市审批（NDA）的阶段。这条管线从第一次开始临床试验（first man）到现在，已经历经10余载，从中也能看出小biotech从头走过来到被收购的完整历程。 （图片来源：CMRX官网） ONC201靶向DRD2和ClpP，主要治疗的患者是患有携带H3K27M突变的复发型胶质瘤患者。众所周知，胶质瘤按照危险程度一共分为I-IV级，III级和IV级是高级别胶质瘤，当外科手术切除之后复发，目前非常缺乏治疗手段。当现治疗“癌王”胰腺癌的药物不断涌现进行临床患者招募，治疗高级别胶质瘤却处于一筹莫展的境况。 该突变方面，在临床上，H3 K27M突变的肿瘤通常处于上文所说的IV级，预后较差。如图所示，在位于脑桥的胶质瘤中，携带这种突变的比率高达75%，而位于脑室的胶质瘤中，携带这种突变的比率也高达71%；此外，约10%的成人神经胶质瘤也显示H3 K27M突变。 （图片来源：CMRX官网PPT） 人数方面，全美国每年约有21000人被诊断为胶质瘤，其中大约有2000名患者受到H3 K27M突变的影响。市场的整体情况大致如此。 而ONC21的机制方面，它的机制也确实非常非常有意思。它一方面可以激动ClpP（Clp蛋白酶蛋白水解亚基）。ClpP是胶质瘤中线粒体的蛋白酶，可以降解线粒体呼吸链蛋白以破坏能量稳态，而胶质瘤的繁殖自然需要大量的能量来进行支撑，因此，破坏能量稳态对影响其增殖起到了重要的作用。也正因为此，在治疗过程中，ClpP会作为重要的biomarker存在。 另一方面，ONC21其实一开始被发现的机制并不是激动ClpP，而是拮抗多巴胺受体D2 (DRD2)，关于这条通路是怎样影响肿瘤的，目前尚不是很清楚，但DRD2是一种G蛋白偶联受体，它可以调节Ras通路；而RAS-RAF-MEK-ERK（简称ERK信号通路）是调控细胞增殖与存活的核心通路，其异常活化与多种癌症的发生发展密切相关。阻断上游Ras信号，对抑制肿瘤活化增殖，促进细胞凋亡也许有意想不到的作用。 但具体ONC21通过DRD2是怎么抑制肿瘤，目前研究并不算很透彻。这大致是目前机制上的情况。 目前能看到的是早期临床试验数据，总量人数为50人。在高级胶质瘤方面，ORR为20%，低级别胶质瘤方面，ORR为26%，以RNAO2.0评估的胶质瘤疗效标准方面，ORR为28%。 该药很早就获得了快速通道资格和孤儿药认定，而目前已经走到了申报上市这一步，相信之后的东西，也会是水到渠成。 02 Jazz近况 Jazz作为一家pharma而言市值并不算很高，甚至没有单一管线的summit高，目前市值为84亿美元左右；它的成名来源与对大麻素的销售，是全球著名的大麻素销售巨头。 其核心单品为Epidiolex，它是第一个也是唯一一个获得FDA 批准的处方大麻二酚 (CBD)， 用于治疗1岁或以上患者与Lennox-Gastaut综合征(LGS)、Dravet综合征或结节性硬化症 (TSC)相关的癫痫发作。它来自于2021年一桩巨额收购案：Jazz以72亿美元收购GW pharma。 其相关的大麻类药物还有satyivex。除此之外，其在2005年收购了Orphan Medical，拿到了羟基丁酸钠这款药物，用于治疗白天嗜睡。 除了上述的精神类药物，Jazz在其它领域也有浓墨重彩的商业化布局。例如defitelio（去纤维钠）治疗肝窦阻塞综合征，RYLAZE治疗大肠杆菌衍生的天冬酰胺酶过敏的成人和1个月或以上的小儿患者的急性淋巴细胞白血病(ALL) 和淋巴母细胞淋巴瘤 (LBL)等。 