ALLO-501

-01-引言目前，使用嵌合抗原受体（CAR）T细胞进行治疗已成为治疗某些血液系统肿瘤患者的有力工具。然而，所有FDA批准的CAR-T细胞疗法均基于从患者身上分离的自体T细胞，尽管有显著的临床效果，该策略仍有几个重要的局限性，即治疗成本非常高，个别生产过程可能存在问题。与使用自体CAR-T细胞的治疗相比，由同种异体供体材料产生的CAR-T细胞具有三个主要优势。首先，根据个体患者的既定治疗方案，可以提前生产同种异体CAR-T细胞，并毫不延迟地交付。其次，异基因供体来源的T细胞不会暴露于多轮抗白血病治疗中，因此它们更容易接受体外操作。第三，一小部分患者最终可能永远无法获得质量良好、数量有治疗意义的自体CAR-T细胞产品。目前，已有多项异基因CAR-T细胞疗法进入临床阶段，其中一些临床试验展现出良好的应用前景，可能为更多更广泛的患者带来福音。-02-一、异基因CAR-T细胞的制造同种异体CAR-T细胞可以并且应该代替自体CAR-T细胞或与自体CAR-T细胞结合使用时，有几种情况：i）有阻碍自体产品制造的物流问题；ii）制造失败，其中同种异体产品可以替代自体产品，而不会延迟计划的输注；iii）当自体产品在患者体内无法扩增时，输注同种异体CAR-T细胞产品；iv）由于患者的T细胞数量较低和/或疾病进展迅速，无法预先制造自体CAR-T细胞产品；v） 异基因CAR-T细胞产品通过设计成为造血干细胞移植的桥梁。尽管使用同种异体CAR-T细胞进行治疗有许多优点，但这种技术有两个主要缺点。首先，受者的细胞对所给予CAR-T细胞的天然T细胞受体（TCR）可能诱导其激活并导致急性移植物抗宿主病（GvHD）。其次，CAR-T细胞对宿主免疫系统是外来的，这可能会导致它们迅速从循环中清除。因此，异基因CAR-T细胞的制造主要是通过各种手段破坏CAR-T细胞的TCR和MHC-1分子。破坏TCR可以通过三种不同的方式进行：抑制蛋白的表达；通过使用TALENS或CRISPR/Cas9敲除编码TCR链的基因；通过shRNA介导mRNA的沉默。上面的方法均不能从细胞群中100%的去除TCR。因此，剩余TCR+细胞的额外消耗是制造同种异体CAR-T细胞的一个重要部分，这在很大程度上决定了GvHD的发生和治疗效果。最先进的消除TCR +细胞的方法是基于CliniMACS™的装置。简言之，在引入CAR和TCR消除后，首先用生物素化的抗TCR抗体孵育T细胞，然后用与磁性微球结合的抗生物素抗体孵育T细胞。随后，残留的TCR+细胞被CliniMACS清除。此外，为了增加异基因CAR-T细胞的持久性，可以考虑通过基因敲除免疫排斥的关键介质MHC-I分子，这可以通过破坏编码β-微球蛋白的基因来实现。-03- 二、异基因CAR细胞的来源根据临床经验，同种异体CAR-T细胞清除肿瘤细胞的能力取决于初始扩增、持续时间、GvHD的发生以及宿主免疫系统排斥这些细胞的能力。在制定管理异基因CAR-T细胞的策略时，可以选择不同来源的细胞及细胞亚群。αβT细胞用于制造同种异体CAR-T细胞的T细胞主要来源于外周血单个核细胞，尤其是具有由α和β链组成的TCR的细胞，其构成健康供体循环T细胞的约90%。由于αβT细胞在外周血中的相对丰度和快速增殖的能力，它是制造同种异体CAR-T细胞的一个有吸引力的靶点。然而，该细胞亚群在急性和慢性GvHD的发病机制中起主要作用。因此，需要通过基因编辑手段破坏TCR，以减少发生GvHD的风险。病毒特异性T细胞除了基因编辑方法外，减轻GvHD的策略之一是使用基于病毒特异性T细胞的CAR-T细胞，这些细胞结合了CAR的抗肿瘤活性和降低GvHD风险。GvHD风险与TCR多样性相对应，因此，输注病毒特异性记忆T细胞后GvHD减少可能是由于病毒特异性记忆T细胞中TCR的功能受到限制。此外，这种策略的一个可能的不足是初始病毒特异性记忆T细胞的数量较低。γδT细胞供体来源的γδT细胞通过利用其固有受体以不依赖于MHC分子的方式识别多种肿瘤抗原，并且可以在没有TCR清除的同种异体环境中应用。