PYK2

本文为转化医学网原创，转载请注明出处 作者：Jerry 导读： 胰腺癌具有高致死率，其中90%为胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma, PDAC)， 5年生存率不足12%，缺乏有效的治疗选择和晚期诊断。此外，肿瘤对细胞毒性化疗表现出强烈的耐药性。 近日，华中科技大学与浙江省台州学院研究人员合作在权威期刊《Cell Death&Disease》上发表了题为“Blockade of DDR1/PYK2/ERK signaling suggesting SH2 superbinder as a novel autophagy inhibitor for pancreatic cancer”的研究论文，本文中，研究人员采用免疫荧光和透射电镜观察自噬通量。使用无标记的定量磷酸化蛋白质组学来找出蛋白质中酪氨酸磷酸化的严重改变。并用荷瘤小鼠验证SH2 TrM-(Arg)9抑制肿瘤细胞的生长。SH2 TrM-(Arg)9通过阻断DDR1/PYK2/ERK信号级联抑制胶原诱导的自噬。SH2 TrM-(Arg)9提高了PANC-1/GEM细胞对吉西他滨(GEM)的敏感性。SH2 TrM-(Arg)9对自噬的抑制可能与化疗协同作用，并在胰腺癌异种移植中增强肿瘤抑制作用。 研究结果表明，SH2 TrM-(Arg)9可以通过抑制DDR1/PYK2/ERK信号传导进入PDAC细胞，阻断自噬，可能成为PDAC靶向治疗的新治疗策略。 https://www.nature.com/articles/s41419-023-06344-4#Sec1 研究背景 01 胰腺癌(PC)是一种高度致命的消化系统恶性肿瘤，威胁着全世界数十万人的生命，5年总生存率仅为12%。大约90%的胰腺恶性肿瘤是起源于胰腺导管上皮的胰腺导管腺癌(PDAC)。由于胰腺的独特位置和功能，许多PC患者在诊断时已处于中晚期;因此，单纯手术治疗是无效的。化疗通常是治疗晚期PDAC的主要方法。吉西他滨(GEM)联合紫杉醇或FOLFIRINOX(氟尿嘧啶、伊立替康、亚叶酸蛋白和奥沙利铂)是目前的一线化疗策略。然而，由于化疗耐药和副作用，化疗对晚期PDAC的疗效有限。其他治疗方案，如靶向治疗和免疫治疗，在一定程度上减缓了PDAC的发展，但与化疗相比没有实质性的优势。此外，其中一些治疗方案仅对一小部分具有特定基因型的患者有益。因此，有必要寻找疗效更高、受益范围更广、耐药更少的新疗法。 自噬是细胞在应激或饥饿条件下回收生物分子并损伤细胞器的自我保护过程。自噬产生用于生物合成和能量生产的中间代谢物，并通过降解和再循环受损的DNA、错误折叠的蛋白质和细胞内病原体来促进肿瘤生长。PDAC肿瘤组织、癌细胞和干细胞中均存在自噬通量异常激活。PDAC肿瘤微环境中其他细胞(如胰腺星状细胞)的自噬也为肿瘤的生长发育提供能量。许多研究表明，自噬水平的增加可能是PDAC发展的重要原因。因此，抑制自噬被认为是治疗PDAC的重要策略。 迄今为止，抑制自噬的小分子药物和新型螯合剂在体外和体内均显示出良好的抗癌效果。 研究进展 02 之前的研究表明SH2 TrM-(Arg)9具有抗肿瘤活性，并且具有广泛的机制。 然而，SH2 TrM-(Arg)9与自噬之间的关系尚不清楚。利用透射电镜观察自噬体和自溶体，并探讨SH2 TrM-(Arg)9是否会影响PDAC细胞的自噬。与先前的研究一致，PDAC细胞在基础条件下表现出较高的自噬。如图1（A、B）所示，在SH2 TrM-(Arg)9处理的PANC-1细胞中，自噬体的数量明显增加，而在对照组中则没有。接下来，研究人员分析了LC3、p62和Beclin1的水平。结果表明，SH2 TrM-(Arg)9可诱导LC3的积累。