IL-18

点击上方的 行舟Drug ▲ 添加关注前言迄今为止，与传统的抗癌治疗策略相比，免疫治疗被认为是最有前景的全身性肿瘤治疗方法，其中，单克隆抗体因其特异性靶向分子的能力，已成为癌症治疗中一种关键而有效的治疗方式。然而，由于肿瘤复杂的疾病发病机制，针对单一靶点的单克隆抗体往往不足以表现出足够的治疗效果。因此，针对多个靶点的双特异性抗体（bsAbs）应运而生，它的发展改变了肿瘤免疫治疗的领域。目前，人们正在研究越来越多的针对癌症治疗的不同类型的bsAbs。这些类型包括双靶向抑制剂，其作用于不同水平的肿瘤增殖、血管形成和转移；以及双特异性抗体偶联药物、T细胞结合器、双特异性自然杀伤细胞接合器（NKCE）和先天免疫细胞接合器。其他类型还包括双特异性免疫检查点抑制剂（CPI）、共刺激bsAbs和融合蛋白、具有联合检查点抑制和共刺激特征的bsAbs、在肿瘤微环境（TME）中特异性激活的bsAb，以及将过继T细胞治疗和治疗性抗体相结合的新方法。目前，有300多项临床试验涉及200多种不同的双特异性抗体分子，其中约75%用于治疗实体瘤，25%用于治疗血液系统恶性肿瘤。有10种bsAb药物已被批准用于癌症治疗，其中9种在美国和/或欧洲获得批准，cadonilimab在中国获得批准。到目前为止，临床中开发的很大一部分bsAbs已经处于后期阶段（II期和III期）。另外，可以发现，治疗实体瘤的bsAbs主要由免疫调节剂主导，包括双CPI（约45%）和TCE（约33%），其次是靶向双途径、ICEs和ADC的bsAb。bsAb的发展史BsAbs最初的概念是由AlfredNisonof在20世纪60年代首次提出的。他将两个不同的抗原结合位点结合在一个分子中，并从抗牛γ球蛋白和抗卵清蛋白单价片段的混合物中获得了一个具有双重特异性的F(ab’)2分子。1975年，Köhler和Milstein发明了杂交瘤技术，最终解决了生产单克隆抗体的问题，开启了单克隆抗体治疗的新时代。1983年，Milstein和Cuello开创了quadroma技术，该技术基于分泌Abs混合物的两种不同杂交瘤细胞系的体细胞融合，包括具有双重特异性的鼠IgG形式的bsAb。然而，bsAb的低产率以及难以从密切相关的错配副产物中纯化所需的Ab是一个重大问题。1988年，James Huston和他的同事发明了单链抗体片段（scFv），它最大限度地减少了复性问题，例如不正确的结构域配对或聚集。1996年，Genentech的科学家们利用重组DNA技术发明了knob-into-hole技术，克服了Quadrome技术的局限性。通过在人类IgG的CH3结构域之间的界面突变选定的氨基酸，可以减少IgG重链的错配。这种技术利用更有利的蛋白质相互作用，最终可以形成高达90%的正确双特异性重链配对。随后，随着抗体工程和生物学的进展，bsAb的不同概念和结构正在不断演变。靶向双受体抑制的bsAb许多参与细胞信号传导的细胞表面蛋白，如RTK和相关受体，是基于抗体治疗的有效靶点。尽管靶向一个确定的信号受体的抗体治疗是非常有效的，但疾病相关表型通常由不止一种途径触发。这种冗余允许细胞通过使用其他补偿信号通路，从而耐受药物的生长抑制或细胞毒性诱导。同时调节不同疾病相关信号受体或通路的bsAbs可以减少或克服这一限制。Amivantamab（JNJ-61186372）靶向EGFR和肝细胞生长因子受体（MET），两种受体都能触发非小细胞肺癌（NSCLC）的增殖。因此，阻断两种受体比仅阻断一种途径能够更有效地抑制NSCLC的生长。Amivantamab已被FDA批准用于治疗携带EGFR外显子20插入突变的NSCLC亚型。一项随机III期研究的数据显示，在这部分患者中，与单独化疗相比，Amivantamab联合化疗具有显著优越性。另外一些针对肿瘤不同第二靶点的EGFR的bsAbs也正在临床开发中。例如，petosemtamab（MCLA-158）靶向EGFR和LGR5，LGR5是一种癌症干细胞相关的细胞表面受体。Petosemtamab目前正在包括晚期头颈部鳞状细胞癌在内的实体瘤患者的I/II期试验中进行评估（NCT03526835）。靶向配体受体抑制的bsAbbsAbs可以同时阻断两种不同的配体，或者是配体和受体的组合。VEGF和血管生成素2（ANG2）的双重靶向作用分别阻断VEGFR和血管生成因子1受体（TIE2）的激活，这两种途径涉及血管生成。vanucizumab，一种靶向VEGFA和ANG2的bsAb，在临床前模型中与化疗联合显示出抗肿瘤、抗血管生成和抗转移作用。BI836880是一种三特异性纳米抗体融合蛋白，由三个靶向VEGFA、ANG2和HSA的纳米抗体组成，后者可延长其血清半衰期。目前正在头颈部鳞状细胞癌、NSCLC和其他实体瘤患者的I期研究中进行评估。此外，靶向VEGF可以进一步设计成联合靶向肿瘤细胞上的PD-L1或T细胞上的PD-1，从而将抗血管生成与肿瘤免疫学方法联系起来。例如靶向PD1和VEGF的ivonescimab（AK112），其目前已在中国获批用于。其他bsAbs靶向PDL1和VEGF，包括PM8002，该药物正在NSCLC患者的II/III期研究（NCT05756972）中进行评估。靶向受体激活的bsAb许多抗肿瘤反应是通过激活细胞表面受体介导的，包括通过诱导细胞凋亡的免疫反应或细胞死亡。其中一种方法是靶向递送受体激活配体，如生长因子、细胞因子和（共）免疫刺激配体，将其融合到抗体或抗体片段中，以诱导局部或组织特异性激动活性，从而诱导细胞反应。越来越多的这种抗体-配体融合蛋白正在进入临床试验。受体激活也可以使用激动性抗体来实现。针对靶抗原和肿瘤坏死因子超家族（TNFRSF）成员的bsAbs已被证明是具有强大活性和肿瘤选择性的激动分子。RG7386（RO6874813）是一种四价bsAb，靶向癌症相关成纤维细胞上的FAPα和DR5，在具有FAPα间质表达的小鼠模型中具有效和选择性的肿瘤细胞杀伤，并已进入临床测试。此外，BI905711，一种靶向DR5和CDH17的四价双特异性IgG-scFv融合蛋白，目前处于I期临床研究中。靶向递送有效载荷的bsAb存在两种概念上不同的方法来利用bsAbs靶向递送有效载荷，如细胞毒性药物或放射性药物。第一种方法，预靶向治疗，使用bsAb的一个臂特异性靶向肿瘤细胞，另一个臂随后捕获有效载荷到肿瘤细胞。GD2 x DOTA是一种识别GD2的bsAb，并捕获放射性有效载荷177Lu-DOTA，其在TME中组装。在没有四聚化的情况下，由于半衰期，它会被迅速从外围清除。然而，到目前为止，临床试验中很少有bsAbs利用这种MoA，这可能是因为放射性预靶向涉及复杂的导流，限制了其普遍适用性。第二种方法通过递送偶联到双特异性抗体上的细胞毒性有效载荷，实现肿瘤细胞的特异性靶向。目前，bsADC已成为肿瘤药物开发的热点，已有多款bsADC进入临床开发，如ZW49、REGN5093、BL-B01D1等。靶向癌症免疫治疗的bsAb癌症免疫疗法中使用的大多数bsAbs通过T细胞驱动的天然或内源性免疫发挥作用，包括免疫检查点抑制（CPIs）效应细胞接合器（包括TCE和ICEs）以及共刺激性bsAb。双免疫检查点抑制许多抑制免疫检查点的单特异性抗体，如CTLA4或PD-1/PDL-1，已被批准用于癌症免疫疗法。将检查点抑制性抗体疗法扩展到bsAbs可以减少不期望的副作用，并增强疗效。大多数双免疫检查点抑制剂靶向PD-1/PD-L1轴和其他免疫抑制分子，如CTLA-4、TIM-3、LAG-3或TIGIT。MEDI5752（PD-1×CTLA-4）抑制PD-1+激活的T细胞中CTLA-4的功能，诱导PD-1的快速内化和降解。与PD-1和CTLA-4单抗联合治疗相比，MEDI5752的活性显著增强。针对其他检查点分子的双功能性抑制剂，包括LAG-3和TIGIT，也正在开发中。效应细胞接合器细胞接合器连接两种不同类型的细胞，主要是肿瘤细胞和T/NK细胞，以诱导肿瘤细胞溶解。细胞接合器由TAA靶向部分和效应细胞识别部分组成，并进一步分为T细胞接受器和NK细胞接受器。T细胞接合器利用TAA和TCR成分（主要是CD3），它们连接肿瘤细胞和T细胞，绕过TCR-MHC-I相互作用。