如图所示为Jazz的营收情况，2023年，其营收达到了38.34亿美元， 总体而言，从现在Jazz的商业化版图来看，它的营收主要还是来自于精神类药物，尤其是大麻类药物，为此也产生过不少专利纠纷，除了精神类药物之类的商业化单品很杂，给人一种不太成体系的感觉。 （图片来源：Jazz 2023年年报） 然而从研发管线上来看，却可以看到Jazz拼尽全力向肿瘤领域转型的决心，如果不去看商业化板块，只去看管线，甚至会以为它是一家正在起步推进管线的肿瘤biotech。 其中，其肿瘤的首发管线Zanidatamab在2024年底已经被FDA批准，进入了上市阶段。该管线是一条HER2双表位抗体，也是Jazz渴望转型的一个体现：2022年，Jazz从zymwok以5000万美元的一次性付款，3.75亿美元的预付款引进该管线，且总交易金额达到了17.6亿美元。 目前，该BD算是有了初步结果，结出的第一个获批适应症二线治疗胆管癌，目前一线治疗胆管癌，一线治疗胃食管腺癌等也已经进入了三期临床阶段，二期临床还有乳腺癌等大适应症在持续推进。 该单品的商业化进程预计将会波澜壮阔。 除此之外，化疗药物芦比卡定也已经获得了批准上市，该药是Jazz通过从PharmaMar手中BD获得，目前用于治疗小细胞肺癌。JZP351则是一种化疗药物组合，目前在治疗白血病的III期临床阶段。 可以看到，Jazz一边收购大麻巨头获得稳健的营收保障，一边不断进行肿瘤药物的BD，用于后续管线的布局，让公司看起来充满预期。 03 结语 从上述对两家企业的叙述中，本次收购就显得合理了起来，Jazz渴望进一步充实肿瘤管线，它在拥有HER2双抗这项大分子肿瘤药物，已经几款化疗药物药物之后，选择了一家小分子biotech进行收购，一方面是让肿瘤管线看起来更加多元化，另一方面也确实是选择了剑走偏锋的差异化竞争。 除此之外，后续管线的潜力也不容小觑：首当其冲的是后续管线ONC206，它是ONC201的下一代同靶点药物，体外活性是ONC201的10倍，拥有非常强劲的体外抗肿瘤活性，目前临床剂量递增试验已经完成。 ONC212和CMX521都在有序推进之中。 总体来说这次收购是Jazz的一次为了扩张肿瘤板块而进行的又一次大动作，既在意料之外，又在情理之中。CMRX也提前上岸，是非常不错的biotech结局。 识别微信二维码，添加抗体圈小编，符合条件者即可加入抗体圈微信群！ 请注明：姓名+研究方向！ 本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。

许多游离药物具有溶解度低、稳定相差和安全性低在内的诸多特点而限制了其临床应用，纳米技术的进步为使用纳米颗粒进行药物递送创造了无限可能。FDA已经批准了约100种纳米药物上市，通常用作药物输送系统的纳米颗粒有包括脂质体在内的多种体系，它们的粒径范围从几纳米到几百纳米不等。它们通过装载药物使之提高稳定性，克服组织细胞的摄取阻碍，增加药物在体内靶位的富集，提高了药物的安全性与治疗效果。 图1：通常用作药物输送系统的纳米颗粒。a 脂质体b 病毒载体c 自组装蛋白d 聚合物纳米颗粒e 金属纳米颗粒f 单壁碳纳米。g树枝状聚合物h 具有核/壳结构的聚苯乙烯涂层磁性颗粒i胶束制剂 在Pubmed上以“纳米”、“脂质体”、“药物”为相关关键词来搜索相关研究，纳米相关药物的发文量在2016年后超过脂质体且较为迅速增长，脂质体相关研究中的药物研究占了很大比重，相关发文量都呈现增长模式，预计在不久后会有更多的实验室产品走到工厂或是市场，为各种疾病带来新的治疗机会。 