Etanercept

SAN DIEGO, Dec. 12, 2024 (GLOBE NEWSWIRE) -- aTyr Pharma, Inc. (Nasdaq: ATYR) (“aTyr” or the “Company”), a clinical stage biotechnology company engaged in the discovery and development of first-in-class medicines from its proprietary tRNA synthetase platform, today announced the appointment of Eric Benevich to the Company’s Board of Directors, effective as of December 10, 2024. Mr. Benevich currently serves as Chief Commercial Officer at Neurocrine Biosciences, Inc. (Neurocrine). “We are excited to welcome Eric Benevich to the Board of Directors,” said Timothy P. Coughlin, Chairman of the Board of aTyr. “His extensive background bringing new products to market and the knowledge and expertise he has gained from both building and leading commercial activities at biopharmaceutical companies will be an invaluable resource as aTyr continues its evolution towards commercialization.” Mr. Benevich has served as Chief Commercial Officer of Neurocrine since May 2015 and is responsible for all aspects of commercial development, marketing, and sales of the Neurocrine product portfolio. Mr. Benevich has over 30 years of commercial experience in the pharmaceutical industry and previously served in various positions of increasing responsibility at AstraZeneca, Amgen, Peninsula Pharmaceuticals, and Avanir Pharmaceuticals in the sales and marketing of drugs such as Prilosec®, Epogen®, Enbrel®, and Neudexta®. Mr. Benevich has a BBA in International Business from Washington State University. About aTyr aTyr is a clinical stage biotechnology company leveraging evolutionary intelligence to translate tRNA synthetase biology into new therapies for fibrosis and inflammation. tRNA synthetases are ancient, essential proteins that have evolved novel domains that regulate diverse pathways extracellularly in humans. aTyr’s discovery platform is focused on unlocking hidden therapeutic intervention points by uncovering signaling pathways driven by its proprietary library of domains derived from all 20 tRNA synthetases. aTyr’s lead therapeutic