此外，一旦激活，它们可以通过促进其他免疫细胞的功能，进而产生进一步的适应性免疫反应。诱导多能干细胞（iPSC）诱导多能干细胞应用于CAR-T具有显著的优势：iPSC具有自我更新能力，能够在体外长期培养，可以在体外进行各种复杂和精确的基因改造；iPSC具有分化为人体所有细胞类型的能力，可产生大量的功能性T细胞。尽管存在一些限制，但IPSC仍具有均匀和大规模生产的CAR-T细胞的潜力。NK细胞异基因NK细胞对于过继性细胞治疗（ACT）是相当安全的，因为它们通常不介导发生GVHD。此外，NK细胞仅分泌少量IFN-γ和GM-CSF，不产生启动CRS的IL-1和IL-6。其次，除了通过单链抗体识别肿瘤表面抗原来抑制癌细胞外，NK细胞还可以通过多种受体识别各种配体来抑制癌细胞，例如自然细胞毒性受体（NKp46、NKp44和NKp30）、NKG2D和DNAM-1（CD226）。最后，NK细胞在临床样本中非常丰富，可以从外周血（PB）、脐带血（UCB）、人类胚胎干细胞（HESC）、iPSC甚至NK-92细胞系中产生。-04-三、异基因CAR细胞治疗的临床试验ALLO-715抗BCMACAR-T细胞（NCT04093596）这是一项1期临床试验，招募患有r/r多发性骨髓瘤患者。截至2020年10月，共有31名患者纳入安全人群。疗效人群包括26名患者，分为四个剂量水平的细胞（40、160、320和480×106），平均随访时间为3.2个月。ALLO-715的CAR-T细胞受体包括具有4-1BB共刺激结构域的单链可变抗BCMA片段。为了防止移植物排斥反应，并在不影响ALLO-715 CAR-T细胞的情况下允许选择性淋巴细胞耗竭，引入了CD52和TRAC的KOs。26名患者的所有剂量组和淋巴清除方案的总有效率（ORR）为42%（11/26）。在接受320×106细胞ALLO-715治疗的10名患者中观察到了优越的抗癌活性。对于该队列，ORR为60%（6/10），其中4名患者（40%）观察到非常好的部分响应。在45%（14/31）患者中报告了CRS。一名患者在ALLO-715输注后一天出现非中性粒细胞减少性发热和多灶性肺炎，一次5级发作导致呼吸衰竭和死亡。研究认为这一事件与进行性骨髓瘤以及环磷酰胺和ALLO-647预处理方案有关。研究报告，42%（13/31）患者在治疗期间出现了感染性疾病，其中13%的患者出现了3级感染。未观察到GvHD或ICAN病例。ALLO-501抗CD19CAR-T细胞（NCT03939026）ALLO-501是一项针对复发/难治性非霍奇金淋巴瘤（r/r NHL）患者的I期临床试验，ALLO-501CAR-T基于小鼠CD19特异性单链抗体（4G7）。截至2021年4月19日，41例患者接受了ALLO-501治疗，有效人群包括32例患者，共三个剂量组（40, 120和360×106）。治疗包括先前的淋巴清除，包括使用氟达拉滨加环磷酰胺和ALLO-647。结果显示，整体ORR为75%（24/32），50%（16/32）完全缓解（CR）。研究报告11例（27%）患者出现轻度至中度CRS，1例（2%）出现3级神经毒性，登记患者中无GvHD。感染率为61%（25/41），与使用自体CAR-T细胞的试验中观察到的感染率相似。UCART19抗CD19CAR-T细胞UCART19是一种基于慢病毒转导CAR19并使用TRAC/CD52特异性TALENs的CAR-T细胞产品。TALENs用于在编码TCR和CD52α恒定链的基因中引入KOs，以最小化GvHD风险。用磁珠去除残留的TCR+细胞后，只有0.7%的细胞具有可检测的细胞表面TCR。在7名儿童的PALL试验和14名成人的CALM试验中，评估了UCART19的安全性和有效性。患者必须有CD19+B细胞急性淋巴细胞白血病的证据，在UCART19输注前，所有患者均进行了淋巴清除：17名患者（81%）给予了氟达拉滨、环磷酰胺和alemtuzumab，4名患者（19%）给予了氟达拉滨和环磷酰胺。