因此，无论抗原特异性如何，T细胞结合器都会触发T细胞活化，产生包括穿孔素和颗粒酶在内的细胞毒性分子，以杀伤肿瘤细胞。BiTE是T细胞结合器的一种形式，通过靶向TAA和CD3的单链抗体将肿瘤细胞和T细胞结合，用于T细胞介导的肿瘤细胞杀伤。靶向CD19和CD3的blinatumomab是临床上典型的BiTE，2014年，blinatumomab成为第一个被FDA批准的BsAb，用于治疗ALL患者，在随后的几年里，blinatumomab的治疗范围进一步拓宽，2018年，FDA批准其用于首次或第二次完全缓解后MRD≥0.1%的pre-B ALL患者群体的治疗。目前，超过60例BiTE形式的双抗正在进行I/II期临床试验。NK细胞接合器将CD16A+NK细胞重定向至肿瘤细胞，诱导NK细胞活化。与BiTE相比，NK细胞接受者表现出较少的不良反应，如细胞因子释放综合征（CRS）和神经毒性。多种细胞毒性受体可激活NK细胞：CD16（FcγRIII）、天然细胞毒性受体（NCR；NKp30、NKp44、NKp46）、C型凝集素样受体NKG2D（CD314）和CD94/NKG2C。最近，抗CD30×CD16A的NK细胞接合器（AFM13）在AACR 2022的报告中展示了不俗的抗肿瘤效果。共刺激bsAbs高效、持久和局部受限的抗肿瘤免疫反应需要共刺激和共抑制信号来严格调节细胞毒性T细胞、自然杀伤细胞和巨噬细胞的激活、分化和维持。TNFRSF家族的成员（如4-1BB、CD40、OX40、GITR、CD27或CD30）以及CD28免疫球蛋白超家族（如CD28、CTLA4、PD-1、ICOS、BTLA)及其相应的配体在介导免疫调节信号中发挥着重要作用。靶向这些免疫调节途径可以增强免疫治疗。PRS-343（cinrebafusp），是一种针对HER2和4-1BB的四价bsAb，在IND研究中其耐受性良好，没有明显和相关的药物相关毒性；在接受有效剂量治疗的患者中（n=33），12%的患者达到ORR，包括1个CR，疾病控制率（DCR）为52%。bsAbs中通过4-1BB进行肿瘤选择性共刺激的其他靶点还包括EGFR、PSMA、CLDN18.2、B7H4、CEACAM5、HER2、PD-L1和FAP。此外，十多种针对PD-L1和4-1BB的不同bsAbs处于I期或II期试验中。bsAb的新概念bsAbs的领域仍在进一步探索和扩展技术和应用，可能提供目前正在开发的bsAb尚未解决的治疗概念。三特异性TCE共刺激信号可以与双特异性TCE组合以促进更加有效的T细胞活化。这样的三特异性TCE目前正在针对TAA和CD3的临床试验中，并且进一步包含抗CD28结合位点。SAR443216是一种针对HER2×CD3×CD28的三特异性抗体，能够强力激活CD4+和CD8+T细胞，诱导T细胞增殖、细胞因子和颗粒酶B的释放，以及T细胞介导的对表达HER2的肿瘤细胞的杀伤，其目前处于I期临床研究中。在类似的方法中，SAR442257是另一种CD38×CD3×CD28的三特异性抗体。前药方法一种新兴的方法是在肿瘤处选择性激活的前药，产生具有高度肿瘤特异性功能的bsAbs。前药转化为功能性bsAbs可以通过环境触发因素如肿瘤相关蛋白酶来实现。双重肿瘤靶向的另一种前药方法依赖于来自两个具有分裂CD3ε结合部分的肿瘤特异性组装。这些分子需要被设计为非活性的独立实体并在循环中，使得它们仅在肿瘤抗原结合和随后的原位组装时被激活。PROTAC bsAbs另一个新兴概念和新的MoA利用bsAbs通过靶向降解来抑制增殖相关过程。类似于双特异性或多特异性小分子蛋白水解靶向嵌合体（PROTACs），bsAbs可被设计为触发参与癌症发展或进展的表面蛋白的内化和随后的降解。这样的bsAbs同时与靶向降解的蛋白质和降解的因子结合，并触发内化，如膜上的E3泛素连接酶或转铁蛋白受体。目前，抗体-PROTAC概念仍处于早期开发阶段，迄今为止还没有进入临床研究。bsAb递送bsAb开发中另一个重要的新兴概念是bsAb的局部产生和随后的局部递送，如通过脂质纳米颗粒介导的mRNA递送的CLDN6 TCE、溶瘤病毒或包括CAR-T细胞在内的基因治疗方法。细胞因子模拟抗体最后，bsAbs也可以作为细胞因子模拟物或所谓的合成细胞因子激动剂。scFvs或基于单域抗体VHH的方法可以通过模拟IL-2或IL-15、IL-18、I型干扰素和IL-10来有效地触发细胞因子信号传导。这种基于抗体的细胞因子模拟物可能在癌症免疫疗法中具有各种应用。小结bsAbs领域最近取得了实质性进展，到2023年底，已有十几种bsAbs获得批准，许多不同的方法正在临床上进行测试。尽管如此，由于癌症的异质性和适应性，这些方法中的任何一种都不太可能成为普遍的癌症免疫疗法。相反，抗体需要针对某些应用量身定制，并将依赖于与其他方法的结合，以最大限度地提高其疗效和安全性。在不久的将来，多特异性抗体疗法的发展可能会在以下四个领域出现增长：针对具有明确依赖性的肿瘤相关RTK的bsAbs；用于以增加的选择性靶向肿瘤的bsADC；用于靶向降解适用于各种途径的细胞表面蛋白的双特异性PROTAC；以及用于癌症免疫疗法的多特异性抗体。与其他治疗癌症的药物一样，通过改进的诊断方法和新的开发模式，将bsAbs和多特异性抗体疗法应用于早期患者，对于实现治愈癌症患者的目标至关重要。参考文献：1. The present and future of bispecific antibodies for cancer therapy. Nat Rev Drug Discov.2024 Mar 6.2. Development of Bispecific Antibody for CancerImmunotherapy: Focus on T Cell Engaging Antibody. Immune Netw. 2022 Feb; 22(1): e4.文章信息源于公众号小药说药，登载该文章目的为更广泛的传递行业信息，不代表赞同其观点或对其真实性负责。文章版权归原作者及原出处所有，文章内容仅供参考。本网拥有对此声明的最终解释权，若无意侵犯版权，请联系小编删除。学如逆水行舟，不进则退；心似平原走马，易放难收。行舟Drug每日更新 欢迎订阅+医药大数据|行业动态|政策解读

Lead product candidate, nemvaleukin, is being developed to treat a wide range of solid tumors and is currently in two potentially registrational clinical trials with readouts for both expected in 1H 2025 Newly recommended phase 2 dose of nemvaleukin with increased dosage and less frequent dosing schedule to be explored in a cohort of ARTISTRY-6, the company’s ongoing phase 2 trial in patients with melanoma Mural Oncology intends to nominate development candidates for its engineered therapies targeting interleukin-18 and interleukin-12 in 2024 The company reiterates cash runway projection into 4Q 2025 WALTHAM, Mass. and DUBLIN, Ireland, March 26, 2024 (GLOBE NEWSWIRE) -- Mural Oncology plc (Nasdaq: MURA), a clinical-stage immuno-oncology company developing novel, investigational engineered cytokine therapies designed to