candidate is efzofitimod, a first-in-class biologic immunomodulator in clinical development for the treatment of interstitial lung disease, a group of immune-mediated disorders that can cause inflammation and progressive fibrosis, or scarring, of the lungs. For more information, please visit www.atyrpharma.com. Forward-Looking Statements This press release contains forward-looking statements within the meaning of the Private Securities Litigation Reform Act of 1995. Forward-looking statements are usually identified by the use of words such as “anticipates,” “believes,” “estimates,” “expects,” “intends,” “may,” “plans,” “projects,” “seeks,” “should,” “will,” and variations of such words or similar expressions. We intend these forward-looking statements to be covered by such safe harbor provisions for forward-looking statements and are making this statement for purposes of complying with those safe harbor provisions. These forward-looking statements include statements regarding the potential benefits that Mr. Benevich’s appointment will have on aTyr’s evolution towards commercialization. These forward-looking statements also reflect our current views about our plans, intentions, expectations, strategies and prospects, which are based on the information currently available to us and on assumptions we have made. Although we believe that our plans, intentions, expectations, strategies and prospects, as reflected in or suggested by these forward-looking statements, are reasonable, we can give no assurance that the plans, intentions, expectations or strategies will be attained or achieved. All forward-looking statements are based on estimates and assumptions by our management that, although we believe to be reasonable, are inherently uncertain. Furthermore, actual results may differ materially from those described in these forward-looking statements and will be affected by a variety of risks and factors that are beyond our control including, without limitation, uncertainty regarding geopolitical and macroeconomic events, risks associated