PALL试验中的儿童接受UCART19（1.1–2.3×106/kg），CALM试验包括剂量递增阶段（6×106细胞、6–8×107细胞或1.8–2.4×108细胞）。全体患者和接受含alemtuzumab的淋巴清除患者的ORR分别为67%（14/21）和82%（14/17）。14名患者中有10名（71%）获得完全缓解，并继续进行异基因造血干细胞移植（HSCT）。研究报告，在2019年8月的数据截止日期，14名获得响应的患者中有10名（71%）随后复发或死亡。6个月时无进展生存率为27%。UCART19观察到的副作用似乎与报道的自体抗D19 CAR-T细胞的副作用相似。CRS是UCART19治疗最常见的不良事件（91%的患者），等级≥3的CRS出现在三名患者中。只有两名患者（10%）在UCART19输注后出现1级GvHD。CTX110抗CD19CAR-T细胞（NCT04035434）UCART19和其他CAR-T细胞使用随机整合的病毒将编码CAR结构的基因传递给T细胞DNA。CRISPR Therapeutics使用CRISPR/Cas9将CAR结构精确插入TRAC位点。CTX110是使用该技术靶向CD19+B细胞恶性肿瘤的CAR-T细胞。目前，正在进行的1期CARBON临床试验评估了CTX110在11例患有r/r NHL患者中的安全性和有效性。11名患者在使用氟达拉滨和环磷酰胺进行淋巴细胞清除后，以四种剂量水平（30、100、300或600×106）输注CTX110细胞。结果显示，在30–300×106 剂量组中，没报告有GvHD病例。其它不良反应包括3例等级≤2的CRS（30%）和1例2级ICAN（10%）。36%（4/11）的患者获得CR。PBCAR0191抗CD19CAR-T细胞（NCT03666000）Precision BioSciences公司的同种异体产品PBCAR0191使用了基于I-CreI归巢内切酶的通用基因组编辑平台ARCUS，将CD19特异性CAR插入TRAC位点。I期临床研究的初步数据显示， 27例患者（16例为r/r NHL，11例为r/r B-ALL）中，所有剂量组的ORR和CR分别为55%（15/27）和37%（10/27）。最近，另一项研究报告了PBCAR0191高剂量（3×106个细胞）并伴有增强淋巴清除（氟达拉滨加环磷酰胺）的患者队列的临床结果。试验共纳入21例患者，包括16例非霍奇金淋巴瘤患者和5例B-ALL患者，对其中13例NHL患者和5例ALL患者的治疗效果进行了评估。结果显示，ORR为83%（15/18），CR为66%（12/18）。大多数不良事件是轻微的，在1例NHL患者中观察到ICANS 3级，在31%（5/16）NHL患者中观察到3级感染，在80%（4/5）B-ALL患者中观察到3级感染，未观察到GvHD的证据。CYAD-101（NCT03692429）CYAD-101是由Celyad Oncology开发的一款基于NKG2D受体和TCR抑制分子（TIM）的非基因编辑同种异体CAR-T细胞。NKG2D受体可以识别表达在大多数实体瘤和血癌细胞表面的8种不同的配体，使其可以同时靶向多种不同的癌症；TIM旨在消除负责GvHD的免疫反应，从而避免GvHD。CYAD-101在不可切除转移性结直肠癌患者的alloSHRINK I期研究中进行了评估。在标准预处理化疗（FOLFOX）后，15名患者接受三种剂量水平中的一种（每次输注1×108、3×108或1×109细胞）。研究没有报告剂量限制性毒性或GvHD。在15名患者中，2名（13%）患者获得部分缓解（PR），9名（60%）患者病情稳定（SD）。CIK抗CD19细胞（NCT03389035）有研究提出了一种基于“睡美人”转座子系统的异基因CAR-T细胞，用CARs产生CIK细胞。根据CIK细胞方案，刺激细胞分化为记忆T细胞亚群。