Dutasteride

FOUNDER’S JOURNAL  /  毛发再生研究观察近五年毛发再生研究全景从“唤醒原有毛囊”到“构建新毛囊” From Reactivating Existing Follicles to Engineering New Ones: A Five-Year View of Hair-Regeneration Research HAIRMOZZ茂丝 × 前沿信号通路 × 微生态分型落地 范围 / Scope：2021—2026年9月。本文聚焦近五年毛囊再生领域的重要进展，区分疾病机制、信号通路、临床干预与组织工程等不同证据阶段。实验室或动物研究与人体临床结果分开讨论；HAIRMOZZ茂丝部分重点呈现 FCST™、NPTDT™、FMHT™、HMFRT™ 及 MAX / MORE / BASE / CARE 的技术逻辑与分型实践。 This article reviews major advances in hair-follicle regeneration from 2021 through September 2026, distinguishing among disease mechanisms, signaling pathways, clinical interventions, and tissue-engineering approaches at different stages of evidence. Laboratory and animal studies are discussed separately from human clinical outcomes. The HAIRMOZZ section focuses on the technical rationale and stratified application of FCST™, NPTDT™, FMHT™, and HMFRT™, together with the MAX / MORE / BASE / CARE system.摘要 / Takeaway 过去五年，毛发再生研究最重要的变化，是从“单一成分促生长”转向把毛囊理解为一个由上皮、真皮凝集体/毛乳头、免疫、脂肪组织、血管与代谢状态共同调控的微型器官。Wnt/β‑catenin、SHH、BMP、Notch 等网络参与毛囊发生与周期转换；AR–DHT 轴是雄激素性脱发（AGA）的核心病理轴之一，细胞因子–JAK 信号则与斑秃（AA）的免疫病理密切相关。距离临床应用最近的仍是“保护或重新激活现有毛囊 + 按病因干预”；真正从零构建能长期、定向、周期性生长的新毛囊，仍面临细胞来源、空间组织、血供整合、免疫与长期安全性等问题[1–3]。 Over the past five years, one of the most important shifts in hair-regeneration research has been the move away from a “single growth-promoting ingredient” model toward understanding the hair follicle as a mini-organ jointly regulated by epithelium, dermal condensates/dermal papillae, immune cells, adipose tissue, vasculature, and metabolic state. Wnt/β-catenin, SHH, BMP, and Notch signaling networks participate in follicle morphogenesis and hair-cycle transitions; the AR–DHT axis is a central pathological driver of androgenetic alopecia (AGA), whereas cytokine–JAK signaling is closely linked to the immune pathophysiology of alopecia areata (AA). The approaches closest to clinical practice remain preservation or reactivation of existing follicles together with cause-directed intervention. De novo generation of follicles capable of durable, oriented, cyclic growth still faces major challenges in cell sourcing, spatial organization, vascular integration, immune compatibility, and long-term safety[1–3]. 在 HAIRMOZZ茂丝，我们没有把生发理解为“找到一条万能通路”。真正有效的毛囊管理，需要把毛囊活性、局部递送、头皮微生态和结构支持拆开判断，再重新组合成可检测、可分型、可复测的方案。FCST™（毛囊细胞信号传导）围绕与毛囊生长期相关的信号网络建立管理逻辑；NPTDT™（纳米多肽透皮递送）负责局部递送支持；FMHT™（毛囊微生态稳态）从油脂、屏障、头屑/炎症与微生态状态进行分型；HMFRT™（微纤维再生）聚焦 ECM、基底膜与结构支持。四类技术与 MAX / MORE / BASE / CARE 形成“检测 → 分型 → 针对性管理 → 复测”的闭环。 At HAIRMOZZ, we do not reduce hair regeneration to a single “universal” pathway. Effective follicular management requires separate assessment of follicular activity, local delivery, scalp microecology, and structural support, followed by integration into a plan that can be measured, stratified, and reassessed. FCST™ (follicular-cell signal transduction) organizes management around signaling networks associated with anagen; NPTDT™ (nano-peptide transdermal delivery) provides localized delivery support; FMHT™ (follicular microecology homeostasis) stratifies scalp status by sebum, barrier condition, dandruff/inflammation, and microecology; and HMFRT™ (microfibril regeneration) focuses on ECM, basement-membrane, and structural support. Together with MAX / MORE / BASE / CARE, these technologies form a closed loop of detection → stratification → targeted management → reassessment.一、先分清：让旧毛囊长发，还是生成新毛囊？ 雄激素性脱发（AGA）的典型病理过程是现存毛囊逐步微型化、毛干变细及生长期缩短；斑秃（AA）则属于免疫介导的非瘢痕性脱发。让休眠或微型化的原有毛囊恢复产出、把已有毛囊移植到新的位置，以及在原本缺乏毛囊的区域从头形成完整的新毛囊，是三种不同的技术目标。当前成熟临床证据主要集中在前两类；第三类仍以机制、组织工程与临床前转化为主[1–3]。 Androgenetic alopecia (AGA) is typically characterized by progressive miniaturization of existing follicles, reduced hair-shaft caliber, and shortening of the anagen phase; alopecia areata (AA) is an immune-mediated, non-scarring form of hair loss. Reactivating dormant or miniaturized native follicles, transplanting existing follicles to a new site, and generating a complete new follicle de novo are three distinct technical goals. Mature clinical evidence currently centers on the first two, whereas de novo follicle generation remains largely within mechanistic research, tissue engineering, and preclinical translation[1–3]. 真正进入方案前，第一步不是先讨论“能不能长”，而是确认毛囊单位是否仍然存在、是否以非瘢痕性微型化为主，以及是否伴随明显炎症、屏障受损或其他需要医学评估的信号。若毛囊口消失、出现瘢痕样改变、渗液/脓疱或快速进展，应优先进入皮肤科/毛发专科诊断路径。 Before any intervention is selected, the first question is not simply whether hair can grow back, but whether follicular units are still present, whether the dominant process is non-scarring miniaturization, and whether there is significant inflammation, barrier disruption, or another finding that warrants medical evaluation. Loss of follicular openings, scar-like change, exudation/pustules, or rapid progression should prompt dermatologic or hair-specialty evaluation first.二、毛囊不是单个开关：细胞 + 信号双层地图 在 HAIRMOZZ茂丝的研发与分型体系中，我们把毛囊关键细胞与现代信号网络放在同一张地图上理解： Within the HAIRMOZZ research and stratification framework, we map the key follicular cell populations together with the modern signaling networks that regulate them:2.1 毛乳头细胞 DPCs｜Dermal Papilla Cells 定位：位于毛球底部的特化间充质细胞群，是调控毛囊大小、周期与毛干形成的重要信号中心。 Location: a specialized mesenchymal cell population at the base of the hair bulb that serves as a major signaling center governing follicle size, cycling, and hair-shaft formation. 机制要点：从休止期进入生长期并非由 DPCs 单独“分泌某一种 Wnt”完成，而是多个细胞区室共同参与的 Wnt/BMP 等信号平衡。毛乳头可提供 FGF7/10、TGF‑β2、Noggin 等促激活线索，降低 BMP 相关静息阈值；其与上皮细胞、血管及周围基质的双向通讯共同决定毛囊是否进入新的生长期[1]。 