address areas of unmet need for patients with a variety of cancers, today announced its financial results for the fourth quarter and year ended December 31, 2023, and provided a business update. “We have made significant progress since becoming an independent company during the fourth quarter of 2023. We have amplified the company’s strong talent by bringing in world-class leaders in immuno-oncology. To date, nemvaleukin has generated promising data with durable responses both in monotherapy and in PD-1 combination across a range of solid tumor types. We expect our current cash reserves to fund our operations, including multiple clinical development programs, into 4Q 2025 and we are selectively exploring partnerships to further investigate the significant potential of both nemvaleukin and our preclinical programs,” said Caroline Loew, Ph.D., Chief Executive Officer of Mural Oncology. “This year, we plan to continue to advance our late-stage clinical trials, including evaluating less frequent IV dosing for nemvaleukin. We also look forward to presenting pre-clinical data from our IL-18 and IL-12 programs at multiple oncology conferences and nominating candidates for each this year.” Recent Corporate Highlights and Upcoming Milestones Mural Oncology spun out of Alkermes and became an independent, publicly traded immuno-oncology company in November 2023. Now led by an experienced and highly accomplished oncology-focused leadership team and board of directors, the company is leveraging its core competencies in immune cell modulation and protein engineering to develop a portfolio of investigational cytokine therapies designed to address areas of unmet need for patients with solid tumors. Mural Oncology has completed evaluation of the less frequent IV (LFIV) dosing regimen of nemvaleukin in ARTISTRY-3, and determined the recommended phase 2 dose selection to be 30 µg/kg, to be evaluated in cohort 3 of ARTISTRY-6: The new dosing regimen, a shift from five daily infusions (days 1-5) per three-week cycle to two infusions (on days 1 and 8) per three-week cycle, did not result in additional observed tolerability issues compared to previous studies of nemvaleukin. Notably, there were no dose-limiting toxicities at any dose tested and the desired pharmacodynamic effects were seen with twice per cycle dosing. The company plans to evaluate the LFIV nemvaleukin dosing regimen in the open-label cohort 3 of ARTISTRY-6, the company’s ongoing phase 2 trial, to explore the safety and efficacy of this new dosing regimen in a homogeneous patient population. The company looks forward to presenting data from ARTISTRY-3 at an upcoming medical conference. Enrollment in ARTISTRY-6 and ARTISTRY-7 is ongoing: Cohort 2 of ARTISTRY-6 is a potentially registrational, phase 2 trial evaluating nemvaleukin as a monotherapy in 90 mucosal melanoma patients. The company expects to report top-line data results from cohort 2 of ARTISTRY-6 in the first half of 2025. Cohort 3 of ARTISTRY-6 is an open label extension of the trial that will evaluate the recommended phase 2 LFIV dosing regimen from ARTISTRY-3 as a monotherapy and in combination with pembrolizumab in approximately 50 patients with cutaneous melanoma. The company expects to report top-line data for monotherapy from cohort 3 of ARTISTRY-6 in the first half of 2025 and for the pembrolizumab combination in the second half of 2025. ARTISTRY-7 is a potentially registrational, phase 3 trial evaluating