在多中心临床研究中（NCT03389035），对13例HSCT后复发的B-ALL患者使用CARCIK-CD19细胞。研究没有报告ICANS或GvHD病例，唯一的严重不良事件是接受最高剂量治疗患者出现的两例1级和2级CRS。61.5%的患者出现完全缓解，而在接受两种最高剂量的6名患者中，85.7%的患者出现完全缓解。ATA188（NCT03283826）ATA188是一款由Atara公司开发的异基因EBV特异性T细胞免疫疗法。在针对多发性硬化症的的I期试验中评估了ATA188这种EBV特异性T细胞亚群的初步疗效和安全性。结果显示，在输注ATA188细胞后无GvHD或CRS的记录，进行性多发性硬化症患者对ATA188耐受性良好，未见剂量限制性毒性。Vγ9Vδ2 T细胞异基因Vγ9Vδ2 T细胞治疗在晚期恶性肝癌（NCT03183232）、肺癌（NCT03183219）、胰腺癌（NCT03183206）或乳腺癌（NCT03180437）中进行了临床评估。输注异基因Vγ9Vδ2 T细胞后未报告重大不良事件（CRS、GvHD）。NK细胞关于工程化异基因CAR-NK细胞，有研究报告了一期和二期试验的结果，其中11名r/r NHL或CLL患者接受了来自脐血的HLA不匹配的抗CD19 CAR-NK细胞治疗。研究没有报告CRS、ICAN和GvHD，所有患者都有可逆的血液毒性事件，主要与淋巴细胞清除有关。在平均13.8个月的随访中，7名患者（64%）完全缓解。在唯一完成的针对AML患者靶向CD33的CAR-NK-92试验中，在输注CD33-CAR NK-92细胞后仅有两例I级CRS，无GvHD病例。然而，不幸的是，两名患者复发，一名患者对治疗无反应。-05-结语显然，使用来自健康捐赠者的CAR-T细胞产品是有利的，因为它对患者的免疫状态依赖性较小，更标准化，并且由于生产成本较低，大大扩大了患者获得治疗的机会。此外，还必须考虑到，在疾病迅速发展时，自体CAR-T细胞制造所需的时间是一个关键因素；另外，一小部分患者可能永远无法获得数量、质量良好的自体CAR-T细胞。然而，异基因CAR-T细胞可能导致GvHD，并且自身可能被受体的免疫系统排斥。此外，与自体CAR-T细胞相比，同种异体CAR-T细胞的疗效和应答率较低，这在很大程度上归因于其较低的持久性。但从长远来看，这也可能是一种安全优势。目前，多项研究正在临床中检验不同靶点和不同技术平台开发的异基因CAR-T细胞疗法，随着现有技术的进一步成熟和新技术的开发，相信异基因CAR-T细胞疗法终将会使更多的肿瘤患者受益。参考资料：1.Strategies to Circumvent the Side-Effects of Immunotherapy Using Allogeneic CAR-T Cells and Boost Its Efficacy: Resultsof Recent Clinical Trials. Front Immunol. 2021; 12: 780145.公众号内回复“ADC”或扫描下方图片中的二维码免费下载《抗体偶联药物：从基础到临床》的PDF格式电子书！公众号已建立“小药说药专业交流群”微信行业交流群以及读者交流群，扫描下方小编二维码加入，入行业群请主动告知姓名、工作单位和职务。

2月25日，Biotech科济药业宣布珠海横琴软银欣创股权投资管理企业（有限合伙）旗下基金达成协议，共同投资优恺泽生物医药（上海）有限公司，本次投资结构如下：科济药业将通用型BCMA CAR-T细胞产品、通用型CD19/CD20 CAR-T细胞产品的中国内地权益授予优恺泽，而珠海软银欣创则是投资8000万元人民币进行注册资本认购，本次投资完成后科济药业对优恺泽股权稀释至92%，而珠海软银欣创则是获得优恺泽8%股权。 从投资结构来看，可以视为一次国内版的“Newco”，而珠海软银欣创对科济药业子公司优恺泽高达10亿元，也点燃了二级市场的情绪，科济药业今天暴涨超过21%。 