Mechanistic point: the transition from telogen to anagen is not driven by dermal papilla cells simply “secreting one Wnt.” Rather, it reflects the coordinated balance of Wnt/BMP and other signals across multiple cellular compartments. The dermal papilla provides pro-activation cues including FGF7/10, TGF-β2, and Noggin, helping lower BMP-associated quiescence, while bidirectional communication with epithelial cells, vasculature, and the surrounding matrix contributes to anagen entry[1].2.2 毛囊干细胞 HFSCs｜Hair Follicle Stem Cells 定位：主要位于毛囊隆突区（Bulge）及与毛胚/外根鞘相关的干细胞区室；K15、LGR5 等可作为不同亚群或阶段的常用标志物，但表达具有物种、区段与周期差异。 Location: primarily within the bulge and the stem/progenitor compartments associated with the hair germ and outer root sheath. K15, LGR5, and related markers identify different stem/progenitor subsets or stages, with expression varying by species, follicular region, and hair-cycle phase. 功能：HFSCs 在休止期维持相对静息，在合适的微环境信号下进入活化与分化。Wnt/β‑catenin 是生长期启动的重要轴，但必须与 BMP、SHH、Notch 等网络在正确的细胞、时间和空间中协同；简单“把 Wnt 调高”并不等于可以安全、持续地长出新毛囊[1,5]。 Function: HFSCs remain relatively quiescent during telogen and enter activation and differentiation in response to an appropriate niche. Wnt/β-catenin is a major axis for anagen initiation, but it must act in coordination with BMP, SHH, Notch, and other networks in the correct cells, at the correct time, and in the correct spatial context. Simply “turning up Wnt” does not equate to safe, durable de novo follicle formation[1,5].2.3 毛母质细胞｜Matrix Cells 定位与功能：毛球部的快速增殖祖细胞群围绕毛乳头分布，在信号驱动下持续增殖并向上分化，形成内毛根鞘与毛干的不同层次。 Location and function: rapidly proliferating progenitor cells in the hair bulb surround the dermal papilla and, under niche-derived signals, continuously proliferate and differentiate upward to form the distinct layers of the inner root sheath and hair shaft. 角蛋白表达具有明确的区室差异：内毛根鞘常见 K25–28 与 K71–74；毛干则以 K31–40 与 K81–86 等毛发角蛋白为代表。毛母质增殖/分化异常或过度凋亡，可表现为毛干形成受损与直径下降。 Keratin expression is strongly compartment-specific: the inner root sheath commonly expresses K25–28 and K71–74, whereas the hair shaft is characterized by hair keratins including K31–40 and K81–86. Abnormal matrix-cell proliferation/differentiation or excessive apoptosis can impair shaft formation and reduce hair caliber.2.4 黑素细胞｜Melanocytes 定位：生长期毛球的色素单位与毛母质细胞相邻；成熟黑素细胞合成真黑素/褐黑素并将黑素体转运至形成中的毛干。白发与黑素细胞干细胞耗竭、迁移/分化异常及氧化应激等多因素有关，不能简化为单一“黑素细胞衰退”。 Location: during anagen, the follicular pigmentary unit lies adjacent to matrix cells in the hair bulb. Mature melanocytes synthesize eumelanin and pheomelanin and transfer melanosomes into the developing hair shaft. Hair graying is multifactorial, involving melanocyte stem-cell depletion, altered migration/differentiation, oxidative stress, and other processes rather than a single mechanism of “melanocyte decline.”2.5 系统层四条轴｜Systemic axes 系统层面可概括为：Wnt/β‑catenin 参与毛囊发生与生长期激活；SHH 参与形态发生、祖细胞扩增与上皮–间充质互作；BMP 在休止期有助维持静息，并在不同阶段参与分化；Notch 参与细胞命运与分化。AGA 还叠加 AR–DHT、TGF‑β 等病理轴；AA 则以免疫细胞因子–JAK 信号为重要通路[1,2,5]。 At the systems level, Wnt/β-catenin contributes to follicle morphogenesis and anagen activation; SHH participates in morphogenesis, progenitor expansion, and epithelial–mesenchymal interactions; BMP helps maintain quiescence during telogen while also contributing to stage-dependent differentiation; and Notch regulates cell fate and differentiation. AGA additionally involves pathological axes such as AR–DHT and TGF-β, whereas immune cytokine–JAK signaling is a major pathway in AA[1,2,5].2.6必须讲清楚的 HAIRMOZZ 与耶鲁故事：Wnt × SHH 耶鲁大学团队 2022 年发表于 Developmental Cell 的研究，利用单细胞测序、遗传扰动与计算分析，在小鼠胚胎皮肤中解析了 Wnt/β‑catenin 与 SHH 两种形态发生信号的时空交互如何推动 Dkk1 阳性前体走向真皮凝集体（dermal condensate），这一结构是后续毛乳头信号中心的重要前体。研究价值在于解释“诱导性真皮微环境如何被建立”，并为实验室重建毛囊提供生物学蓝图[5,6]。这也解释了为什么 HAIRMOZZ茂丝持续强调“信号网络 + 毛囊生态位”：毛囊进入新的生长周期，不是把某一条通路单独拉高，而是细胞身份、时空信号与局部微环境共同作用的结果。 A 2022 Developmental Cell study from a Yale team used single-cell sequencing, genetic perturbation, and computational analysis in mouse embryonic skin to show how the spatial and temporal interplay between Wnt/β-catenin and SHH drives Dkk1-positive progenitors toward a dermal condensate, an important precursor of the future dermal papilla signaling center. The study helps explain how an inductive dermal microenvironment is established and provides a biological blueprint for laboratory follicle reconstruction[5,6]. This also helps explain why HAIRMOZZ emphasizes “signaling networks + the follicular niche”: entry into a new growth cycle is not achieved by simply amplifying a single pathway, but by coordinated interactions among cell identity, spatial-temporal signaling, and the local microenvironment. Yale Ventures 的 NuFoll 技术转化页面进一步提出，通过小分子作用于两个细胞靶点、重编程真皮细胞以形成真皮凝集体。公开页面仅以 “Target X / Target Y” 代称靶点，因此现阶段不能自行把二者等同于 Wnt 与 SHH；该项目目前仍处于临床前技术转化阶段[7]。 The Yale Ventures NuFoll technology-transfer page further proposes reprogramming dermal cells through small molecules acting on two cellular targets to promote dermal-condensate formation. The public page refers to these targets only as “Target X” and “Target Y”; at present, they should not be assumed to correspond to Wnt and SHH. The program remains at a preclinical translational stage[7].三、近五年四条技术链路：从信号到产品3.1 调控原有毛囊（最接近应用） 针对 AGA 病因轴的药物研发正在从传统受体阻断走向更精细的靶向机制。外用 AR 蛋白降解剂 GT20029 的多中心随机双盲Ⅱ期研究于 2025 年发表：180 名 Hamilton–Norwood IIIv–V 男性接受 12 周治疗，部分给药方案较安慰剂改善目标区域非毳毛计数，提示潜在疗效，但疗程、长期安全性及更广泛人群仍需进一步验证[4]。另一条路线是毛囊干细胞代谢调控：PP405 为局部 MPC 抑制剂，2025 年公司公布的Ⅱa期顶线结果显示主要安全终点达成，并出现早期探索性毛发密度信号；截至 2026 年仍属在研药物，后续晚期临床开发仍需正式数据验证[8,9]。