with the discovery, development and regulation of our product candidates, the risk that we or our partners may cease or delay preclinical or clinical development activities for any of our existing or future product candidates for a variety of reasons (including difficulties or delays in patient enrollment in planned clinical trials), the possibility that existing collaborations could be terminated early, and the risk that we may not be able to raise the additional funding required for our business and product development plans, as well as those risks set forth in our most recent Annual Report on Form 10-K, Quarterly Reports on Form 10-Q and in our other SEC filings. Except as required by law, we assume no obligation to update publicly any forward-looking statements, whether as a result of new information, future events or otherwise. Contact:Ashlee DunstonDirector, Investor Relations and Corporate Communicationsadunston@atyrpharma.com

编者语：本文主要研究了不同形式的常用预灌封注射器对药液的影响，特别是对防腐剂含量的影响。研究表明，预灌封注射器的柱塞和针头护帽能够不同程度的导致产品中防腐剂和水蒸气的扩散及渗透，从而致使产品中防腐剂含量的降低。本文通过对预灌封注射器中产品稳定性、材料相容性、有机硅结合性研究、蒸汽渗透性、针头护帽/柱塞以及HS-GC-MS等研究，确定预灌封注射器的柱塞、针头护帽不仅对氧气有较高的透过率，而且对水蒸汽以及产品中BzOH的渗透性也影响较大。需要对容器封闭系统的物理化学性质具有一定了解和评估，从而降低在稳定性研究过程中遇到的不可预见的问题。另外，提示包材生产厂家可以通过涂覆惰性材料来提高产品稳定性。 本文来源见以下截图： 摘要：预灌封注射器（PFS）是一种广泛使用的药物输送医疗器械，特别是用于生物来源性的药物。产品成分和PFS成分之间的相互作用在PFS的适用性方面起着至关重要的作用。含有苯甲醇/BzOH的稀释剂（以苯甲醇/BzOH为防腐剂）用于复溶冻干产物的PFS显示，在加速和强力稳定过程中发现BzOH含量系统性降低。为了了解和确定这一现象的根本原因，对该现象进行调查。BzOH与PFS的橡胶成分（塞子和尖端盖）结合的倾向各不相同。通过顶空-气相色谱-质谱（HS-GC-MS）分析研究了PFS尖端盖上的蒸汽渗透行为。根据橡胶组分的特性，BzOH不仅可以与之结合，还可以穿透它们，导致稳定性过程中在橡胶组分中的系统性损失。PFS不仅可以像以前的研究所示允许水蒸气渗透到尖端盖上，还可以允许像苯甲醇这样的有机化合物分子通过。这种现象强调了初级包装仔细选择组件的必要性，也提供了一个可以在早期选择最佳初级包装配置时部署HS-GC-MS等新型工具的机会。 关键词：预灌封注射器；BzOH；稀释剂；吸附；蒸汽渗透；针头护帽；柱塞；HS-GC-MS 1.    简介 随着生物技术治疗方法的出现，大量的单克隆抗体（mab）处于研究开发中。大约有40%的冻干单克隆抗体，最终呈现出粉末状（片状）的药品[1,2]。Gervasi等人最近报道，仅在欧盟，就有约34%的肠外蛋白配方是冻干的[3]。冻干粉可避免溶液介导的降解，确保产品在保质期内的稳定性[4,5]。冻干产品需要使用稀释剂/载体将冻干剂重组为肠外给药溶液。通常，稀释剂可以是注射用水或使用含有防腐剂的无菌水，这些防腐剂可以在规定的使用期限内提供微生物稳定的重组溶液。含BzOH的注射用水被广泛用作冻干蛋白的稀释液，多数为多用途小瓶。开发一种含有PFS的稀释剂，与冻干剂一起包装，在剂量方面具有优势准确性和患者安全性方面具有较好的优势，如用于重构的稀释剂用量得到了保证以及由于处理不同注射器之间固有可变性而导致的错误被最小化[7,8]。 