优恺泽本轮融资的投资机构珠海软银欣创“来头不小”，其执行性事务合伙人为深圳凯银合创企业管理有限公司，该公司法人正是软银中国合伙人江敏。 软银中国聚焦于信息技术和医疗健康两大领域，过去投出了多家上市公司，包括迪安诊断、普门科技、理邦仪器和华大基因等等。2023-2024年以来，软银中国出手次数并不多。 软银中国看中了优恺泽哪些价值？这次投资事件的估值是否受到地方落地事务的影响而产生高溢价？ 01 优恺泽的两款产品 优恺泽两款产品源于科济药业的通用型CAR-T平台，从披露的靶点上看大概率是CT0590或和CT059X、KJ-C2219，目前这些管线都处于IIT试验阶段。 （图源：科济药业官网） 先提一嘴IIT试验，IIT试验为研究者发起的临床试验，产出数据严格程度通常低IND后的临床（多用于支持新药上市申请的辅助性材料），一般不能替代常规I期临床；不过在一些情况下，IIT试验试验数据可以为IND申请提供支持性数据，可凭此豁免部分I期临床试验，直接进入II期临床试验，科济药业过往有过类似案例。 我们在《双抗后，下一个国产BD风口》提到，通用CAR-T能够突破自体CAR-T疗法的生产成本高、生产时间长等局限性，同时有数据表明可以将CAR-T定制成本从自体疗法的近10万美金降至未来的不到5000美元（单次生产可治疗100名患者），患者可及性极大增强。 不过，通用CAR-T的研发挑战主要集中在移植物抗宿主病（GvHD）、宿主抗移植物反应（HvGR）和疗效持久时间短几个大的问题。 据科济药业披露THANK-uCAR®技术平台，公司不仅采用了传统的敲除TRAC减少GvHD，还通过敲除B2M降低宿主T细胞的排异反应同时减少HvGR，创新性的敲除NKG2A增强通用CAR-T产品的抗肿瘤功能，并且在CAR-T表面装载一个能够识别NK细胞表面NKG2A蛋白的CAR作为反击NK细胞的工具。 从2024 ASH大会披露的IIT数据看，CT0590治疗5位复发/难治性多发性骨髓瘤患者，中位随访时间为16.6个月，其中3例患者获得缓解，包括2例严格完全缓解（sCR）和1例部分缓解（PR）。值得注意的是，2例sCR患者的缓解持续时间（DOR）分别为23个月和20个月，CAR拷贝数峰值大于280000 copies/µg genomic DNA。 IIT小样本数据初步验证了公司THANK-uCAR®技术平台的可行性，具体表现包括患者的安全性良好（无3级及以上CRS、未出现GvHD和没有出现出现DLT等安全性信号）、部分患者体内CAR拷贝数峰值与BCMA CART相当等。 这一早期数据催化可能也是软银中国愿意目前以“溢价”认购仅有中国内地权益优恺泽股份的重要原因，主讲一个通用CAR-T疗法可及性的故事。 科济药业在THANK-uCAR®技术平台的基础上，开发了更强一代的Plus技术平台，以确保不同NKG2A表达水平下平台产品可持续扩增的表现。 一项公司举行的对比数据显示，CT0590在NKG2A低水平表达的情况下，扩增在72小时下降，而Plus平台的CT059X的扩增则是在持续增加。另外，Plus平台下的通用型CD19/CD20 CAR-T在淋巴瘤模型中展现出较一般单靶通用型CAR-T更强的抗肿瘤效果。 02 海外通用CAR-T技术发展 全球范围来看，通用型CAR-T疗法的Biotech不在少数，近来该领域最大的一笔交易波过于罗氏以15亿美元交易总价收购Poseida Therapeutics（目前科济药业的市值正在逼近该交易总价值）。 Poseida这家通用CAR-T公司技术特点非常鲜明，其产品采用的T细胞是来源外周血单个核细胞的干细胞记忆型T细胞（半衰期超长），公司采用的CAR-T基因改造工具平台为Cas-CLOVER基因编辑系统（一种易于操作、高精确度的基因编辑技术），以及自有的Poseida生产制造平台（一次生产高达数百剂、纯度高）等。 Poseida进度最快的核心管线是靶向BCMA的P-BCMA-ALLO1，已经公布的复发性/难治性多发性骨髓瘤患者的一期临床数据显示，23例患者中治疗组达到高达91%的ORR，而在未接受BCMA靶向治疗的患者中，ORR升至100%；但在接受过至少一次BCMA靶向治疗的患者中，ORR也高达86%。