两者的共同点是尝试恢复现有毛囊/毛囊单位功能，而不是证明可以“批量制造全新毛囊”。 Drug development targeting the pathogenic axis of AGA is moving beyond conventional receptor blockade toward more precise mechanisms. A multicenter, randomized, double-blind phase 2 study of the topical androgen-receptor (AR) degrader GT20029 was published in 2025: 180 men with Hamilton–Norwood IIIv–V AGA received 12 weeks of treatment, and selected dosing regimens improved target-area non-vellus hair counts versus placebo. The findings suggest potential efficacy, although treatment duration, long-term safety, and performance in broader populations require further validation[4]. A separate strategy targets hair-follicle stem-cell metabolism. PP405 is a topical mitochondrial pyruvate carrier (MPC) inhibitor; company-reported phase 2a topline results in 2025 met the primary safety endpoint and showed an early exploratory signal in hair density. As of 2026, PP405 remains investigational, and later-stage development still requires confirmation in complete clinical datasets[8,9]. Both approaches aim to restore function in existing follicles/follicular units rather than demonstrate the mass creation of entirely new follicles.3.2 调节微环境 富血小板血浆（PRP）、光生物调节（PBM）、细胞治疗及其分泌组/外泌体，都在尝试改变生长因子、炎症、代谢与细胞间通讯。近年综述显示：PRP 的临床研究数量最多，但制备、剂量和终点尚不统一；PBM 作为单药的证据仍受设备参数与研究异质性影响；干细胞与外泌体有早期临床信号，但标准化、安全性与监管证据仍不足。机械刺激及脂肪–毛囊代谢通讯同样是活跃研究方向，其中不少结果仍来自动物或机制研究，不能直接等同于成熟临床疗法[3,10,11]。 Platelet-rich plasma (PRP), photobiomodulation (PBM), cell-based therapies and their secretomes/exosomes all seek to modify growth-factor signaling, inflammation, metabolism, and intercellular communication. Recent reviews indicate that PRP has the largest clinical evidence base, but preparation methods, dosing, and endpoints remain heterogeneous; evidence for PBM as monotherapy is still affected by variation in device parameters and study design; and stem-cell/exosome approaches show early clinical signals but still lack robust standardization, safety, and regulatory evidence. Mechanical stimulation and adipose–follicle metabolic crosstalk are also active research areas, with many findings still derived from animal or mechanistic studies rather than established clinical therapy[3,10,11].3.3 构建新毛囊（机制与转化阶段） 真皮乳头/上皮细胞共培养、诱导多能干细胞（iPSC）来源组织、三维水凝胶支架与生物打印，核心目标都是重建毛囊发生所需的上皮–间充质空间关系。Kang 等的明胶–海藻酸盐 3D 生物打印研究（2022 年在线发表，2023 年正式刊载）在体外构建毛囊样结构，并在裸鼠创面模型观察到毛囊形成，但距离人类头皮上稳定、定向、长期循环生长仍有明显转化距离[12]。Kageyama 等 2026 年进一步使用人 iPSC 来源外胚层前体细胞，与小鼠胚胎间充质细胞共同形成嵌合毛囊类器官并观察到毛囊萌发；研究者也明确指出，仍需建立人源间充质层，才能迈向“全人源”毛囊类器官[13]。 Dermal-papilla/epithelial co-culture, induced-pluripotent-stem-cell (iPSC)-derived tissues, 3D hydrogel scaffolds, and bioprinting all aim to reconstruct the epithelial–mesenchymal spatial relationships required for follicle induction. A gelatin–alginate 3D bioprinting study by Kang et al. (published online in 2022 and in final issue form in 2023) generated follicle-like structures in vitro and observed follicle formation in a nude-mouse wound model, but substantial translational barriers remain before stable, oriented, long-term cyclic growth can be achieved on the human scalp[12]. In 2026, Kageyama et al. used human iPSC-derived ectodermal precursor cells together with mouse embryonic mesenchymal cells to generate chimeric hair-follicle organoids with follicular sprouting. The authors also noted that a human mesenchymal layer is still needed to move toward a fully human hair-follicle organoid system[13].3.4 按病因恢复毛发，而非混用“再生”概念 严重斑秃的 JAK 抑制剂已有随机Ⅲ期证据，例如巴瑞替尼在两项 BRAVE-AA 试验中改善了严重 AA 的头皮毛发再生结局[2]。其逻辑是抑制异常免疫信号，使仍存在的毛囊恢复生长，而不是“新造毛囊”；这类证据不能直接外推到 AGA。产后、快速减重、疾病/药物相关或压力诱发的休止期脱发，则应首先寻找和纠正诱因，并结合铁代谢、甲状腺、营养与其他必要检查进行评估；头皮护理可作为支持，但不能替代病因处理。 JAK inhibitors have randomized phase 3 evidence in severe alopecia areata; for example, baricitinib improved scalp-hair regrowth outcomes in the two BRAVE-AA trials[2]. Their therapeutic logic is to suppress abnormal immune signaling so that existing follicles can resume growth, rather than to create new follicles. This evidence should not be extrapolated directly to AGA. Postpartum, rapid-weight-loss, illness/medication-associated, or stress-induced telogen effluvium should first be evaluated for underlying triggers, with assessment of iron status, thyroid function, nutritional factors, and other indicated causes; scalp care may provide supportive management but does not replace treatment of the underlying cause.四、HAIRMOZZ茂丝：把“信号 + 微生态 + 结构 + 复测”变成可交付矩阵4.1 MAX 生发系统｜信号唤醒 MAX 生发系统FCST™ 毛囊细胞信号传导以 Wnt/β‑catenin 为主，协同 PI3K/AKT 抗凋亡、MAPK、VEGF 微循环，面向 Norwood/Hamilton 3–7 级、遗传/雄脱/脂溢性、明显微小化；NPTDT™ 纳米多肽透皮把活性信号肽/蛋白送到毛乳头与隆突区，降低不必要的系统吸收。对应“DPCs 补 Wnt 类信号 → HFSCs 解休眠 → BMP/Noggin 再平衡”。 In the MAX Hair Growth System, FCST™ follicular-cell signal transduction centers on Wnt/β-catenin, with coordinated support from PI3K/AKT anti-apoptotic signaling, MAPK, and VEGF-mediated microcirculatory support. It is positioned for Norwood/Hamilton grades 3–7, hereditary/androgenetic or seborrheic-associated hair loss, and marked follicular miniaturization. NPTDT™ nano-peptide transdermal delivery is designed to deliver active signaling peptides/proteins to the dermal papilla and bulge regions while limiting unnecessary systemic exposure. Mechanistically, the framework can be summarized as: DPCs replenish Wnt-related signals → HFSCs exit dormancy → BMP/Noggin balance is restored.4.2 MORE 头皮抗衰系统｜营养与结构支持 MORE 定位于头皮营养、紧致与年轻态管理，核心关注头皮 ECM、基底膜和胶原网络所形成的“结构性生态位”。