图2：以纳米、脂质体和药物相关关键词搜索近10年出现的文章数 脂质体纳米平台应用包括生物医学诊断和生物化学中的信号载体、疫苗佐剂和纳米医学中的递送载体等一系列领域。1995年FDA批准Johnson的包载有盐酸阿霉素脂质体抗肿瘤药物Doxil上市，目前美国食品药品监督管理局（FDA）批准了多款脂质体药物上市，适应症也从单一的肿瘤领域拓展到了感染、炎症和镇痛一系列领域。 表1：FDA批准上市的脂质体药物 表2：新型脂质体（LNP）上市核酸药物/疫苗 图3：脂质体/脂质纳米颗粒（LNP，一种新型脂质体）发展时间轴 脂质体最早由Bengham在1960年代发现，后来成为最广泛的药物输送系统之一。脂质体是由磷脂和胆固醇组成的球形结构，脂类有天然与人工合成两类，磷脂结构可以带有电荷以便控制其吸收排布。脂质体表面可以带有电荷，由于电荷排斥可以起到稳定脂质体的作用，负电荷的存在（如DMPG）使得脂质体容易被巨噬细胞识别并且能够通过内吞作用进入细胞（速率比中性脂质更快），从而缩短循环时间，而带正电荷的脂质体可能与血液中的阴离子成分（如血浆蛋白）相互作用，被MPS摄取清除。事实上，带正电荷脂质体与带负电的核酸作用而有利于核酸的递送，目前两款新型脂质体技术包载的核酸疫苗（两种阳离子脂质为：SM-102/ALC-0315）便是利用了这个原理而使脂质体在抗击新冠疫情中大放异彩。胆固醇控制磷脂堆积、膜流动性和脂质体表面电荷的能力，脂质体中胆固醇的添加使脂质体在血流中的稳定时间从几分钟延长到了几小时。脂质体也可由单个或多个脂质双分子层组装而成，目前FDA批准上市产品大都为100nm左右大小的单层小囊泡。添加聚合物如聚乙二醇则有延长的其循环的特性（增加脂质体与血液中其他成分的空间位阻），保护负载药物免受灭活或代谢降解，进一步增强稳定性并改善细胞内摄入。脂质体成分中特定靶向成分的添加或进行功能化（使用多糖、糖蛋白或特定受体的配体）来达到靶向的作用（被动靶向主要应用于肿瘤的治疗，依靠于肿瘤血管特性来实现，而主动靶向主要是通过脂质表面的功能化来达到目的）。脂质体产品结构比较复杂，环境或结构的变化可能对脂质体而言是引起其安全性和有效性的挑战，脂质体药物的辅料中一般会添加一些其他成分，如pH缓冲用的柠檬酸/柠檬酸盐体系、渗透压调节用的氯化钠体系、稳定用的糖类。 图4：载药脂质体的常见结构以及组分化合物结构示意图 目前对于脂质体的制备已经有了许多的技术方法：薄膜水合法、乙醇/乙醚注射法、反相蒸发法、洗涤剂去除法、微流控法、膜挤出法、均质化、超声法、冷冻干燥方法、超临界流体方法等。对于制备完成的脂质体特征（粒径、电位、形态、相位和层状性）的评价则有许多种技术。 表3：脂质体参数评估的方法 特征 技术 粒径 显微镜、纳米颗粒跟踪分析（NTA）、动态光散射（DLS）、扫描/透射电镜（SEM/TEM）、原子力显微镜（AFM）、低温透射电镜（Cryo-TEM） 电位 电泳迁移率、DLS 形态 Cryo-TEM、TEM、AFM 相位特性 差示扫描量热法 （DSC）、X射线衍射 （XRD）、热重分析 （TGA） 层状性 Cryo-TEM 、核磁 脂质体的粒径大小影响着药物吸收与分布（体循环、清除、外渗、转运摄取等），理想的粒径在50-200nm范围之内。