nemvaleukin in combination with pembrolizumab compared to investigators’ choice chemotherapy in 448 patients with platinum-resistant ovarian cancer. Mural expects to report interim overall survival (OS) results based on approximately 75% of events in the first quarter of 2025 and final OS results in the second quarter of 2026. Mural Oncology will present preclinical IL-18 and IL-12 data for the first time at the upcoming AACR conference. The company intends to nominate development candidates for these engineered IL-18 and IL-12 therapies later this year. Financial Results for the Quarter Ended December 31, 2023 Cash Position: As of December 31, 2023, cash and cash equivalents were $270.9 million. R&D Expenses: Research and development expenses were $42.2 million for the fourth quarter of 2023 and were primarily due to employee-related expenses and expenses related to ARTISTRY-7. These expenses included $5.6 million of non-cash, share-based compensation expenses. G&A Expenses: General and administrative expenses were $16.3 million for the fourth quarter of 2023, including $9.7 million in non-cash, share-based compensation expenses. Net Loss: Net loss was $59.5 million for the fourth quarter of 2023. This included $15.2 million non-cash, share-based compensation, of which approximately $11.7 million was driven by one-time charges related to the separation from Alkermes and conversion of employee equity during the fourth quarter of 2023. Financial Guidance The company’s cash resources are expected to fund its operations into the fourth quarter 2025. After the spin out from Alkermes on November 15, 2023, the company incurred certain non-cash, share-based compensation, most of which was one-time in nature, and this is reflected in today’s reported results. Furthermore, the company’s 2023 financial results reflect carve-out financials until the date of the spin out. The company anticipates reporting lower operating expenses in the quarters going forward. About Nemvaleukin Nemvaleukin is a novel, engineered cytokine designed to leverage antitumor effects of the IL-2 pathway while mitigating its hallmark toxicities that limit its use. Nemvaleukin selectively binds to the intermediate-affinity IL-2 receptor (IL-2R) and is sterically occluded from binding to the high-affinity IL-2R. Because of this molecular design, nemvaleukin treatment leads to preferential expansion of antitumor CD8+ T cells and natural killer cells, with minimal expansion of immunosuppressive regulatory T cells. Nemvaleukin is currently being evaluated in two potentially registrational late-stage trials. About Mural Oncology Mural Oncology is leveraging its novel protein engineering platform to develop cytokine-based immunotherapies for the treatment of cancer. By combining our expertise in cytokine biology and immune cell modulation and our protein engineering platform, we are developing medicines to deliver meaningful and clinical benefits to people living with cancer. Our mission is to broaden the potential and reach of cytokine-based immunotherapies to improve the lives of patients. Our lead candidate, nemvaleukin, is currently in potentially registrational trials in mucosal melanoma and platinum-resistant ovarian cancer. Mural Oncology has its registered office in Dublin, Ireland, and its primary facilities in Waltham, Mass. For more information, visit Mural Oncology’s website at and follow us on LinkedIn and X. Forward-Looking Statements Statements