p62水平升高，Beclin1无明显变化。这一观察结果也证实SH2 TrM-(Arg)9显著增加了瞬时转染GFP-LC3构建体的GFP-LC3阳性点的数量。 图1：SH2 TrM-(Arg)9抑制PANC-1细胞的自噬 据报道，酪氨酸磷酸化的异常激活在人类标本和PDAC细胞中起重要作用。为了揭示其生理活动的分子机制，研究人员采用无标记定量磷酸化蛋白质组学的方法系统研究了SH2 TrM-(Arg)9引起的PANC-1细胞的全局磷酸化事件，希望找到在抗肿瘤过程中酪氨酸磷酸化的关键改变。经过三次独立实验，研究人员发现DDR1 (RTK家族成员)的Y792位点在三个来源的PANC-1细胞中呈现一致的变化趋势，这表明了该位点的重要性(数据集1)。DDR1在自噬过程中在神经系统疾病中发挥作用。在胰腺癌中，阻断胶原/ ddr1信号通路可抑制肿瘤生长;然而，其对自噬的影响尚不清楚。从磷酸化蛋白质组学结果来看，研究人员发现SH2 TrM-(Arg)9处理组DDR1(Y792)的磷酸化酪氨酸水平显著降低(图2A, B)。为了进一步证实磷酸化酪氨酸相关信号通路的重要性，研究人员测量了酪氨酸(pY)和DDR1的磷酸化水平。数据显示SH2 TrM-(Arg)9下调酪氨酸残基的磷酸化水平(图2C, D)。研究人员进一步测量了PDAC和患者邻近组织中总酪氨酸和DDR1(Y792)的磷酸化水平。通过免疫染色，研究人员发现肿瘤组织中pY和pDDR1(Y792)水平均升高(图2E, F)。 图2：阻断DDR1/PYK2/ERK信号提示SH2超结合物是一种新的胰腺癌自噬抑制剂 研究结论 03 综上所述，研究人员深入分析了SH2超粘结剂的作用机理。研究人员首次在PDAC细胞和动物模型中发现SH2超结合物通过影响自噬而具有抗癌作用。当与GEM联合使用时，SH2超结合剂减少了化疗耐药性和副作用。基于SH2超结合物对PDAC细胞明显的自噬抑制作用，研究人员为再次将SH2超结合物作为抗癌药物提供了证据支持，并且为PDAC的临床治疗提供了新的方向。 参考资料： https://www.nature.com/articles/s41419-023-06344-4#Sec1 注：本文旨在介绍医学研究进展，不能作为治疗方案参考。如需获得健康指导，请至正规医院就诊。 热门·直播/活动 🕓 北京｜12月19日-20日 ▶第四届单细胞测序技术应用研讨会暨单细胞&空间组学研讨会（日程稍后公布） 点击对应文字 查看详情

来自H. Lee Moffitt癌症研究中心等机构的科学家们通过研究表明，ROS1抑制剂劳拉替尼或许在抵御另一种名为PYK2的蛋白质上有活性，同时研究人员还揭示了这种抑制作用背后的分子机制。 如今靶向性癌症药物被广泛使用，因为其能抑制参与癌症发生的特殊蛋白，且与化疗药物相比副作用较小；但靶向性疗法通常会抑制一些未知蛋白质的功能，这些隐藏的靶点或许也有助于药物的抗癌效应，且能为药物被重新定向来用于由隐藏靶点所控制的其它癌症提供新的途径。 近日，一篇发表在国际杂志Cell Chemical Biology上题为“Differential network analysis of ROS1 inhibitors reveals lorlatinib polypharmacology through co-targeting PYK2”的研究报告中，来自H. Lee Moffitt癌症研究中心等机构的科学家们通过研究表明，ROS1抑制剂劳拉替尼（lorlatinib）或许在抵御另一种名为PYK2的蛋白质上有活性，同时研究人员还揭示了这种抑制作用背后的分子机制。 研究者Uwe Rix博士说道，具有多种药理学机制的药物，即能靶向作用多种功能性相关蛋白的药物，或许能潜在有效地克服药物耐受性，并改善单靶向性抑制剂的抗癌活性，且能产生更为持久的患者反应和疾病症状的缓解。