其技术结构由 NPTDT™ + HMFRT™ 组成，通过结构蛋白与营养支持改善头皮力学环境与发根支撑感，适用于头皮松弛、发根支撑下降、轻度稀疏伴头皮老化表现等场景。核心目标是让头皮从“表面护理”进一步进入基底膜、胶原网络与组织力学层面的年轻态管理。 MORE is positioned for scalp nutrition, firmness, and skin-longevity management, with particular focus on the “structural niche” formed by the scalp ECM, basement membrane, and collagen network. Its technical framework combines NPTDT™ + HMFRT™, using structural-protein and nutritional support to improve the scalp’s mechanical environment and root support. It is designed for scalp laxity, reduced root support, and mild thinning associated with signs of scalp aging. The goal is to extend scalp care beyond surface maintenance toward longevity management at the level of the basement membrane, collagen network, and tissue mechanics.4.3 BASE 问题肌系统｜屏障、油脂与微生态稳态 BASE 从油、屑、敏、红/炎等头皮问题切入，把微生物控制、蛋白酶炎症、氧化应激与屏障/基底膜支持放在同一套稳态逻辑中。它不是单纯“控油去屑”，而是针对头皮问题肌的多通路管理：一边降低异常微生物与蛋白酶负担，一边减轻炎症放大，同时为屏障与 ECM 稳态提供支持。 BASE addresses oily, flaky, sensitive, and erythematous/inflammatory scalp conditions within a single homeostatic framework that integrates microbial control, protease-driven inflammation, oxidative stress, and barrier/basement-membrane support. It is not simply an oil-control or anti-dandruff program; rather, it applies multi-pathway management to problem scalp by reducing excessive microbial and protease burden, dampening inflammatory amplification, and supporting barrier and ECM homeostasis in parallel.4.4 CARE 家居洗护｜把专业管理延伸到日常 CARE 把机构方案延伸到每天的洗护场景。青蒿去屑、铁皮石斛维稳、巨藻控油、黑灵芝预洗、白藜芦醇舒缓喷雾等产品，分别承担清洁、去屑、控油、舒缓与发丝护理角色，让到店管理与居家护理保持同一方向。TRPV1/TRPA1、IL‑6/IL‑1β/TNF‑α 等机制研究可以帮助理解配方的舒缓逻辑，日常管理仍以头皮状态和复测变化作为判断依据。CARE 的价值，是减少护理断层，让 MAX / MORE / BASE 的管理逻辑可以延续到日常。 CARE extends professional in-clinic management into everyday hair and scalp care. Artemisia anti-dandruff, Dendrobium officinale maintenance, Macrocystis pyrifera oil-control, Ganoderma lucidum pre-wash, and resveratrol soothing products serve complementary roles in cleansing, dandruff control, sebum management, soothing, and hair-fiber care, helping keep home care aligned with the in-clinic plan. Mechanistic research involving TRPV1/TRPA1 and cytokines such as IL-6/IL-1β/TNF-α helps explain the soothing rationale of the formulations, while day-to-day management remains guided by scalp status and reassessment. CARE reduces gaps in maintenance and extends the management logic of MAX / MORE / BASE into daily routines.五、用户判断：先判断“哪条路径”，再决定“用什么项目” 发际线后移、头顶逐渐变细、病程超过数月并有家族史：先用毛发镜/标准化照片看密度、毛干直径差异、终毛/毳毛比例和毛囊口；若符合非瘢痕性 AGA/微型化特征，可在规范诊疗基础上评估 MAX 作为毛囊活性管理路径，伴油屑敏感时再叠加 BASE。若出现毛囊口消失或疑似瘢痕，不以 MORE “抗纤维化”，而应先转皮肤科明确诊断。 For a receding hairline or progressive crown thinning over several months, especially with a positive family history, first assess hair density, shaft-caliber variability, terminal/vellus ratio, and follicular openings using trichoscopy and standardized photography. If the findings are consistent with non-scarring AGA/follicular miniaturization, MAX may be evaluated as a follicular-activity management pathway alongside standard medical care, with BASE added when oily, flaky, or sensitive scalp features coexist. Loss of follicular openings or suspected scarring should prompt dermatologic diagnosis rather than positioning MORE as an “anti-fibrosis” treatment. 产后、快速减重、熬夜/高压后突然弥漫性掉发：先问时间线与诱因，并根据情况评估血常规、铁蛋白/铁代谢、甲状腺及营养状态等；在排除需要医学处理的原因后，MORE 可承担营养与头皮状态支持，BASE 用于伴随的屏障/油脂问题，CARE 负责居家连续性。 For sudden diffuse shedding after childbirth, rapid weight loss, sleep deprivation, or major stress, establish the timeline and likely trigger first, and assess CBC, ferritin/iron status, thyroid function, and nutritional status when indicated. Once causes requiring medical management have been excluded or addressed, MORE can provide nutritional and scalp-condition support, BASE can address accompanying barrier/sebum issues, and CARE can maintain continuity at home. 片状突发脱发、感叹号发、甲凹，或伴其他自身免疫线索：优先按斑秃路径转皮肤科评估。JAK 抑制剂属于处方治疗，不属于一般养护项目，也不能把斑秃的 JAK 证据套用到 AGA。 Sudden patchy hair loss, exclamation-mark hairs, nail pitting, or other autoimmune clues should prompt dermatologic evaluation for alopecia areata. JAK inhibitors are prescription therapies rather than routine scalp-care interventions, and evidence from AA should not be applied directly to AGA. 油、黄屑、痒、红，且普通去屑洗发越洗越刺激：先区分脂溢性皮炎、接触性刺激/过敏、银屑病等可能性。轻度且无警示信号时，可按 BASE 的“油脂 + 屏障 + 炎症”逻辑做辅助管理；若持续、反复、范围扩大，或出现渗液/脓疱/明显脱发，应转医生。 An oily scalp with yellow scale, itch, or erythema that becomes more irritated with conventional anti-dandruff shampoo should be differentiated from conditions such as seborrheic dermatitis, irritant/allergic contact dermatitis, and psoriasis. Mild presentations without red flags may receive adjunctive management under the BASE framework of “sebum + barrier + inflammation”; persistent, recurrent, or expanding disease, or the presence of exudation, pustules, or marked hair loss, warrants medical evaluation. 长期光滑发亮、毛囊口明显缺失或多年稳定性秃发：应如实说明，现有养护主要针对仍存在且具有生物学活性的原生毛囊；疑似瘢痕性脱发需医学诊断，适合植发与否也需专科评估。“从零再造可长期循环的人类新毛囊”目前仍属于研究与转化阶段。 For long-standing, smooth, shiny bald areas with obvious loss of follicular openings or years of stable alopecia, it should be made clear that current supportive care primarily targets native follicles that remain biologically viable. Suspected scarring alopecia requires medical diagnosis, and suitability for hair transplantation also requires specialist assessment. De novo generation of durable, cyclic human hair follicles remains a research and translational objective.