使用PFS系统给药变得越来越重要，特别是对于那些需要反复或长期给药的药物[9]。推动PFS增长的主要因素是易于给药、给药准确以及与自动注射器具有兼容性，从而进一步提高了患者的依从性[10,11]。与小瓶相比，PFS设备的复杂性，给以PFS为基础的药品开发带来了技术挑战。然而，这些挑战通常以影响药品质量的形式反映出来（如：钨[12,13]/硅油诱导的聚集或颗粒形成[14-17]）或设备功能（如：针头堵塞、高断裂/滑动力等[18,19]），从而对产品质量和性能产生不利影响。最近有报道称，通过PFS针罩的蒸汽传输会导致含蛋白药物的针堵塞[20,21]。在选择药物制剂溶液和PFS组分之间的相互作用时必须考虑药品的主要容器。这不仅适用于高浓度、高粘度的生物制品，也适用于含BzOH的非生物制品。就PFS而言，BzOH不仅可以在小分子无菌制剂（如：Falsodex®）中作为防腐剂使用，也可用作蛋白质冻干液（如冻干剂）的稀释剂/载体的防腐剂成分（如：Extavia®和Enbrel®），以确保重组产品在持续时间（包括保持时间）内无菌，直到给完患者最后一剂产品。关于小分子和蛋白质肠外配方中使用防腐剂的详细概述可以在Brian及其同事发表的综述文章中找到[22]。 稀释剂PFS，作为我们其中一个项目技术开发稳定性计划的一部分，测试是在“加速条件”和“应力条件”（以及实时存储条件）下，而这些条件通常高于推荐的储存温度和相对湿度值。在这些研究过程中，观察到稀释剂注射器中BzOH含量的下降。而稀释剂中防腐剂含量的降低可导致含有潜在改变防腐剂的重组产品功效。这可能对此类产品的微生物质量产生深远的影响，特别是如果打算用于多次给药。PFS使用量的增加[23]，以及冻干生物制品数量的激增[24]，加速了对这一现象进行评估和调查的动力。在开发早期识别这种现象可以作为提供预期货架期的最佳初级包装组件的关键指标。 PFS 以基于固定针头和鲁尔接头的形式提供 (图1)。鲁尔接头格式可以基于“鲁尔滑动”(LS)，其中尖端盖可以简单地滑动/安装到注射器尖端(图1B)，也可以是“鲁尔锁”(LL)，其中旋转环驱动尖端盖安装/锁定到注射器尖端(承载环)(图1C)。用于低滑动注射器的尖端帽由弹性体/橡胶制成，而用于LL注射器的尖端帽通常由刚性塑料屏蔽(例如聚丙烯)内的弹性体/橡胶构成。LL和LS注射器可用于全球许多制药公司的应用[25]。弹性体合成橡胶和丁基热塑性弹性体通常是透气性的，其中这种透气性有助于PFS系统的灭菌(通过蒸汽或环氧乙烷)[26]。显然，这种渗透性也会导致注射器内部药品中的水蒸气通过针尖盖渗透到外部环境中[21]。我们将进一步说明这种现象不仅是水分子逃逸的原因，也是像BzOH这样的小分子逃逸的原因。在本篇研究性文章中，我们系统地研究了PFS中苯甲醇含量的降低，并表明稀释剂中含有的BzOH不仅可以与之结合而且可以透过PFS的针尖帽盖，在防腐剂的丢失过程中，不会伴随任何降解过程。 图1预灌封注射器普遍使用的规格 (A) 固定针头 PFS，(B) 鲁尔滑动 PFS，(C) 鲁尔锁 PFS 2.    材料与方法 2.1材料 BzOH购自Merck KGaA (Darmstadt, Germany)。使用Millipore-Q装置(Millipore，型号Advantage A10)制备的超纯水配制含BzOH的溶液(稀释剂)。Dow Corning® 360医用液(聚二甲基硅氧烷/硅油)，粘度为1000cST，购自道康宁(美国)。注射器编号1:2.25 mL LL-PFS样品由长2.25 mL、I型硼硅酸盐透明玻璃桶组成，指状法兰和尖端帽盖由合成异戊溴丁基弹性体橡胶混合制成，由塑料(聚丙烯)外壳屏蔽。注射器用特氟龙涂层(产品接触面)和溴丁基柱塞。注射器编号2:2.25mL LS-PFS样品由长2.25mL、I型硼硅酸盐透明玻璃桶组成，指状法兰和尖端帽盖由合成聚异戊二烯专有弹性体橡胶共混物制成。注射器用特氟龙涂层(产品接触面)和溴丁基柱塞。注射器(带瓶盖)和柱塞作为即用型(RU)组件从制造商处收到(清洗，硅化和消毒)。上述主要包装成分的物理化学属性信息可从各自制造商提供的分析/规范证书中获得。将含BzOH的溶液分别以10 mg/mL或9.7 mg/mL的浓度在去离子水中制备，过滤(0.2μm)，填充(1 mL)玻璃注射器，然后加上柱塞。当保持垂直(法兰向上)位置时，每个PFS在液体表面和注射器塞之间的目标顶空为5mm(限制：2~5 mm)。注射器灌装操作在层流控制环境下进行。本研究中使用的所有化学品均为药品级。特氟龙胶带(宽度：12mm；厚度：0.1 mm，货号：7500001008)购于德国Teguma GmbH。移液器、移液头(1ml)和注射器管(安全锁管1.5 mL)。编号：0030120.86)采购于德国Eppendorf。