这项研究中，研究人员想通过研究确定是否在非小细胞肺癌中能靶向作用ROS1蛋白的癌症药物会存在其它隐藏的靶点，于是他们在癌症模型中进行了相关研究，这些模型是由致癌ROS1蛋白的促癌特性所驱动的，因此，研究人员就需要开发一种调查平台来识别任何潜在的额外靶点，而这些靶点可能会被ROS1的主要特性所隐藏。 研究人员首先比较了一组不同的ROS1抑制剂的活性，结果发现，药物劳拉替尼在抵御ROS1上具有最高的抑制活性，且与其它ROS1抑制剂相比，其细胞存活率也会不成比例地提高，这些观察性结果表明，药物劳拉替尼或能靶向作用其它有助于其抗癌效应的蛋白质。于是，研究人员进行了额外的实验，结果发现，劳拉替尼也能靶向作用PYK2蛋白，该蛋白在黏着斑(focal adhesions)中发挥着重要角色，而黏着斑是一种参与多种细胞过程的特殊细胞结构，比如细胞粘附、移动和生存等；相关研究结果表明，SRC蛋白与PYK2和ROS1之间存在着物理性关联，其能帮助控制PYK2的活性，相关研究数据表明，联合抑制ROS1、PYK2和SRC或许要比单一使用任何一种药物都具有更大的抗癌效应。 进一步研究结果证实，相比单独使用任何一种药物而言，靶向作用每种蛋白质的药物组合都会导致癌细胞死亡的增加，且细胞存活率会下降；同样地，劳拉替尼联合SRC抑制剂也会增强器抗癌效应；研究人员希望这些研究结果和其研究平台未来能帮助更好地理解劳拉替尼的作用机制，并开发出具有更好地临床活性的药物组合。综上，本文研究结果表明，这种基于系统性药理学的差异网络分析或能在多个酪氨酸激酶抑制剂中剖析混合规范/非规范的多药理学机制，从而促进更加合理的药物组合的设计。 原始出处： Yi Liao，Lily L. Remsing Rix，Xueli Li, et al. Differential network analysis of ROS1 inhibitors reveals lorlatinib polypharmacology through co-targeting PYK2, Cell Chemical Biology (2023). DOI: 10.1016/j.chembiol.2023.09.011 内容来源于网络，如有侵权，请联系删除。

关注并星标CPHI制药在线 七夕爱你不止 朝朝夕夕8月21日，和黄医药宣布，Syk抑制剂索乐匹尼布探索用于治疗成人原发免疫性血小板减少症（ITP）的中国关键性3期研究ESLIM-01已达到持续应答率这一主要终点以及所有的次要终点。和黄医药计划于2023年年底左右提交新药上市申请。       索乐匹尼布是一种新型、高选择性的口服脾酪氨酸激酶（Syk）抑制剂，每日一次口服用药，拟用于治疗血液恶性肿瘤和自身免疫性疾病。索乐匹尼布于2022年1月获中国国家药监局（NMPA）纳入突破性治疗品种，用于ESLIM-01研究所探索的适应症。除了免疫性血小板减少症外，索乐匹尼布用于治疗温抗体性自身免疫性溶血性贫血和惰性非霍奇金淋巴瘤的研究也在进行中。       本次达到主要终点的ESLIM-01研究是一项在中国开展的随机、双盲、安慰剂对照的3期临床试验，共纳入188名既往接受过至少一种治疗的慢性成人原发免疫性血小板减少症患者。研究于2022年12月完成患者入组。该试验成功达到了其主要终点，即与接受安慰剂治疗的患者相比，接受索乐匹尼布治疗的患者持续应答率取得了具有临床意义和统计学意义的显著改善，包括总体应答率和安全性在内的所有次要终点也已达到。该试验完整的研究数据将提交于近期的学术会议上发表。       此前，索乐匹尼布的概念验证数据已于2021年美国血液学会（ASH）年会上公布，并于2023年6月发表于《柳叶刀-血液病学》（The Lancet Haematology）。