六、从研究到实践：HAIRMOZZ茂丝五步分型 SOP 近五年前沿研究真正有价值的，不是多记几个“新药名词”，而是把毛囊问题转化为“病因识别 + 毛囊活性/信号 + 屏障/微生态 + 结构支持 + 客观复测”的分层管理。在 HAIRMOZZ茂丝，我们把这套逻辑落成五步： The real value of recent hair-regeneration research is not in accumulating new-drug terminology, but in translating follicular problems into layered management: etiologic identification + follicular activity/signaling + barrier/microecology + structural support + objective reassessment. At HAIRMOZZ, we operationalize this framework in five steps:Step 1　检测分型 / Stratified detection AI 毛发镜读毛干直径、终毛/毳毛比、毛囊开口、生长期占比；头皮端做油/干/屑/炎四分。必要时按微生态 SOP 采样：采样前48小时不洗头，以顶点病损与枕部对照做菌群拭子，报告丙酸杆菌、表皮葡萄球菌、马拉色菌丰度，并配 TEWL 与 pH 综合判稳态，不单看某一个菌。 AI-assisted trichoscopy is used to assess hair-shaft caliber, terminal/vellus ratio, follicular openings, and anagen proportion, while the scalp is stratified by oiliness/dryness, dandruff, and inflammation. When microecology sampling is indicated, follow the SOP: no hair washing for 48 hours before sampling; collect swabs from the affected vertex area and an occipital control site; report the abundance of C. acnes, S. epidermidis, and Malassezia; and interpret these findings together with TEWL and pH rather than targeting any single organism in isolation.Step 2　病因定主轴 / Etiology-led plan AGA 先完成规范分型与病因评估，再决定是否进入 MAX/FCST™ 为核心的毛囊活性管理；NPTDT™ 负责局部递送支持。MAX 同时可用于植发后快速生长支持，在移植区稳定后围绕毛囊活性、营养与局部环境进行协同管理。涉及非那雄胺/度他雄胺等抗雄激素药物、米诺地尔或其他处方路径，由医生基于性别、年龄、风险与禁忌证评估。若伴明显油脂、红、屑或屏障问题，可先或同步进入 BASE 管理。活动期 AA 转皮肤科，休止期脱发先处理诱因。 For AGA, complete appropriate classification and etiologic assessment before considering MAX/FCST™-centered follicular-activity management; NPTDT™ provides local delivery support. MAX can also support faster post-transplant growth once the transplant area is stable, coordinating follicular activity, nutrition and the local environment. Anti-androgen drugs such as finasteride/dutasteride, minoxidil and other prescription pathways require physician assessment. If marked sebum, erythema, scale or barrier problems coexist, BASE can be introduced first or in parallel. Active AA requires dermatology evaluation, while telogen effluvium requires trigger management first.Step 3　结构修复并行 / Structural repair in parallel 对于头皮老化感、发根支撑下降、轻度稀疏伴营养/结构需求，可评估 MORE/HMFRT™ 作为头皮抗衰与结构支持模块。其重点是 ECM、基底膜与胶原网络所形成的结构性生态位，通过结构与营养双向支持改善头皮力学环境。若出现进行性毛囊口消失、明显瘢痕样白区或疼痛/脓疱，应先排除瘢痕性脱发。 For scalp-aging features, reduced root support, or mild thinning accompanied by nutritional/structural needs, MORE/HMFRT™ may be considered as a scalp anti-aging and structural-support module. Its focus is the structural niche formed by the ECM, basement membrane, and collagen network, using coordinated structural and nutritional support to improve the scalp’s mechanical environment. Progressive loss of follicular openings, obvious scar-like white areas, pain, or pustules should prompt evaluation for scarring alopecia before proceeding.Step 4　在研前沿：明确证据阶段 / Pipeline: define the evidence stage GT20029、PP405 重点看靶点、试验阶段与已公开结果；其中 PP405 的Ⅱa期结果目前主要来自企业公开资料，完整同行评议数据仍需继续关注。PRP/PBM、外泌体/MSC、3D 生物打印和类器官则分别处于不同的临床或转化阶段。理解这些方向，是为了看清毛囊再生下一步会往哪里走；而 HAIRMOZZ茂丝当前的落地重点，仍是现存毛囊的分型管理、头皮环境管理与客观复测。 For GT20029 and PP405, the priority is to follow the biological target, trial stage, and publicly available results. Current phase 2a findings for PP405 are derived mainly from company disclosures, and complete peer-reviewed data remain important to watch. PRP/PBM, exosomes/MSC, 3D bioprinting, and organoids are at different clinical or translational stages. Understanding these directions helps clarify where hair-regeneration science may go next; HAIRMOZZ’s current practice focus remains stratified management of existing follicles, management of the scalp environment, and objective reassessment.Step 5　复测替代感觉 / Reassessment over impression 8–12 周可复评油脂、瘙痒、鳞屑、红斑、日常掉发趋势与依从性；毛发密度、毛干直径和终毛比例等生长指标更适合在约 24 周或更长周期、同一拍摄区域与光线条件下比较。对无毛囊口、疑似瘢痕或治疗反应明显不符合预期者及时升级检查或转诊。统一话术可改为：“先判断毛囊还在不在、主要是哪一种脱发，再看信号、头皮环境和结构支持；能客观复测的才进入方案，需要医学处理的及时转诊。” At 8–12 weeks, reassess sebum, pruritus, scaling, erythema, day-to-day shedding trends, and adherence. Growth-related metrics such as hair density, shaft caliber, and terminal-hair proportion are better compared at around 24 weeks or later, using the same scalp area and standardized lighting/imaging conditions. Absence of follicular openings, suspected scarring, or a response that is clearly inconsistent with expectations should trigger further evaluation or referral. A practical standard statement is: “First determine whether the follicle is still present and identify the dominant type of hair loss; then assess signaling, the scalp environment, and structural support. Only objectively measurable targets should enter the management plan, and conditions requiring medical treatment should be referred promptly.”七、结语 / Conclusion 过去五年最重要的变化，是毛囊再生从“找一个促生长成分”进入“细胞 + 信号 + 生态位 + 代谢 + 组织工程”的系统阶段。距离临床最近的，仍是保护、恢复或重新激活已有毛囊，并按 AGA、AA、休止期脱发等不同病因管理；真正从零构建能长期循环的人类新毛囊，还要跨越细胞来源、空间定向、血供、免疫、神经整合与长期安全性等多重门槛。耶鲁 Wnt–SHH 工作把“诱导性真皮微环境如何建立”进一步拆解为可研究的细胞与时空信号问题，也让“如何构建新毛囊”这件事有了更清晰的生物学路径[5,6,12,13]。 