同时，患者的安全性良好，大多数患者CRS、ICANS等副作用只有1级或2级。 在全球通用CAR-T疗法较为知名及进度靠前的Biotech还有Allogene Therapeutics和Wugen。 Allogene的技术路线是部分海外Biotech开发通用CAR-T疗法的一个缩影，坚持采用敲除CD52的路线（克服免疫排斥反应如HvGR、GVHD并增强治疗效果），不过这种路线对患者预处理有很高的要求（使用经典清淋方案基础上接受CAR-T治疗前需要接受CD52抗体治疗将患者体内的CD52阳性细胞，如T细胞和NK细胞耗竭掉）。 Allogene核心产品ALLO-501（Cemca-cel）最新在JCO发表的I期临床数据显示，在33名未经CD19 CAR-T治疗的R/R大B细胞淋巴瘤（LBCL）患者中，取得ORR和CR分别为67%、58%。该研究取得ORR和CR率与已获批的自体CD19 CAR-T细胞在二线后R/R LBCL患者中疗效相当，同时安全性良好（未观察到DLT、GvHD、ICANS和高等级的CRS等安全性信号）。 Wugen公司的通用CAR-T产品WU-CART-007在全球临床进度上名列前茅（临床二期），其技术特点是利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除CD7和T细胞受体恒定区（TRAC），防止CAR-T细胞自相残杀并达到降低GvHD的风险。 在去年6月公布的治疗复发/难治性（R/R）T细胞急性淋巴细胞白血病/淋巴瘤（T-ALL/LBL）临床二期数据显示，在13名患者（38%接受同种异体干细胞移植患者进展或复发）中，73%患者达成复合完全缓解率（CRc）的主要终点，总ORR高达91%，该数据进一步证实了其拥有优于当前R/R T-ALL/LBL标准疗法的疗效潜力。 以上不难看出，目前全球通用CAR-T疗法处于价值兑现的在早期，随着更多的问题被解决，有望带来新一波BD浪潮。 03 科济药业的价值支撑 通用CAR-T的叙事虽然宏大，但真正的价值验证需要实打实的数据支撑。 当下，错失上一波自体CAR-T出海浪潮的科济药业，主要市值支撑仍在于其CAR-T技术突破实体瘤的管线CT041。 去年年底CT041治疗二线后晚期胃/食管胃结合部腺癌患者的关键II期已取得阳性结果，未来有望在国内实现商业化；据过往CT041的IIT临床数据显示，在51例存在靶病灶的胃癌/食管胃结合部腺癌患者中，ORR和DCR分别为54.9%和96.1%，没有发生DLTs、3级或以上CRS等严重副作用。 对比现有晚期胃癌后线疗法，CT041的mPFS和mOS有很大的优势，但考虑到其未来的主要竞争对手为CLDN18.2 ADC，尽管非头对头数据对比下目前仍有一定优势且国内晚期胃癌存在大量为满足临床需求，但自体CAR-T的可及性预计将低于ADC药物，如果没有碾压性的疗效优势，商业化前景仍然需要验证。 另外，CT041的BD也是投资者关注的一个焦点，数据显示胃癌每年新增患者有超过76%在亚洲地区，这意味着这在欧美不算是一个大适应症，未来BD交易的体量也应顺势放低预期（同时考虑CT041疗效在不同人群的差异性）。 由此，科济药业若想在市值上更近一步，需要CT041的BD授权助力或未来商业化验证，又或者通用CAR-T疗法管线的BD和进一步的数据验证。 结语：回到原点，软银中国对于科济药业子公司优恺泽的下注，一定程度代表了其对公司通用CAR-T技术的认可和未来通用CAR-T商业化可及性的关注，同时给国内甚至全球致力通用CAR-T技术开发的研发者带来更多信心。 识别微信二维码，添加抗体圈小编，符合条件者即可加入抗体圈微信群！ 请注明：姓名+研究方向！ 本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。