这项中国1/2期研究结果显示，索乐匹尼布为经治的免疫性血小板减少症患者带来快速且持久的血小板计数改善。在接受每日一次300mg的2期临床试验推荐剂量（RP2D）的20名患者中，16名（80%）出现应答，8名 (40%) 患者出现持续应答。截至整个研究的24周内，仅一例出现3级或以上治疗期间不良事件。支持在中国启动III期研究。       Syk激酶及其介导的信号通路       蛋白酪氨酸激酶（protein tyrosinekinase，PTK）是一类能够催化ATP上γ-磷酸转移到蛋白酪氨酸残基上的激酶，依据是否存在于细胞膜受体，划分为非受体型和膜受体型。Syk激酶（Spleen tyrosine kinase，脾酪氨酸激酶）与同源物ZAP-70均为是胞浆非受体型PTK，广泛表达于B细胞、单核细胞、巨噬细胞、肥大细胞和血小板等造血细胞。其中，在B细胞领域进行的Syk激酶相关研究较为深入。       Syk分子量约72kDa，定位在染色体 9q22上，两个串联的N端SH2（SRC同源性2）结构域和一个C末端酪氨酸激酶结构域，通过A、B接头区域连接，域间A位于2个SH2结构域之间，域间B位于SH2结构域和C端结构域之间。Syk 蛋白缺乏肉豆蔻酰化位点，因此不直接附着在细胞膜上。       Syk，属B细胞受体范畴，磷酸化被激活后，进一步磷酸化多个下游及相关信号通路，如控制细胞增殖的鼠肉瘤病毒同源癌基因激酶（RAS）-纤维肉瘤激酶（RAF）-有丝分裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路；控制细胞存活以及细胞因子释放的BTK-磷脂酶Cγ2（PLCγ2）-三磷酸肌醇（IP3）-活化T细胞的Ca2+-核因子（NFAT）信号通路或BTK-PLCγ2-蛋白激酶C（PKC）-核转录因子-κB（NF-κB）信号通路；调节细胞生长的磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）-蛋白激酶B（AKT）-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路。       Syk不仅在免疫受体信号中扮演至关重要的角色，同时还调节其他不同的生物功能，包括细胞的黏附、增殖、破骨细胞成熟、血小板活化等方面。近年来 Syk 在血液肿瘤、自身免疫、炎症疾病等方向已经成为极具吸引力的药物靶标。       Syk抑制剂赛道竞争       鉴于 B 细胞受体信号在多种疾病中的重要的作用， Syk 抑制剂研究已日益引起人们的注意，小分子 Syk 抑制剂在近几年得到了快速的发展，随着进入临床的药物不断增多，多个小分子 Syk 抑制剂已展现出开发潜力。截至目前，全球范围仅有福坦替尼这一款SYK抑制剂获批上市，用于免疫性血小板较少症，其他处于临床阶段的在研SKY小分子抑制剂约有15个左右，适应症的探索主要集中在血液肿瘤、自身免疫性疾病、眼科疾病这三大方向。       福坦替尼（Fostamatinib）福坦替尼是首个被批准上市的适用于免疫性血小板减少症患者的口服脾酪氨酸激酶（SYK）抑制剂。脾酪氨酸激酶对细胞增生、分化、免疫调节，以及细胞吞噬过程中的细胞骨架重组都具有重要作用。当TPO-RA刺激血小板产生并在疾病中被破坏时，福坦替尼通过保护血小板免受破坏而发挥作用。美国FDA的批准主要基于两项平行多中心、安慰剂对照的随机双盲III期临床试验FIT1、FIT2和一项开放标签的临床试验FIT-3。在接受治疗之前，患者的平均基线血小板水平为16 x 109/L。试验结果表明：在接受治疗14周以后，福坦替尼组有18%的患者血小板水平能够稳定在50 x109/L以上，对照组仅有2%。