脂质体所带的净电荷为Zeta电位，电位的大小的绝对值影响着脂质体的稳定性。脂质体电位收到外部环境和离子强度的影响，绝对值较小的脂质体之间排斥力较弱，随时间的推移聚集的可能性较大。显微镜检测是对于脂质体形态检测最直接的方式，其中Cryo-TEM技术检测可以较好的保留脂质体的原始结构，最大限度减小脂质体形态的扭曲变化；AFM技术是一种快速、强大和非侵入性的技术，在脂质体原生条件下提供到高分辨率三维图像。脂质体相行为影响着脂质体的稳定性，DSC是脂质体相行为检测最常见方法。脂质体的层状性影响着药物的释放，Cryo-TEM是最常用的方法，它提供了关于脂质体层状双层厚度和双层的距离等信息。当然，每种技术有自己的优缺点，多种方法联合使用才能从多角度将脂质体的性质进行更加全面的表征。 脂质体的疏水外壳包裹着亲水内核，亲水性药物一般包裹在亲水内核中，而疏水药物则包裹在疏水外壳中，目前已经开发出了脂质体的主动载药法（一般发生在脂质体制备完成后阶段）（如Doxil、Marqibo、DaunoXome和Onivyde）和被动载药法（一般发生在脂质体制备过程阶段）（如AmBisome、Visudyne、Arikayce、DepoCyte、DepoDur和Expel）。Vyxeos则采用了组合方式载药（阿糖胞苷和柔红霉素）。目前还有第三种脂质体载药技术---化学偶联技术，具有合适的化学官能团将药物与脂质体连接来控制药物的负载与释放。 图5：脂质体的药物装载 我们在临床试验资料库（https://clinicaltrials.gov/）上以“脂质体”（liposome）为关键词进行所搜来汇总目前脂质体相关研究的临床情况，2019年后的疫情几年完成的临床数呈下降趋势。我们发现2020年后（近3年）有35项实验已经完成，其中有4项附有研究结果。 图6：以“脂质体”（liposome）关键词搜索近10年临床情况 表4：临床研究部分信息 脂质体的临床研究主要方向是装载药物来对各种疾病进行治疗，研究1的试验调查了伊立替康脂质体和贝伐珠单抗在治疗对铂类治疗（铂类耐药）、复发（复发）或对治疗无反应（难治性）的卵巢癌、输卵管癌或原发性腹膜癌患者中的作用。研究2的目的是确定脂质体布比卡因与盐水在腰椎手术中减少阿片类药物使用的功效，并确定患者报告的结果和住院时间是否存在差异。研究3评估 Exparel、Exparel与盐酸布比卡因混合与盐酸布比卡因联合治疗下肢手术受试者术后镇痛的疗效、安全性和药代动力学。研究4探索Exparel（脂质体布比卡因）在内收肌管阻滞中的有效性（用于全膝关节置换术手术疼痛控制）。通过脂质体改善靶向部位的递送、提高疗效和降低的全身毒性，这是大多数进入临床试验脂质体新药的典型目标。 脂质体的出现，以其独特的性质而是许多药物为治疗疾病成为了可能，但是脂质体的组成（成分/纯度）、理化性质、稳定性、表征技术和一系列的临床药学研究（药代/药动/利用度等）仍有许多问题待解决，相信不久的将来在新方法的研究以及新技术的引入会刺激脂质体研究的进一步发展。 REFERENCE 1.     Beltrán-Gracia E et al., Cancer Nano. 2019 2.     Almeida B et al., Molecules. 2020 3.     Gote V et al., Int J Mol Sci. 2023 4.     Tenchov R et al., ACS Nano. 2021 药事纵横征稿启事