contained in this press release regarding matters that are not historical facts are “forward-looking statements” within the meaning of the Private Securities Litigation Reform Act of 1995. Because such statements are subject to risks and uncertainties, actual results may differ materially from those expressed or implied by such forward-looking statements. Such statements include, but are not limited to, statements regarding: the company’s pipeline and development programs, including the expected timing of clinical updates and candidate selection, the potential of the company’s product candidates and programs to address unmet medical needs, the continued progress of its pipeline and programs, the amount of general and administrative expense to be incurred by the company in future periods and the sufficiency of its cash resources to fund its operations for the period anticipated. Any forward-looking statements in this statement are based on management’s current expectations of future events and are subject to a number of risks and uncertainties that could cause actual results to differ materially and adversely from those set forth in or implied by such forward-looking statements. Risks that contribute to the uncertain nature of the forward-looking statements include, among others, the inherent risks and uncertainties associated with competitive developments, preclinical development, clinical trials, recruitment of patients, product development activities and regulatory approval requirements; that preclinical or interim results and data from ongoing clinical studies of the company’s cytokine programs and product candidates may not be predictive of future or final results from such studies, results of future clinical studies or real-world results; future clinical trials or future stages of ongoing clinical trials may not be initiated or completed on time or at all; the company’s product candidates, including nemvaleukin, could be shown to be unsafe or ineffective; changes in the cost, scope and duration of development activities; the U.S. Food and Drug Administration may make adverse decisions regarding the company’s product candidates; the separation may adversely impact the company’s ability to attract or retain key personnel that support the company’s oncology business; and those other risks and uncertainties set forth in the company’s filings with the Securities and Exchange Commission (“SEC”), including its Annual Report on Form 10-K for the fiscal year ended December 31, 2023 and in subsequent filings the company may make with the SEC. All forward-looking statements contained in this press release speak only as of the date on which they were made. The company undertakes no obligation to update such statements to reflect events that occur or circumstances that exist after the date on which they were made. Mural Oncology plc Consolidated Balance Sheets (in thousands) December 31, 2023 December 31, 2022 ASSETS CURRENT ASSETS: Cash and cash equivalents $ 270,852 $ — Receivable from Former Parent 5,548 — Prepaid expenses 150 2,987 Other current assets 787 1,830 Total current assets $ 277,337 $ 4,817 Property and equipment, net 11,403 10,617 Right-of-use-assets 12,747 18,316 Restricted cash 258 — TOTAL ASSETS $ 301,745 $ 33,750 LIABILITIES AND EQUITY CURRENT LIABILITIES: Accounts payable $ 5,973 $ 2,966 Accrued expenses 16,946 32,750 Operating lease liabilities – short-term 6,098 5,844 Total current liabilities $ 