在接受治疗后12周内，福坦替尼组有43%的患者血小板水平可达到50 x109/L以上，对照组仅有14%。       CerdulatinibCerdulatinib是一种研究性口服双脾酪氨酸激酶（Syk）和janus激酶（JAK）抑制剂，能够特异性抑制两种涉及某些血液系统恶性肿瘤和自身免疫性疾病的关键细胞信号通路。目前已有充分的理由在B细胞恶性肿瘤中抑制Syk（B细胞受体通路）和JAK（细胞因子受体），这两个靶点均表现出会促进癌细胞生长和存活。此外，临床前数据表明Syk和JAK在PTCL肿瘤存活中扮演重要角色。2018年，FDA授cerdulatinib治疗外周T细胞淋巴瘤（peripheral T-cell lymphoma，PTCL）的孤儿药资格认定。一项正在进行的II期研究探索了SYK抑制剂Cerdulatinib在PTCLs和皮肤T细胞淋巴瘤患者中的疗效，研究结果显示在PTCLs队列的45例中ORR为35%、CR率为31%。       IC-265IC-265是一种由高度选择性且强效的Syk酪氨酸激酶抑制剂组成的滴眼液，不仅具有广泛的抗炎功效，还具有减轻过敏性结膜炎体征方面的疗效。IC-265由IACTA公司开发，兆科眼科获得该药在大中华区及若干东南亚地区开发、制造及销售独家许可。目前，IC-265治疗过敏性结膜炎的2期临床试验已完成。此外，IC-265还拟开发治疗干眼症和葡萄膜炎。       结语       福坦替尼的获批增强了人们对Syk抑制剂研发的信心，但其存在的低选择性引起的剂量毒性等问题日益暴露，选择性高和耐受性好的新2一代 Syk抑制剂的开发迫在眉睫。另外针对类风湿关节炎等适应证临床试验的纷纷失利，人们开始思考是否仅抑制Syk不能产生足够的疗效，因此Syk抑制剂开发的一个新方向是双靶点抑制剂，如Syk/JAK 双靶点抑制剂在自身免疫性疾病中运用前景广阔、 Syk/FLT3 双靶点抑制剂对FTL3突变的白血病极具治疗潜力。同时组合疗法也是提升疗效的重要策略，例如Syk抑制剂与 BTK、PI3Kδ 等抑制剂的联用，其在临床上初步显示出较强的抑制肿瘤效果以及不易产生耐药性的优势，这对 Syk 抑制剂的进一步开发具有重要意义。       参考来源       1.各公司官网       2.Liu X,Zhou H,Hu Y,Yin J,Li J,Chen W,Huang R,Gong Y,Luo C,Mei H,Ding B,Gu C,Sun H,Leng Y,Ji D,Li Y,Yin H,Shi H,Chen K,Wang J,Fan S,Su W,Yang R.Sovleplenib(HMPL-523),a novel Syk inhibitor,for patients with primary immune thrombocytopenia in China:a randomised,double-blind,placebo-controlled,phase 1b/2 study.Lancet Haematol.2023 Apr 4:S2352-3026(23)00034-0.       3.FEBS Letters 584 （2010） 4933–4940. doi:10.1016/j.febslet.2010.08.006      4.《小分子脾酪氨酸激酶抑制剂临床研究进展》药学进展智药研习社近期课程报名来源：CPHI制药在线声明：本文仅代表作者观点，并不代表制药在线立场。本网站内容仅出于传递更多信息之目的。如需转载，请务必注明文章来源和作者。投稿邮箱：Kelly.Xiao@imsinoexpo.com▼更多制药资讯，请关注CPHI制药在线▼点击阅读原文，进入智药研习社~