The most important change over the past five years is that hair-regeneration research has moved from “finding one growth-promoting ingredient” into a systems era of cells + signaling + niche + metabolism + tissue engineering. The approaches closest to clinical practice remain preservation, recovery, or reactivation of existing follicles, with management tailored to different causes such as AGA, AA, and telogen effluvium. De novo engineering of human follicles capable of durable cyclic growth still has to overcome multiple barriers, including cell sourcing, spatial orientation, vascularization, immune and neural integration, and long-term safety. Yale’s Wnt–SHH work further breaks down the question of “how an inductive dermal microenvironment is established” into experimentally tractable cellular and spatial-temporal signaling problems, providing a clearer biological path for studying how new follicles might ultimately be constructed[5,6,12,13]. HAIRMOZZ茂丝的差异化，不是追着每一个新名词走，而是把毛囊看成一个需要同时管理信号、递送、微生态和结构支持的系统。FCST™ 管毛囊活性与信号逻辑，NPTDT™ 管局部递送支持，FMHT™ 管屏障、油脂与微生态，HMFRT™ 管营养与结构支持，再由 MAX / MORE / BASE / CARE 对应不同管理场景。最后用检测与复测回答最重要的问题：毛囊和头皮状态，是否正在沿预期方向变化。 这也是专业毛发管理真正重要的地方：不是把所有脱发都解释成同一条通路，而是先分清病因、判断毛囊是否仍有生物学活性，再决定该管信号、管环境、管结构，还是进入医学诊疗路径。 HAIRMOZZ is differentiated not by chasing every new term in hair science, but by treating the follicle as a system that requires coordinated management of signaling, delivery, microecology, and structural support. FCST™ addresses follicular activity and signaling logic; NPTDT™ provides local delivery support; FMHT™ addresses barrier status, sebum, and microecology; and HMFRT™ supports nutrition and structure. MAX / MORE / BASE / CARE then map these dimensions to different management scenarios. Detection and reassessment answer the most important practical question: are the follicle and scalp moving in the intended direction? This is also the core of professional hair management—not forcing every type of hair loss into a single pathway, but first identifying the cause and determining whether the follicle remains biologically active, then deciding whether the priority is signaling, the scalp environment, structural support, or medical diagnosis and treatment.声明 / Compliance note 本文用于毛发专业科普与学术交流。涉及斑秃、瘢痕性脱发、快速进展性脱发等疾病判断，以及处方药、JAK 抑制剂和临床试验药物，请由皮肤科/毛发专科医生评估。毛发管理结果受脱发类型、病程、毛囊状态、合并因素与依从性等影响。 This article is intended for professional hair-science education and academic communication. Conditions such as alopecia areata, scarring alopecia, and rapidly progressive hair loss, as well as prescription medications, JAK inhibitors, and investigational agents, require evaluation by a dermatologist or hair-loss specialist. Outcomes of hair-management programs vary according to the type and duration of hair loss, follicular status, contributing conditions, and adherence.参考文献 / References [1] Bellani D, Patil R, Prabhughate A, et al (2025) Pathophysiological mechanisms of hair follicle regeneration and potential therapeutic strategies. Stem Cell Research & Therapy.  　综述毛囊再生的病理机制与潜在治疗策略（机制/转化方向）。 [2] King B, Ohyama M, Kwon O, et al (2022) Two Phase 3 Trials of Baricitinib for Alopecia Areata. New England Journal of Medicine.  　中重度斑秃 JAK 抑制剂巴瑞替尼两项随机Ⅲ期试验（斑秃专用，不外推雄脱）。 [3] Gupta AK, Wang T, Welter RJ, Unger R, Mejia R. (2026) Promises and Pitfalls of Regenerative Therapies for Androgenetic Alopecia: Platelet-Rich Plasma, Photobiomodulation, Stem Cells, and Exosomes. Medical Sciences. 14(1):5.  　综述 2020–2025 年 PRP、PBM、干细胞与外泌体用于 AGA 的临床证据、标准化难点与安全/监管局限。 [4] Hu R, Wei A, Wu L, et al. (2025) Efficacy and safety of topical GT20029 in male patients with androgenetic alopecia: a multicenter, randomized, double-blind, placebo-controlled phase 2 study. Journal of Dermatological Treatment.  　外用 AR 蛋白降解剂 GT20029 治疗男性 AGA 的多中心随机双盲Ⅱ期研究；12 周部分方案改善目标区域非毳毛计数，仍需长期与更广泛人群数据。 [5] Qu R, Gupta K, Dong D, et al (2022) Decomposing a deterministic path to mesenchymal niche formation by two intersecting morphogen gradients. Developmental Cell.  　耶鲁 Wnt/β‑catenin × SHH 双梯度驱动真皮凝集体形成的机制研究（非临床疗法）。 [6] Shelton J. One step closer to creating new hair follicles | Yale News.  　耶鲁新闻对 Wnt–SHH 诱导性真皮微环境工作的科普解读。 [7] NuFoll: Programming skin cells to regrow natural hair | Yale Ventures.  　Yale Ventures 的 NuFoll 小分子重编程真皮细胞构想（靶点仅称 Target X/Y）。 [8] ClinicalTrials.gov. Safety, Pharmacokinetics and Efficacy of PP405 in Adults With Androgenetic Alopecia (NCT06393452).  　PP405（局部 MPC 抑制剂）用于成人 AGA 的临床试验登记与研究信息。 [9] Pelage Pharmaceuticals. (2025) Positive Phase 2a Clinical Trial Results for PP405 in Regenerative Hair Loss Therapy.  　企业公布的 PP405 Ⅱa期顶线结果：主要安全终点达成，并报告早期探索性毛发密度信号；属于公司公开资料，完整同行评议数据仍需持续关注。 [10] Tai K, Chen C-L, Fan SM-Y, et al (2025) Adipocyte lipolysis activates epithelial stem cells for hair regeneration through fatty acid metabolic signaling. Cell Metabolism.  　脂肪细胞脂解经脂肪酸代谢信号激活上皮干细胞的毛发再生研究。 [11] Nam S, Jain SK, Kurian DR, et al (2025) Hair regeneration: Mechano-activation and related therapeutic approaches. Journal of Tissue Engineering.  　毛发再生的机械激活及相关治疗途径综述。 [12] Kang D, Liu Z, Qian C, et al. (2023; online 2022) 3D bioprinting of a gelatin-alginate hydrogel for tissue-engineered hair follicle regeneration. Acta Biomaterialia. 165:19–30.  　明胶–海藻酸盐水凝胶 3D 生物打印用于组织工程毛囊再生的研究（体外 + 裸鼠模型；尚非人头皮临床证据）。 [13] Kageyama T, Anakama R, Hamano S, et al. (2026) Hair Follicle Organoids Using Human iPSC-Derived Ectodermal Precursor Cells for Hair Regenerative Medicine. ACS Biomaterials Science & Engineering. 12(3):1704–1714.  　人 iPSC 来源外胚层前体细胞与小鼠胚胎间充质细胞构建嵌合毛囊类器官；研究提示潜力，同时指出仍需人源间充质层以迈向全人源体系。 RESEARCH  ·  EVIDENCE  ·  PRACTICE