29,017 $ 41,560 Operating lease liabilities – long-term 8,911 13,542 Other long-term liabilities — 304 Total liabilities 37,928 55,406 Net parent investment — (21,656 ) Preferred shares — — Ordinary shares 167 — Additional paid-in capital 294,507 — Accumulated deficit (30,857 ) — Total equity (deficit) 263,817 (21,656 ) TOTAL LIABILITIES AND EQUITY (DEFICIT) $ 301,745 $ 33,750 Consolidated Statements of Operations (in thousands except share and per share amounts) Three months ended December 31, (unaudited) Year ended December 31, 2023 2022 2023 2022 Operating expenses Research and development $ 42,243 $ 42,393 $ 165,532 $ 167,191 General and administrative 16,270 4,969 30,706 17,732 Total operating expenses 58,513 47,362 196,238 184,923 Operating loss (58,513 ) (47,362 ) (196,238 ) (184,923 ) Other income (expense), net 951 — 951 — Income tax provision (1,975 ) (1,220 ) (12,160 ) (4,884 ) Net loss and comprehensive loss $ (59,537 ) $ (48,582 ) $ (207,447 ) $ (189,807 ) Net loss per share – basic and diluted $ (3.57 ) $ (2.91 ) $ (12.43 ) $ (11.37 ) Weighted average common shares used in computing net loss per share – basic and diluted 16,689,740 16,689,740 16,689,740 16,689,740 Investors: David Borah, CFA david.borah@muraloncology.com Media: Katie Sullivan katie.sullivan@muraloncology.com

▲ 详细日程见文末 ▲摘要：猪圆环病毒2型(PCV2)感染可导致猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)，给全球养猪业造成巨大的经济损失。传统的疫苗接种是预防和控制该病的主要措施。当前国际市场上现有的5种商业PCV2疫苗以及中国市场的10种PCV2疫苗，均能通过减轻临床病理表现和提高猪群生长性能，表现出良好的抗病毒效果。除了上市的圆环疫苗，目前也研发了多种具有保护效力的实验性疫苗，包括减毒嵌合疫苗、核酸疫苗、亚单位疫苗、多价疫苗和病毒载体疫苗。这些实验性疫苗已被证明在提高猪的生产效率和简化免疫程序方面有效。佐剂能使疫苗具有更高的免疫保护力。本文综述了多种商业疫苗的应用以及实验性疫苗的研究进展，为今后研发预防和控制PCV2感染的优质疫苗提供更多的可能性。关键词：PCV2；PCVAD；商业疫苗；实验性疫苗；保护效力；佐剂。1介绍猪的传染病对畜牧业、国际贸易和人类公共健康产生了深刻的影响。猪圆环病毒2型(PCV2)相关疾病(PCVAD)于1991年首次在患有断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的猪身上被发现，现称为PCV2系统性疾病。此外，PCV2与亚临床感染、坏死性肺炎、脑病、先天性震颤和生殖障碍相关。PCV2感染可诱导猪的免疫抑制，从而增强对其它病原的易感性，对疫苗的免疫反应较差。PCVAD目前被公认为养猪国家和地区最重要的疾病之一，对全球的生猪生产造成了严重的经济损失。PCV2属于圆环病毒科圆环病毒属，是最小的DNA病毒之一，直径为16-18nm。PCV2的基因组为一个小的、单链的、封闭的环状结构，长1.7kb。可检测到大约10个开放阅读框(ORF)，PCV2主要由两个是首尾相连的ORF构成，即ORF1和ORF2。ORF1编码一个35.7kDa的复制酶蛋白，参与病毒复制环节；ORF2编码一个27.8kDa的结构衣壳(Cap)蛋白，其主要功能是作为宿主的免疫保护性抗原。ORF3蛋白诱导细胞凋亡，参与体内外病毒的发病机制，而ORF4蛋白可抑制半胱天冬酶活性，并抑制CD4+和CD8+T细胞的增殖。PCV2由PCV2a～PCV2h 8种基因型组成，主要基因型为PCV2a、PCV2b和PCV2d，其次为PCV2c、PCV2e、PCV2f、PCV2g和PCV2h。一项回顾性研究显示，PCV2a于1962年首次在德国发现，并成为接下来几十年的流行毒株。在已知的单链DNA病毒中，PCV2具有最高的核苷酸置换率(1.2 ×10−3置换/位点/年)。在2006年第一个商业疫苗问世之前，PCV2逐渐经历了基因型转变，全球流行毒株从PCV2a缓慢地转变为PCV2b，病毒的毒力大大增强。近年来，PCV2经历了第二次基因型转变，主要流行毒株由PCV2b转变为PCV2d。世界范围内越来越多的免疫接种猪中发现了新出现的PCV2d毒株，推测PCV2d可能突破了现有疫苗的保护作用。与全球PCV2流行情况相似，中国2002-2008年期间PCV2b是主要的流行基因型，但2009年以后逐渐由PCV2d替代。除了PCV2a、PCV2b和PCV2d基因型外，还出现了PCV2f和PCV2h基因型。目前，PCV2防控的主要方法是疫苗接种。早期商业PCV2疫苗主要是用PCV2a制备，在个体和群体规模上提高了猪的生长性能；然而，PCV2b和PCV2d对PCV2疫苗的开发提出了新的挑战。本文综述了PCV2商业疫苗和实验性疫苗的研究进展，旨在为PCV2的预防、控制和疫苗开发提供理论参考。2商业PCV2疫苗商业PCV2疫苗主要分为两大类:全病毒灭活疫苗和Cap蛋白亚单位疫苗。目前，国际市场上现有的5种PCV2疫苗均可显著降低PMWS感染猪的临床病理表现和提高生长性能。此外，还可以提高平均日增重、改善饲料转化率，并降低其用药成本。2.1.PCV2灭活疫苗PCV2感染的细胞通过物理或化学(福尔马林)方法灭活，使PCV2失去感染细胞的能力，但仍保持良好的免疫原性，加入佐剂混合乳化制备成PCV2灭活疫苗。2006年，梅里亚(法国)成功开发了世界上第一款以轻石蜡油为佐剂的PCV2疫苗Circovac®，并经欧盟批准上市。该疫苗已被批准用于母猪(2ml)和仔猪(0.5mL)的免疫接种，可有效降低病毒血症、病毒组织载量、减少排毒和传播，并促进新生仔猪生长性能。另一研究表明，接种疫苗后不会改变公猪精子数量和质量。随后研究发现，Circovac®可以交叉保护猪免受PCV2b和PCV2d的攻击，从而为抵抗更多PCV2基因型的感染提供了可能。第二款灭活疫苗是FosteraTM PCV，由美国辉瑞动物保健公司生产的PCV1-2a嵌合灭活疫苗。选取PCV2a的ORF2基因被克隆到无致病基因PCV1的基因组中，以角鲨烷中的硫酰胺-环糊精作为佐剂。结果表明，FosteraTM PCV在接种后迅速产生了高水平的抗PCV中和抗体，与单独接种PCV2相比，显著降低了PCV2病毒血症的持续时间和滴度。然而，也有其他研究表明，接种FosteraTM PCV并不能产生高水平的中和抗体，也不能防止垂直传播。