结合研究中使用的玻璃瓶采购自德国Schott-Duran®，由透明硼硅酸盐玻璃(EP/USP型I)制成，并配备具有密封性的蓝色聚丙烯盖。 2.2稳定性研究 稳定性研究作为稀释剂填充注射器(注射器1和注射器2)技术开发的一部分进行。两种类型的注射器在长期(5±3°C)、加速(25±2°C/60±5% RH)和强力(40±2°C/ 75±5% RH)储存条件下长达3个月，测试点分别为0、1和3个月。在每个稳定性条件的每个测试点对每种类型的一个稀释剂注射器进行测试。在指定的拔出点，拧开/取下尖端帽盖，用柱塞杆将稀释剂注射器的全部内容物(不使用针头)排出到1.5 mL Eppendorf管中。分析前，用1ml移液管将同物从Eppendorf管转移到高效液相色谱瓶中。 2.3采用高效液相色谱法测定BzOH 采用高效液相色谱法定量测定BzOH和杂质(苯甲醛和苯甲酸)的含量。该系统(Agilent LC 1200)由配备有泵的高效液相色谱泵、进样系统、紫外检测器和色谱柱加热器组成。色谱柱为反相柱(Nucleosil 100-10C18，长250 mm，直径4.0 mm)，柱温为30±2℃。流动相为60% v/v的10 mM KH2PO4和40% v/v的甲醇，以1.5mL/ min的流速泵送，在254 nm波长下检测苯甲醇(tR=4.3 min)、苯甲醛(t= 6.7 min)和苯甲酸(tR= 2.8 min)。稀释液(从各自的研究/稳定性程序中分装到HPLC小瓶中)以10μL的进样量直接进样。该方法表现出优异的精密度/极低的方法可变性，对应的相对标准偏差为0.11%，证明在每个测试条件下使用一个注射器/样品是合理的。 2.4.鱼骨图 系统分析了可能导致BzOH含量下降的不同变量，并设计了Ishikawa图。Ishikawa/鱼骨图的设计有助于图形化地突出特定问题或观察的不同潜在原因。它对于风险分类和促进/减轻或消除风险的行动特别有用。一旦发现任何意外事件/观察，必须实施纠正和预防措施。然而，这只有在确定了根本原因并且Ishikawa图工具是实现这一目标的关键推动者的情况下才是可行的[27]。 2.5材料相容性研究 硅橡胶管(内径/内径9.5 mm，外径/外径16.6 mm，长159 cm，Saint Gobain)和含氟聚合物管(内径4.8 mm，外径6.4 mm，长995 cm，Saint Gobain)用WFI冲洗。然后分别向管中填充9.7 mg/mL的BzOH溶液121 mL和43 mL。管子的开口端用不锈钢塞和石蜡膜封住。在室温下孵育各管，分别于24 h和48 h从每个管中取出5 mL样品。包括稀释剂对照(未经处理)，储存在玻璃瓶中，不与任何管道接触。采用高效液相色谱法测定样品中BzOH含量和降解杂质。 2.6.有机硅结合研究 硅油(聚二甲氧基硅烷，1000cSt，陶氏康宁，美国)分别取0 mg、70 mg和140 mg称重，装入三个玻璃瓶(100 mL)中。每个瓶子中的硅油溶解在二氯甲烷(5 mL)中，蒸干二氯甲烷，在瓶子内壁上形成一层薄薄的硅油(干燥过夜)。将稀释剂溶液(9.7 mg/mL)添加到每个瓶子中，得到含有硅油浓度分别为0 mg/mL(对照)、0.7 mg/mL和1.4 mg/mL的稀释剂。用特氟龙胶带(uith – fluorolymer Gewindedichtband, A/E1型，100 g/m2)缠绕瓶线密封，在40±2℃环境湿度条件下孵育。在Eppendorf管中分别于0、2、4周的时间点，用1mL移液管从瓶中取出等量的1 mL，离心，用HPLC检测水相中BzOH的含量和杂质。在每个条件下的每个测试点进行一次测量。 2.7.表面积计算 使用计算机辅助设计(Solidworks 2014, Dassault systemmes, France)计算了顶盖和塞的橡胶部件的表面积。根据制造商提供的主要包装部件的各自配置，模拟了顶盖和塞的工程设计。用该软件计算的总表面积值用于后续计算。 2.8塞子结合性研究 瓶塞结合研究将准备使用的瓶塞以1个/mL (n = 100)的比例在9.7 mg/mL BzOH溶液中孵育于玻璃瓶(100mL)中。瓶用石蜡膜密封，在40±2℃环境湿度条件下孵育。在0、1、2、4周的时间点，用1ml移液管从瓶中抽取1ml的等分液，用高效液相色谱法检测BzOH含量和杂质。在每个条件下的每个测试点进行一次测量。由于注射器1和注射器2具有相同的塞子，因此本研究的结果适用于两种类型的注射器。 2.9.    帽头结合研究 将luer-lock帽头从注射器1的注射器筒上拧下，帽头的橡胶组件很容易从聚丙烯套管中分离(推过)，而不会影响其完整性或造成任何表面擦伤。顶帽(橡胶成分)按1顶帽/mL (n=50)的比例在9.7 mg/mL BzOH溶液中孵育于玻璃瓶(50 mL)中。用石蜡膜密封，在40±2℃孵育。