雄激素性脱发 （AGA） 是最常见的脱发类型，其治疗涉及具有各种不良反应且不完全有效的药物。基于射频的疗法 （RF） 是 AGA 治疗的替代方案。尽管有越来越多的临床证据表明 RF 对脱发有效，但其在组织和细胞水平上的影响尚未得到详细研究。本研究的目的是在体外分析电容电阻式电转移 （CRET） 治疗中使用的射频电流对 AGA 的潜在影响。毛囊 （HFs） 由 AGA 患者捐献并接受 CRET 治疗。AGA-HFs 在体外暴露于亚热条件下的间歇性 448 kHz 电流。通过免疫组化分析细胞增殖 （Ki67） 、细胞凋亡 （TUNEL 测定）、分化 （β-catenin） 、完整性 （胶原蛋白和 MMP9）、HF 周围表皮厚度、AGA-HF 中凸起细胞和黑素细胞的比例。CRET 增加了不同 AGA-HF 细胞群的增殖和减少死亡。此外，成黑素细胞隆起增加，毛囊周围的表皮增厚。这些结果支持基于 RF 的疗法治疗脱发的有效性。然而，临床试验对于了解 CRET 疗法和其他 RF 疗法对 AGA 治疗的真正有效性是必要的。关键词：雄激素性脱发， 毛囊， 黑素细胞， 射频疗法， CRET 1. 引言毛发是哺乳动物的特征，具有多种功能，如保暖、物理保护、伪装、社交互动和感官感知[1]。在每根头发的底部都有一个称为毛囊 （HF） 的微型器官，它嵌入皮肤表面以下，由不同的结构形成，例如根鞘（内部和外部）、毛干、皮脂腺、隆起、真皮鞘和真皮。这些结构由 20 多种不同的细胞群组成，包括干细胞、角质形成细胞、黑色素细胞、神经元、内皮细胞、肥大细胞前体衍生物和免疫细胞。这些群体出现和消失，或发生重大变化，具体取决于头发生长周期的阶段或当时存在的激素刺激 [1]。头发生长分为三个持续时间可变的周期性阶段。在头皮上，生长期或活跃生长期需要 2-7 年才能完成，退行期或退化期需要 2-3 周，休止期或休息期大约需要 100 天。休止期后，卵泡的下部再生，这标志着新生长期的开始 [2]。脱发或稀疏是一种与该生长周期失调相关的疾病，由衰老、激素分泌变化、营养失衡、社会压力和遗传因素等因素引起 [3,4]。虽然不会危及生命，但脱发会显着降低心理健康和生活质量。AGA 是最常见的脱发类型，其特征是毛囊逐渐小型化。虽然 AGA 的病理机制尚不清楚，但有人认为 HF 隆起在其发病机制中起着重要作用。由于凸起是卵泡、皮脂腺和表皮再生所必需的多能干细胞的生态位，因此有人提出 AGA 的发生可能是由于这些凸起干细胞转化为祖细胞的改变 [5]。目前，最常用的止发和促进头发生长的治疗方法包括药物米诺地尔、非那雄胺、度他雄胺和 Janus 激酶 （JAK） 抑制剂。然而，这些化合物并不能治愈，它们的疗效是短暂的，因为停止使用后可能会恢复脱发 [6,7]，并且它们有许多不良副作用 [8]。因此，口服米诺地尔可引起体位性低血压、体液潴留和多毛症。非那雄胺和度他雄胺与持续的性异常、焦虑和抑郁有关[9]，非那雄胺具有潜在的致畸作用，因此建议肝功能不全患者谨慎使用[10]。斑秃患者越来越受欢迎的其他药物是 JAK 抑制剂，但常见的并发症包括上呼吸道感染、酶升高和头痛 [9]。对于常规药物出现副作用的患者，已有基于植物来源化合物的药物替代疗法的报道，但效果有限[11]。目前还使用了基于富血小板血浆 （PRP） 的生物疗法。PRP 是一种新兴疗法，它使用由生长因子、细胞因子和浓缩血小板组成的自体制剂，可刺激毛囊修复和再生。这种策略相对安全，副作用最小，包括暂时性和可忍受的疼痛。微针可与 PRP 联合使用，以促进或促进其渗透或增强其作用 [9]。治疗脱发的其他治疗选择是冷冻疗法和病灶内皮质类固醇 （ILCS） 注射。根据最近的证据，这两种方式在治疗斑秃方面都是安全有效的，尽管冷冻疗法比 ILCS 注射更有效且痛苦更小，这就是为什么它被推荐作为一种治疗选择，尤其是对于斑秃儿科患者或有 ILCS 注射禁忌症时 [12].尽管这些疗法有效，但开展的研究很少，因此需要更多样本和类似实验程序的研究来评估这些疗法的临床有效性 [13]。治疗 AGA 的药物或生物疗法的其他替代疗法是物理疗法。在这些疗法中，激光已被证明能够诱导头发生长 [14]。点阵激光产生非常轻的局部刺激，诱导伤口愈合反应，促进头发再生[15,16]。近年来，其他基于光生物调节 （PBM） 和使用 LED（发光二极管）或低强度激光 （LLLT） 的疗法也被提议用于治疗脱发 [17,18]。因此，630 nm 至 800 nm 范围内的波长已用于治疗雄激素性脱发、额叶纤维化脱发、斑秃和扁平苔藓。光生物调节诱导的效果是头发周期生长期延长 [19]。这些疗法已被证明是有效、安全且不良反应相对轻微的，尽管它们有效，但它们在应用方面存在一些局限性。例如，激光是局部应用的，需要多次曝光和时间来处理大面积区域。此外，头发的长度是激光应用的一个问题，因为它吸收了激光能量，阻碍了其进入皮肤，因此短发是必要的，这并不被女性患者接受。此外，光疗受肤色的限制，深色皮肤需要很长时间的治疗 [20]。除了基于光的物理疗法外，那些使用电磁场或电流的疗法是目前治疗脱发的另一种选择。特别是，射频 （RF） 电流是高频交流电，其主要特性是提高组织温度（热疗）。热疗的效果与组织类型（组织对电流通过的电阻率）和暴露时间直接相关[21,22,23]。射频可用于烧蚀和非烧蚀应用。其非烧蚀作用包括诱导成纤维细胞增殖[24,25,26]、激活新胶原生成[24,26]、改善血液循环[27]、新血管生成[24]、胶原蛋白重塑和皮肤紧致[28,29]。此外，其亚热应用（不会将靶组织温度升高到 37 °C 以上的治疗）可诱导抗炎和抗水肿作用 [30]。与其他物理疗法不同，射频技术可以使用无创或微创手术应用于任何类型的皮肤，并且并发症或副作用的风险最小 [31]。因此，射频设备越来越多地用于美容皮肤病学，并已成功应用于美容治疗，如皮肤松弛、皱纹、身体/皮肤年轻化、面部表情纹、近期和晚期纤维化、疤痕和粘连、脂肪团、局部脂肪以及脱发[32]。应该注意的是，美容皮肤病学中用于毛囊生长的射频与用于脱毛的射频不同。两者都是产生局部热量的高频交流电，但在毛囊生长的情况下，射频用于对组织进行适度加热（热疗），而脱毛则使用射频引起热灼伤（热凝）。为了促进热凝，使用一个小电极，如针头，它可以将大量热量集中在该区域，导致毛囊的破坏[33]。临床证据支持使用双极和单极射频设备脱毛，而点阵射频似乎是一种新兴的毛发生长技术 [34]。因此，设备的参数、应用模式及其射频的作用机制是不同的。应用这种电刺激的射频疗法之一是 CRET。这种疗法施加 448 kHz 电流在目标组织中诱导电或电热刺激。尽管有越来越多的临床证据表明 RF 对脱发有效，但其在组织和细胞水平上的影响尚未得到详细研究。本研究的目的是在体外分析 CRET 疗法中使用的亚热电流对 AGA （AGA-HF） 患者捐献的毛囊的潜在影响。研究了两种类型的 CRET 信号：标准 448 kHz 正弦信号 （CRET-Std） 和 448 kHz 正弦信号，在 20 kHz 时以 40% 的幅度调制 （CRET-Mod）。分析 CRET 对 AGA-HF 生长、死亡和细胞分化的影响。2. 结果2.1. CRET 对 AGA-HF 细胞增殖的影响 Ki67 蛋白的标记显示细胞处于增殖状态。在这项研究中，使用该 Ki67 标记分析了卵泡不同区域细胞的增殖。尽管获得的结果显示人际差异取决于患者，但与对照组相比，观察到 CRET 信号（调制和标准）的增殖率增加。当用标准信号处理样品时，效果比用调制信号处理时更一致、更普遍和更显着，因为 CRET-Mod 仅增加了内根鞘 （IRS） 和外根鞘 （ORS） 中 Ki67 + 细胞的速率。相比之下，CRET-Std 显示基质、凸起细胞和表皮中 Ki67+ 细胞的增加。鉴于 AGA-HF 的增殖率较低，这些细胞增殖的增加表明卵泡的改善。CRET 对 AGA-HF 增殖的影响。（a） 卵泡不同区域的 Ki67+ 细胞率。用标准或调制信号处理的卵泡中对对照的影响百分比。所有数据均以均值 ± SEM 表示，并使用 Student t 检验进行分析。*，p < 0.05;**，p ≤ 0.001。（b） 对照、标准 CRET （CRET-Std） 或 CRET 调制 （CRET-Mod） 滤泡的代表性图像。上图：AGA-HG 基质区的 Ki67+;下面;AGA-HF 护套 （ORS+IRS） 的 Ki67+。紫色：用苏木精染色的细胞核。棕色：用 DAB 标记的 Ki67 + 。200 倍放大倍率。物镜 20 倍。2.2. CRET 对 AGA-HF 细胞凋亡的影响使用 TUNEL 测定分析 HF 中的细胞死亡率。脱发的特征是由于细胞凋亡增加导致卵泡小型化 [35]。结果显示了取决于所用信号类型的效果。因此，与对照组相比，用标准信号处理导致鞘区 （IRS+ORS） 中 TUNEL + 细胞的速率显着降低 （32.3%）。在分析的其余 HF 区域未观察到变化。当用调制信号处理 HF 时，与对照组相比，在处理过的滤泡的任何区域中的 TUNEL + 细胞速率均未发现显著差异。因此，卵泡不同部分的凋亡率降低会促进 HF 的加强，使其难以丢失。CRET 对 AGA-HF 细胞死亡的影响。（a） 卵泡不同区域中 TUNEL + 细胞的速率。对用标准或调制信号处理的对照 TUNEL + 细胞的百分比影响。所有数据均以均值 ± SEM 表示，并使用 Student t 检验进行分析。*，第 < 0.05 页。（b） 对照、标准 CRET （CRET-Std） 或 CRET 调制 （CRET-Mod） 滤泡的代表性图像。这些图像仅显示鞘区 （IRS+ORS） 中的 TUNEL+ 细胞。绿色：TUNEL+ 细胞;蓝色：总细胞核。200 倍放大倍率。物镜 20 倍。2.3. CRET 对 AGA-HF 表皮深度的影响在这项研究中，评估了表皮的深度，在我们的样本中，它对应于毛囊周围表皮层的厚度。与未处理的 AGA-HF 相比，用标准信号处理卵泡导致表皮深度显着增加。当用 AGA-HF 对照上的调制信号处理卵泡时，未观察到任何变化。该层厚度的增加将加强 AGA-HF 的稳定性，防止脱发。CRET 对 AGA-HF 表皮深度的影响。（a） 使用 Image-J 程序测量表皮的深度。所有数据均以均值 ± SEM 表示，并使用 Student t 检验进行分析。*，第 < 0.05 页。（b） 对照、标准 CRET （CRET-Std） 或 CRET 调制 （CRET-Mod） 滤泡的代表性图像。在不同毛囊的表皮区域进行了至少 5 次测量。红线：表皮厚度。200 倍放大倍率。物镜 20 倍。2.4. CRET 对 AGA-HF 完整性的影响：胶原蛋白生成分析还分析了 CRET 诱导的 AGA-HF 中胶原蛋白生成的潜在变化。细胞外基质的降解导致毛囊的结构支撑减弱，这可能导致小型化并最终脱发。鉴于 HF 基质中胶原蛋白的相关性，使用 Masson 三色染色和随后的真皮比色图像分析对胶原蛋白的总量进行评估。与相应的对照相比，这种染色没有显示用标准信号或调制信号处理的样品中的颜色量发生显著变化。此外，通过免疫组织化学分析 I 型胶原 （Col I） 的表达。这项研究表明，与对照相比，用调制信号处理的 AGA-HF 中 Col I 增加，而标准信号没有改变其表达。CRET 对 AGA-HF 胶原蛋白表达的影响。（a） 通过 Mason 三色染色进行颜色测量，用于定量总胶原蛋白。（b） 胶原蛋白 I 表达，测量为 DAB 面积与苏木精面积之间的比率。所有数据均以均值 ± SEM 表示，并使用 Student t 检验进行分析。NS，第 > 0.05 页。（c） 毛囊不同区域的梅森三色染色的代表性图像;控制、标准 CRET （CRET-Std） 或 CRET 调制 （CRET-Mod）。紫色：用苏木精染色的细胞核;绿色：胶原蛋白;（d） 卵泡不同区域的 I 型胶原免疫组织化学的代表性图像;控制、标准 CRET （CRET-Std） 或 CRET 调制 （CRET-Mod）。紫色：用苏木精染色的细胞核。棕色：用 DAB 标记的 I 型胶原蛋白。200 倍放大倍率。物镜：20 倍。2.5. CRET 对 AGA-HF 完整性的影响：金属蛋白酶 9 （MMP9） 表达分析MMP 参与卵泡的完整性，MMP-9 + 细胞的存在已在生长期和退行期的皮脂腺中以及退行期的内根鞘中被描述。此外，MMP9 活性的增加与体外和体内毛球消退有关 [36]。在本研究中分析的卵泡中，研究了 MMP9 在腺周区域和 Henle 层（位于内根鞘）中的表达。结果显示，与对照组相比，当用标准信号处理卵泡时，这两个区域都显着减少。与对照组相比，当使用的信号被调制时，没有观察到显着的变化。CRET 对 AGA-HF MMP9 表达的影响。（a） 腺周区 MMP9 + 细胞的速率和 （b） Henle 区层中 MMP9 + 细胞的速率。对用标准或调制信号处理的 MMP9 + 细胞的控制的百分比影响。所有数据均以均值 ± SEM 表示，并使用 Student t 检验进行分析。p ≤ 0.01。（c） 对照、标准 CRET （CRET-Std） 或 CRET 调制 （CRET-Mod） 滤泡的代表性图像。紫色：用苏木精染色的细胞核;棕色：用 DAB 标记的 MMP9 +。200 倍放大倍率。目标：20 倍。2.6. CRET 对卵泡分化因子的影响：AGA-HF 中 β-连环蛋白表达分析参与毛囊发育的主要分化途径之一是 Wnt/β-catenin 细胞信号通路。