灭活疫苗不刺激细胞免疫，通常需要佐剂来增强其效果。2.2.亚单位疫苗利用基因工程方法由病毒主要免疫成分可制成亚单位疫苗。商业PCV2亚单位疫苗主要基于ORF2设计和生产。Cap蛋白具有中和表位，因此，可以诱导保护性免疫反应。目前，三种亚单位疫苗(CircoflexTM、Circumvent和Porcilis PCV®)已获准在国际市场上使用，它们均采用杆状病毒系统进行ORF2的表达，在失活和纯化后，病毒样颗粒(VLPs)在形态上与PCV2颗粒相同。在接种不同PCV2分离株后，该疫苗能诱导高水平的PCV2特异性中和抗体，并防止PCV2病毒血症的发生，鼻腔和粪便的PCV2分离毒株排出量明显减少，。在一项评估Porcilis PCV®疫苗对不同PCV2分离株攻毒保护的有效性研究中，一剂型Porcilis PCV®能显著诱导细胞介导的免疫反应，降低PCV2的病毒血症。另一项实验同时评估了四种商业PCV2疫苗：取3周龄仔猪分别接种Circovac®、FosteraTM PCV、CircoflexTM和Porcilis PCV® 4种疫苗，接种4周后用PCV2攻毒。在攻毒后14天和21天，四个免疫组的平均日增重均高于对照组；与商业灭活疫苗相比，亚单位疫苗CircoflexTM和Porcilis PCV®组的病毒载量和排毒量更低、组织病理学病变更轻，淋巴结PCV2抗原评分更低，PCV2特异性中和抗体和细胞免疫水平更高。2.3.中国的PCV2疫苗市场2000年，中国首次报道了猪圆环病毒在猪群中感染并随后传播到其他省份。感染PCV2降低了猪的免疫水平，影响了猪的生长性能，给中国养猪业造成了巨大的损失。中国农业科学院哈尔滨兽医研究所研制了国内首支PCV2(LG株)灭活疫苗。随后，灭活疫苗、亚单位疫苗、载体疫苗等约10种PCV2疫苗相继被开发并在国内市场应用(表S1)。3实验性PCV2疫苗除了上述商业疫苗外，学者们还广泛研究了各种类型的实验性PCV2疫苗，如灭活疫苗、减毒疫苗、减毒活疫苗、DNA疫苗、亚基因疫苗和多价疫苗等。这些实验性疫苗有望解决面对PCV2基因型突变的挑战，并有利于简化繁琐的疫苗接种程序。3.1.减毒嵌合疫苗嵌合疫苗在遗传水平上改变病原体的结构，将两种或两种以上病原体的基因组片段剪接或替换到一个载体，构建可表达多种抗原物质的重组载体，用于制备减毒和灭活疫苗。目前报道的实验性PCV2减毒活疫苗是由PCV1-2a和PCV1-2b制备的。对PCV1-2a减毒嵌合活疫苗的研究表明，减毒嵌合PCV1-2a在细胞培养中遗传稳定，在猪体内可连续传代不具备致病性。嵌合病毒PCV1-2a可以诱导猪保护猪免受PCV2b或PCV2d的攻击。且该病毒毒力明显较弱，使用时未见猪死亡病例。与PCV2b野毒株感染猪相比，猪的淋巴组织病理学损伤程度的PCV2特异性抗原的数量始终较低。用减毒嵌合PCV1-2b与野生型PCV1-2a和PCV1-2b接种猪相比，猪血清和组织中的病毒载量明显降低，临床症状明显减轻，表明减毒嵌合PCV1-2b病毒在猪体内引起了强烈的体液免疫，诱导猪对PCV2a和PCV2b产生交叉保护免疫反应。此外，PCV1-2b诱导了大量的IFN-γ-SCs。PCV1-2b可能是改良减毒活疫苗的候选疫苗。值得注意的是，嵌合PCV1-2a是从2008年在加拿大爆发的急性猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)分离出来的。因此，推测PCV1-2嵌合株的起源有两种可能，一种是来自嵌合疫苗的人工菌株，另一种是由于PCV1和PCV2的自然重组而产生的。3.2.核酸疫苗核酸疫苗利用基因工程构建重组载体，用基因注射技术进行免疫接种。作为一种新型疫苗，可以以特定的方式激活机体的免疫机制，实现快速免疫。核酸疫苗主要分为DNA疫苗和RNA疫苗，在病毒感染的防控中起着重要作用。目前PCV2核酸疫苗的研究主要集中在DNA疫苗上。核酸疫苗的接种方法各不相同，选择合适的核酸接种方法有助于提高疫苗的有效性。2004年，Kamstrup等人率先研究了PCV2 DNA疫苗，用基因枪对小鼠进行了三次免疫；PCV2 DNA疫苗可提高小鼠血清中PCV2抗体水平。Zhang等人还发现，与感染PCV2相比,PCV-like P1 DNA疫苗两次肌内免疫小鼠后可刺激较温和的PCV2病毒血症和组织病理学变化。使用PCV2 Cap基因DNA疫苗免疫小鼠后，可诱导高水平的高特异性血清抗体和细胞因子(干扰素-γ和白细胞介素(IL)-10)，并降低组织中的PCV2病毒载量，对PCV2的感染具有很强的保护作用。然而，DNA疫苗的发展容易受到质粒降解和递送等因素的限制。为了克服这些局限性，研究人员通过优化质粒构建、佐剂选择和疫苗递送系统来增强DNA疫苗的免疫应答。未来，核酸疫苗或将成为畜牧养殖业疾病防治和人类疾病防控领域的代替生物制品，具有广阔的应用前景。3.3.病毒样颗粒(VLPs)亚单位疫苗VLPs模仿了病毒的结构，VLP疫苗可以刺激强烈的B淋巴细胞和T淋巴细胞介导的免疫反应。在昆虫细胞中表达的重组Cap蛋白能形成VLPs，用于制备商业化的PCV2亚单位疫苗。然而，由于受到细胞培养成本和纯化时间的限制，仍需对该方法进行改进。Cap蛋白的N端具有核定位信号(NLS)，该部分富含精氨酸残基和多种稀有密码子，阻碍了外源基因在大肠杆菌中的表达。通过密码子优化和使用含有一个额外的稀有tRNA基因的大肠杆菌宿主菌株，可以提高Cap蛋白的表达水平。Wu等人在大肠杆菌系统中成功表达了不含任何融合标签的全长Cap1-233 VLP，并发现Cys108是衣壳组装所必需的。PCV2 VLP免疫猪可诱导特异性抗体免疫应答，并能够抵抗PCV2的侵袭，这为大规模生产PCV2 VLP疫苗提供了基础。Chi等人利用gE缺陷型伪狂犬病病毒(PRV)构建了重组gE(−)/PCV2 cap(+)PRV，用PCV2的cap基因替换部分gE基因的上游基因，表达的cap蛋白自组装成VLPs，纯化后的VLPs在免疫小鼠或豚鼠后能诱导显著免疫反应。噬菌体核衣核融合蛋白可以在大肠杆菌中通过质粒表达，保持可溶性并与外源多肽形成噬菌体颗粒，用于疫苗生产实践中。有研究者将PCV2 Cap构建成噬菌体λ颗粒，并在大肠杆菌中表达，诱导PCV2中和抗体，引发B细胞和T细胞介导的免疫反应。弹性蛋白的疏水区域含有弹性蛋白样肽(ELPs)，重复序列基序为缬氨酸-脯氨酸-甘氨酸-Xaa-甘氨酸，其中Xaa可以是除脯氨酸以外的任何氨基酸。在大肠杆菌中，ELP与PCV2 Cap构建融合蛋白进行表达，PCV2 Cap通过反向转化循环得到高纯度蛋白。将纯化的ELP-Cap融合蛋白组装成Cap蛋白VLPs (ELP-VLPs)。并将该疫苗与袁立家商业灭活疫苗和CircoflexTM疫苗在有效性方面进行比较，发现ELPylated VLP PCV2疫苗产生的中和抗体水平和干扰素应答方面均明显较高。3.4.病毒载体疫苗养殖生产过程中，猪需要接种多种病原体疫苗。二价疫苗和多价分疫苗可大大简化免疫接种程序、减轻养猪业的经济负担。为了增加疫苗表位的宽度，已有开发一种PCV2a-PCV2b二价疫苗。PCV2疫苗对于不同基因型的交叉保护效果不理想，但二价PCV2疫苗能提供更好的保护。将猪IL-18基因、PCV2 Cap和马兽疫链球菌（SEZ）M样蛋白(SzP)基因共同插入猪痘病毒(SPV)基因组，构建重组猪痘病毒rSPV-ICS，对PCV2和SEZ的共同感染具有良好的保护作用。以猪PCV2 Cap VLP和猪细小病毒(PPV) VP2 VLP为基础的联合疫苗可显著提高仔猪的生长性能，减轻PCV2和PPV共同感染引起的PCVAD及相关疾病。重组疫苗BacSC-Dual-GP5-Cap在杆状病毒系统中同时表达PRRSV GP5糖蛋白和PCV2衣壳蛋白，可引起高水平的病毒中和抗体，并诱导淋巴细胞增殖反应。PCV2和肺炎支原体二价疫苗(FosteraTM PCV)也有很好的保护作用。腺病毒表达载体具有易构建及诱导体液、粘膜和细胞免疫的优势。粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)和CD40L或内含子A和WPRE-modified PCV2 Cap的腺病毒载体疫苗不及商业PCV2灭活疫苗有效。