在0、1、2、4周的时间点，用1ml移液管从瓶中抽取1ml的等分液，用高效液相色谱法检测BzOH含量和杂质。在每个条件下的每个测试点进行一次测量。由于在调查时没有注射器2的尖端帽，因此尖端帽结合研究仅在注射器1上进行。 2.10 采用HS-GC-MS进行水蒸气渗透性评估 含稀释剂的注射器；注射器1 (n=3)和注射器2 (n=3)分别密封于HS-GC-MS顶空小瓶中，每种型号各取一支注射器，分别在5℃、40℃和60℃下受压14天。在第14天结束时，采用顶空分析装有小瓶的注射器是否含有BzOH。未包装的稀释液(裸液)和顶空瓶中的水分别作为阳性对照和阴性对照。顶空-气相色谱-质谱分析在配备安捷伦顶空仪器7697A的安捷伦GC 7890A上进行，该仪器与安捷伦三重四极杆MSD 7000相连。采用30 m Agilent HP-5MS色谱柱，膜厚0.25 μm，内径0.25 mm。顶空样品在顶空进样器烤箱中40℃孵育15 min。GC进样器/顶空进样器加热至230℃，同时将 MS 接口设置为 240 °C。使用的温度梯度为：35 °C 持续 1 分钟，每分钟20℃至240℃，保持1分钟。MS扫描在33-400 m/z范围内进行，扫描速度为 5 次/秒。 2.10.注射器的重量分析 PFS(注射器1，n = 5)手动填充约1ml BzOH溶液（9.7 mg/mL），并以 5 mm 的均匀顶部空间加塞。确保注射器表面没有任何粘附液滴。将含有稀释剂的注射器水平放置于环境湿度为40℃的培养箱中。在第0、1、2、4、6、8和12周取出注射器，将其平衡至室温一小时，然后使用称重分析天平称重(Sartorious GmbH，德国)。称重后，将注射器放回培养箱。由于在调查时没有足够数量的注射器2，因此仅对注射器1进行了重量分析。 3.    结果与讨论 3.1稳定性研究 稳定性研究通常在研发早期阶段进行，用以选择最佳的药品包装材料。在我们的一种冻干液稀释剂PFS的技术开发过程中，我们观察到PFS中BzOH含量的减少，特别是在加速(25±2°C/ 60±5% RH)和应力(40±2°C/75±5% RH)条件下(表1)，两种类型的luer-lock注射器被评估为主要包装选择的一部分。在3个月结束时，在实时、加速和应力条件下(注射器1)，定量下降分别为0.3%、0.8%和3.8%。对于另一个测试的PFS(注射器2)，这种下降也是相应的，分别为0.6%、10.9%和12.7%。加速和应力条件有助于提供更快的产品质量数据，并有助于预测在实时存储(5±3°C)条件下可能遇到的任何不可预见的问题。在实时环境中，产品可能无法体验到压力条件，但它们有助于揭示开发早期的意外观察结果。观察到的BzOH下降幅度在3个月时可能不是很显著，但却可以在产品保质期内损害防腐剂含量和潜在的防腐剂功效(在重构后提供)。此外，注射器1和注射器2在BzOH降低方面的相对差异也很有趣，这些观察结果旨在于提供更详细的科学调查，以更好地了解药品和包材之间的相互作用。对于提到的产品，认为BzOH的减少在被选为主要包装材料的注射器1中是非常普遍的。尽管如此，为使产品中BzOH含量满足所需规格，提供给产品的暂定保质期保守地从60个月减少到48个月。在接下来的讨论中；描述了研究BzOH含量降低的方法、实验数据和相应的观测结果。虽然调查的目的是评估注射器1与所选包装配置相关的因素，但注射器2的数据已与注射器1的数据进行了比较，以支持实验/调查结果的假设和推断。 表1含有苯甲醇（10mg /mL）稀释剂的注射器1和注射器2中的产品稳定性总结 3.2鱼骨分析 作为质量风险管理(QRM)框架的一部分，评估和调查对药品质量构成风险的观察结果非常重要[28]。质量风险管理强调在决定是否需要采取额外措施之前，分析风险发生概率和潜在后果的结构化过程。质量风险管理的一个核心要素是确定观察/事件的根本原因和产生因素。不同的程序取决于观察的性质，在处理事件或观察时可能被证明是有用的。鱼骨图是一种广泛使用的工具，用于评估和识别即将发生的问题的根本原因。如图2所示，基于跨职能输入，系统分析了可能导致BzOH含量下降(在非常窄的范围内)的潜在根本原因。对用于BzOH含量测定的分析方法进行了评估，以确定与样品制备、梯度性质、系统适用性、延续效应和方法能力相关的潜在差异。这被观察到在一个非常低的方法可变性控制范围内。环境因素的影响是根据稳定过程中的温度、压力和湿度的变化来评估的，这些变化都在限制范围内。在对记录进行验证后，排除了由于计算错误和未校准仪器而导致的实验室测量误差。评估了与人为干预相关的原因，如错误的标签、分析师培训和使用错误的主要包装材料，并确认为零。可能的原因归因于材料因素，如注射器筒绑定，假设塞和尖端帽结合是观察结果的原因，因为它不能在任何基础上被排除。考虑了BzOH扩散、聚合/降解等分子现象，由于稀释剂注射器的杂质谱在过程中保持不变(或