将重组腺病毒疫苗Ad-A-spCD40L-spCapspGMCSF-W与市售灭活疫苗PCV2 SH株结合后，表现出强大的免疫应答和保护作用，有望成为PCVAD的候选疫苗。此外，有研究表明假结核耶尔森菌侵袭素（Inv）蛋白能够增强免疫应答，可用于构建含有PCV2b Cap和InvC基因的重组腺病毒，使其拥有良好的免疫反应。4佐剂的应用佐剂可以增强猪对抗原的免疫反应，改变免疫反应的类型，提高机体抗体水平或产生更有效的保护性免疫。PCV2疫苗佐剂主要分为化学佐剂和分子佐剂两大类(表1)。表1 佐剂在PCV2实验性疫苗中的应用。4.1.化学佐剂含有油佐剂的PCV2全病毒灭活疫苗可引起猪高水平的体液免疫。接种脂质体佐剂的PCV2 DNA疫苗可明显提高猪细胞分泌干扰素γ和中和抗体的水平，经PCV2攻毒后，显著降低了PCV2病毒血症。4.2.分子佐剂结核分枝杆菌热休克蛋白70 (HSP70)的C端结合部分与PCV2 Cap基因融合，构成PCV2 DNA疫苗并发挥佐剂作用，增强小鼠血清中的IgG水平和辅助性Th1细胞免疫应答。此外，与PCV2 DNA疫苗结合的分子佐剂可增强小鼠中Th1细胞的免疫应答，以及cap基因特异性抗体水平。IL-2和GMCSF作为免疫佐剂，有效增强PCV2 cap亚单位疫苗对小鼠的免疫保护作用。壳寡糖(COS)通过与灭活疫苗物理混合或与亚单位疫苗共价连接来提高PCV2疫苗的免疫原性。虽然高度去乙酰化的COS与商业化佐剂有相似的作用。不过当进一步结合载体蛋白(卵白蛋白)时，COS-OVA-PCV2疫苗与商业化佐剂（ISA206）物理混合的PCV2疫苗相比，更能促使机体产生高水平的PCV2特异性抗体和细胞因子。猪CD40配体(CD40L)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)可以协同增强PCV2腺病毒疫苗(Ad-CD40L-Cap-GMCFS)的体液和细胞免疫应答,与Ad-Cap、Ad-CD40L-Cap或Ad-Cap-GMCSF组相比，在PCV2攻毒后，该腺病毒疫苗增强了小鼠PCV2特异性抗体水平和中和活性、淋巴细胞增殖活性和Th1细胞因子水平，降低了病毒载量。TLRs的微生物配体包括细菌DNA和细菌鞭毛蛋白的未甲基化胞嘧啶磷酸鸟嘌呤(CpG)基序，被人们认为是病原体相关分子模式(PAMPs)。有报道称，CpG基序作为免疫佐剂可对PCV2具有免疫效力。哺乳动物补体成分C3的末端降解产物(C3d)与B细胞上的补体受体2结合并被用作疫苗佐剂，调节适应性免疫应答。将多个拷贝的C3d分子或其最小结合域C3d-p28偶联到疫苗上，可以明显增强疫苗的特异性应答反应。利用PCV2d的CD3-P28基因和ORF2基因构建pVAX1-ORF2-C3d-P28.3 DNA疫苗，诱导体液和细胞免疫反应，并保护猪免受PCV2b和PCV2d的攻击。猪IFN-γ作为一种免疫佐剂，可显著提高Cap亚单位疫苗诱导免受PCV2的攻击。鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白(FliC和FljB)通过激活TLR 5-positive DCs发挥免疫调节作用。鞭毛蛋白与PCV2 Cap在杆状病毒系统的融合表达，或在PCV2疫苗中使用FliC作为佐剂，均可增强小鼠和猪体内B细胞和T细胞介导的免疫应答反应。5PCV2疫苗的其他问题5.1.PCV2减毒疫苗的研发难点由于PCV2基因组的高突变率和新型PCV2亚型的出现，PCV2疫苗的研发一直处于不断更新的状态。与灭活疫苗相比，减毒疫苗能更好的介导细胞免疫，产生更快的免疫效果。据Fenaux研究发现，PCV2在PK-15细胞中连续传代120次后，ORF2基因仅发生328个(C328G)和573个(A573C)突变，由此产生的PCV2对SPF仔猪的毒力较低。然而，PCV2疫苗在120次连续传代后产生的潜在毒力可能会对实际的临床应用构成风险。5.2.适合PCV2增殖的细胞选择PCV2在复制过程中依赖于有丝分裂S期表达的蛋白，在PK-15细胞培养过程中加入氨基葡萄糖可刺激细胞分裂，从而促进PCV2复制。Hirai等发现猪肝原代细胞比猪肾细胞更适合PCV2的增殖。青岛澳兰百特生物工程有限公司通过克隆PK15-B1细胞系来提高PCV2的滴度，用于生产PCV2疫苗，灭活前的PCV2滴度≥107.5TCID50/mL。然而，目前大多数PCV2灭活疫苗仍在使用传统的PK-15细胞。5.3.PCV2疫苗评价的复杂性测定组织和血液中的病毒载量，病理评分和PCV2抗原在淋巴结分布，PCV2特异性抗体水平，淋巴细胞增殖活性和细胞因子水平，和/或生长性能均可用于评估PCV2疫苗的有效性。然而，目前对PCV2疫苗的效果评价尚无统一的标准。6结论目前，国际和中国市场上应用的商业疫苗对PCVAD具有良好的临床效果，且对PCV2的感染有效。然而，随着PCV2基因型的增加，开发能够提供预防和控制的疫苗至关重要。研究发现，一些实验性PCV2疫苗可以刺激机体的体液和细胞免疫，且在降低PCV2病毒血症和增加血清抗体水平方面优于市售疫苗。据多项研究报道，PCV2 VLP疫苗具有完整的PCV2病毒衣壳，并具有免疫原性。因此，开发佐剂来提高疫苗的效力是研究的重点。在预防人类疾病方面，体外转录(IVT)mRNA因其有效性、生产速度快、成本低、能够应对病毒突变等优点逐渐引起了研究者们的关注。然而，因其相对较新的技术和运输限制，mRNA疫苗还尚未被用作实验性PCV2疫苗的候选疫苗。随着这些问题的解决，mRNA疫苗将可用于预防和控制PCVAD。此外，PCV2疫苗的开发速度还远不及PCV2的进化速度。因此，研究PCV2流行株变异后的流行病学尤为重要。参考资料：Guo J, Hou L, Zhou J, Wang D, Cui Y, Feng X, Liu J. Porcine Circovirus Type 2 Vaccines: Commercial Application and Research Advances. Viruses. 2022 Sep 10;14(9):2005. doi: 10.3390/v14092005. PMID: 36146809; PMCID: PMC9504358.为了推动兽用生物制品行业交流，共同探讨该领域的最新研发进展、产业化现状及未来发展趋势，生物制品圈联合四叶草会展、乘风济海将于2024年4月17日-18日在南京共同举办“兽用生物制品研发和产业化大会”，系中国医药全产业链新资源大会（CBC大会）中的一个分领域专业会议。诚邀全国相关领域研究者共享学术盛会。名称：兽用生物制品研发和产业化大会时间：2024年4月17日-18日（周三-周四）地点：南京国际展览中心主办单位：生物制品圈、抗体圈、四叶草会展，乘风济海媒体支持：药时空、细胞基因研究圈报名方式：扫描下方二维码或点击文章最底部“阅读原文”→ 填写表格 → 报名成功组委会获得报名信息后，根据报名信息进行初筛，并进一步与报名者沟通确认，实现精准邀请（严格审核通过）。大会日程注：大会日程以会议现场为准。中国医药全产业链新资源大会（CBC大会）是一场将“政、产、学、研、用、管、投”各方精英围绕全产业链新资源展开的合作大会，将于2024年4月16日-18日在南京国际展览中心举办。大会将主打“全产业链新资源对接”，围绕投资、立项、临床前研发、临床研究、生产、供应链国产化、销售、MAH合作、国际品种合作、公司股权合作与并购全产业链，为中国医药同仁带来全新的资源与商机。大会下设的同期会议包括：宠物药品、食品、保健品新资源大会兽用生物制品研发和产业化大会透皮技术研发生产与注册开年分享会吸入制剂研发、生产与注册新机遇新进展分享会中国改良新药与缓控释制剂全产业链合作大会多肽产业创新与发展大会新药典新型辅料与包材产品与技术交流会新药典新型实验室仪器与耗材实操演示交流会陆续更新中......识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入生物制品微信群！请注明：姓名+研究方向！版权声明本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。