在本研究中，分析了 β-catenin 在 AGA-HF 不同区域的表达。与对照组相比，用调节的 CRET 信号处理 AGA-HF 的 β-catenin 表达显示出非常相关的增加 （70.7 ± 39.82%）。然而，它们没有统计学意义，因为反应显示出很大的人际差异，不同的反应取决于捐赠者。关于标准信号，与对照相比，未观察到相关变化。CRET 对 AGA-HF β-catenin 表达的影响。（a） β-catenin + 细胞的速率。对用标准信号或调制信号处理的 β-catenin 细胞控制的百分比影响。所有数据均以均值 ± SEM 表示，并使用 Student t 检验进行分析。（b） 对照、标准 CRET （CRET-Std） 或 CRET 调制 （CRET-Mod） 滤泡的代表性图像。紫色：用苏木精染色的细胞核。棕色：用 DAB 标记的 β-cat+ 细胞。200 倍放大倍率。目标：20 倍。2.7. CRET 对 AGA-HF 凸起细胞比例的影响导致脱发发展的因素之一是是否存在凸起细胞及其将多能干细胞转化为毛囊、皮脂腺和表皮细胞的能力。这些细胞的缺失会导致 HF 变性，从而导致脱发。为了分析 AGA-HF 凸起细胞在 CRET 潜在影响中的作用，使用了该细胞类型的特异性标志物：cd-200。与对照相比，cd-200 + 细胞速率的结果显示，与对照相比，它们与两种信号的比例略有降低，尽管没有统计学意义。CRET 对 AGA-HF 凸起细胞数量的影响。（a） cd-200 + 细胞的速率。对用标准或调制信号处理的 cd-200 + 细胞对照的百分比影响。所有数据均以均值 ± SEM 表示，并使用 Student t 检验进行分析。（b） 对照、标准 CRET （CRET-Std） 或 CRET 调制 （CRET-Mod） 滤泡的代表性图像。紫色：用苏木精染色的细胞核。棕色：用 DAB 标记的 cd200 + 细胞。200 倍放大倍率。目标：20 倍。2.8. CRET 对 AGA-HF 中成黑细胞比例的影响 HF 干细胞的分化产生了卵泡的各种细胞类型，其中包括黑素母细胞。作为 CRET 处理后卵泡干细胞分化能力的间接测量，研究了 HF周围黑素细胞的比例。为此，使用了特定的标记 NKI/beted-gp100。结果显示，在用标准信号处理后，与对照相比，AGA-HF 球基质中存在的 NKI/beted-gp100 + 细胞的数量显着增加。与对照相比，在用调制信号处理的样品中没有发现显着影响。CRET 对 AGA-HF 黑素细胞数量的影响。（a） NKI/beted-gp100 + 细胞的速率。对用标准或调制信号处理的 NKI/beted-gp100 + 细胞的控制的百分比影响。所有数据均以均值 ± SEM 表示，并使用 Student t 检验进行分析。*，第 < 0.05 页。（b） 对照、标准 CRET （CRET-Std） 或 CRET 调制 （CRET-Mod） 滤泡的代表性图像。紫色：用苏木精染色的细胞核。棕色：用 DAB 标记的 NKI/beted-gp100+。200 倍放大倍率。目标：20 倍。3. 讨论目前，开发治疗 AGA 的新疗法，这些疗法的副作用最小，同时有效，是医疗专业人员和患有这种病理的人群日益增长的需求。基于 RF 的疗法是一种治疗替代方案，几乎没有不良影响，并且在临床实践中治疗 AGA 取得了可喜的结果。因此，一项针对 24 例接受点阵射频装置治疗的 AGA 患者的初步研究显示，54% 的病例临床反应良好，其中 40% 的病例的头发数量与初始值相比增加了 30% 或更多 [37]。另一项临床研究使用非消融分次射频设备作为单一疗法来刺激 25 名 AGA 患者的头发生长。结果表明，头发密度增加了 31.6%，毛干厚度增加了 18% [15]。尽管这些临床效果似乎表明这种类型的物理疗法可以促进人类的毛发生长和保养，但临床试验非常稀缺，并且这种效果的机制尚未得到充分描述。在本研究中，分析了 CRET RF 物理治疗对 AGA 的潜在离体疗效。为此，研究了 CRET 电流治疗对患有这种病理的患者毛囊生长、死亡和分化的影响。首先，使用 Ki67 标志物和 TUNEL 测定分析 CRET 对不同 AGA-HF 细胞群增殖和凋亡死亡的影响。Ki67 与细胞周期的增殖期相关，因为它的表达出现在周期的 G1 期，在接下来的阶段增加，并在有丝分裂后急剧下降。Ki67 的半衰期非常短（不超过 1.5 小时），因此它不会在静止细胞中积累 [38]。当用标准信号处理 AGA-HFs 时，基质、表皮和隆起中 Ki67 + 细胞的比例显著增加，而在调制信号下，只有鞘区的 Ki67 + 群体增加。此外，标准信号还降低了鞘细胞凋亡。因此，与调制信号相比，标准 CRET 信号在增加不同 AGA-HF 群体的增殖和抑制死亡方面更有效。凸起细胞负责在每个生长期更新卵泡的下部，因此，该区域的所有细胞类型都来源于它。此外，在皮肤表面破裂的情况下，凸起的细胞会迁移到表皮以促进组织修复。另一方面，真皮鞘的细胞在毛囊的维持中起着重要作用，因为它们充当其细胞的储存库，而基质的细胞通过与毛囊的相互作用，决定头发的厚度、长度和周期[39]。因此，这些细胞的更大增殖和更少的电处理诱导的死亡将有利于卵泡的更新并增加干细胞和特化细胞的储存库。此外，围绕毛囊的表皮增殖的增加会增加其深度，这将有利于其稳定性。这些参数共同促进毛囊的强化，从而减少脱发。细胞外基质是卵泡结构的重要组成部分。MMP 是负责头发更新的蛋白质，在头发再生中起着非常重要的作用。细胞外基质降解的增加导致毛囊的结构支撑减弱，这可能导致小型化和最终脱发。HF 暴露于 UVB 光 （50 mJ/cm2） 等外源性物理因素会导致活性氧 （ROS） 产生诱导的 MMP 表达增加，从而影响基质的降解和重塑，从而影响其功能 [40]。在 MMP 中，MMP9 降解细胞外基质的 I 型胶原蛋白和 II 型胶原蛋白 [41]。因此，对其表达的抑制作用将阻止基质的降解，并在毛囊的形态中产生结构加固，这将使脱发更加困难。目前的研究表明，CRET 治疗会引起对 MMP9 的反应，具体取决于所使用的信号类型。因此，用标准信号处理而不是用调制信号处理，导致表达 MMP9 的细胞速率显着降低。这种作用会促进卵泡的结构维持。应该注意的是，这种减少并未转化为处理后的 AGA-HF 中总胶原蛋白或 I 型胶原蛋白的增加。成体干细胞是体内平衡和伤口愈合过程中自我更新上皮细胞的最终来源。在皮肤中[42]，隆起区域和HF外根鞘的最外层包含静止干细胞（HFSC）的储存库。这些干细胞表现出高度的可塑性[43]，在适当的刺激下被激活，驱动生长期并开始新的头发周期[44]，导致头发再生。凸起的 HFSCs 产生了成人卵泡的不同种群，其中角质形成细胞在 HF 中最丰富。然而，从临床角度来看，隆起的相关性不仅限于角质形成细胞，还与驻留在该区域的黑色素细胞干细胞相关 [45]。事实上，已经描述卵泡包含不同的滤泡黑素细胞亚群，其区别在于分化程度和合成黑色素的能力[46,47]。成黑素细胞沿外根鞘 （ORS） 迁移，到达真皮（DP） 周围的毛球 [48]。在这个隔室中，由于来自周围细胞的各种信号（主要来自 DP）的影响，黑素细胞分化为具有黑色素活性的黑色素细胞，并将继续进行黑色素生成以产生色素沉着的毛干 [5,48]。毛囊中的黑色素生成与头发生长周期密切相关，更准确地说与生长期密切相关 [46]。衰老的 HFSCs 通过终末表皮分化从皮肤中周期性地消除 [49]。当来自凸起的黑素细胞供应耗尽或分化过程不完全时，毛干色素沉着丧失和白发出现 [50]。鉴于凸起细胞和黑素细胞与脱发和灰发等病理学的相关性，在本研究中，研究了两种细胞类型的特异性标志物的表达。虽然标准 CRET 没有诱导凸起干细胞特异性标志物 （cd-200） 的表达发生显着变化，但它确实增加了可用黑素细胞的数量，从而促进了 AGA-HF 中的黑色素生成。黑素细胞的这种增加也表明 CRET 诱导的卵泡干细胞向更特殊的细胞类型的分化。CRET 的这种作用，以及不同细胞群增殖的增加，表明 AGA-HF 的结构改善。另一方面，毛发生长涉及毛囊表皮和真皮隔室之间的相互作用[5,51]。头发生长的潜在机制包括生长期延长等，因此老年 HF 通常表现出进入毛发生长阶段的能力降低 [49]。据报道，毛发生长的激活是通过刺激 Wnt/β-catenin 信号通路进行的 [52]。该信号通路是头发形态发生和 HF 再生过程中形成外根鞘 （ORS）、基质细胞 （DP） 和真皮细胞的细胞调节因子 [52,53]。当这种 Wnt/β-cat 通路受到刺激时，HFSCs 被激活成为“瞬时扩增细胞”，它们增殖、分化和传递信号，从而启动毛发生长 [50]。有人提出，该通路可能是治疗脱发的潜在靶点，因为已经描述了它在 AGA 中的抑制作用 [54]。此外，尽管衰老与雄激素性脱发之间的因果关系尚未得到证实，但越来越多的数据支持衰老和 AGA 密切相关，因为 Wnt/β-cat 通路的抑制和能够导致 HF 细胞衰老的 DNA 损伤，导致其小型化 [55].在这项研究中，与对照相比，标准 CRET 信号不会导致 β-catenin 表达的变化，尽管调制信号确实略微增加了其表达。然而，由于人际差异，结果没有统计学意义。AGA-HF 中描述的反应涉及增殖和分化的增加，以及构成它的不同细胞类型的死亡减少。先前的研究表明，本研究中使用的相同 CRET 处理参数诱导不同细胞类型的细胞分化、迁移和/或增殖反应，例如人干细胞 [56\u201257]、角质形成细胞、成纤维细胞 [58] 和真皮细胞 （DPC） [59]，它们是毛囊的一部分。这些效应是由观察到的 β-catenin、E-cadherin、vinculin、p-FAK、MMP-9 和 MAP 激酶（控制两个过程的蛋白质）p-p38、p-JUNK 和 p-ERK1/2 的表达和位置的变化介导的。本研究中描述的对增殖、细胞凋亡和分化的影响将诱导毛囊进入和永久生长，以这种方式，电刺激可以促进毛发生长和毛囊增殖。此外，由 CRET 诱导的隆起中成黑素细胞的增加可以减少头发纤维中的颜色损失，并有利于组成它的不同细胞群的分化，这将导致头发纤维结构的加强。在这项离体研究的同时，我们小组对雄激素性脱发患者进行了一项试点临床试验，分析了 CRET 疗法的真正有用性，并取得了有希望的结果 [59]。这项临床研究是在 20 名女性型脱发 （FPHL） 患者中进行的，并接受了相同的 448 KHz CRET 信号治疗。毛发镜数据显示，头皮所有区域都出现了广泛且具有统计学意义的头发变细化（比治疗前值高出 10-15%）。鉴于 HF 细胞活力和分化的失调是异常脱发的主要因素，此处描述的生物学效应可能与上述毛发学研究中观察到的重新致密密切相关，并会导致脱发减少。4. 材料和方法4.1. 人类毛囊收集使用了植发手术遗留的 130 例人类 HF。毛囊由 Elite Laser Clinic（西班牙马德里）慷慨捐赠。这些 HF 来自 6 名年龄在 30 至 45 岁之间，接受 AGA 择期头发移植手术的患者。这项研究得到了 Ramón y Cajal 医院伦理委员会的批准，并符合赫尔辛基宣言。所有患者在参与本研究前均给予书面知情同意书。将毛囊在含有补充有 10% 胎牛血清、2 mM 谷氨酰胺、青霉素 100 U/mL 和链霉素 100 μg/mL 的 RPMI 1640 的无菌培养管中运输至实验室，置于冰容器中。4.2. 毛囊的体外培养立即将每个分离的卵泡置于装有 4 mL Williams 培养基 E（Gibco，Thermo™ Fisher Scientific，Waltham，MA，USA）的 60 mm 板中。此外，培养基中还添加了 2 mmol/L L-谷氨酰胺（Gibco，Thermo Fisher Scientific）、氢化可的松 10 ng/mL（Gibco，Thermo Fisher Scientific）、胰岛素 10 μg/mL（Sigma-Aldrich，美国密苏里州圣路易斯）、青霉素 100 U/mL（Gibco，Thermo Fisher Scientific）、链霉素 100 μg/mL（Gibco，Thermo Fisher Scientific）和两性霉素 B 25 μg/mL（Gibco，Thermo Fisher Scientific）。所有 HF 均在 37 °C 下，在 5% CO2 和 95% 空气的气氛中孵育。4.3. 电处理将专为体外刺激而设计的一对无菌不锈钢电极插入所有培养皿中并串联连接。仅使用信号发生器（Indiba Activ HCR 902，INDIBA，Barcelona，Spain®）为用于电刺激的培养皿的电极通电，而其余板在相同条件下同时假暴露。毛囊用两种不同类型的信号处理：标准 448 kHz 正弦非调制信号 （CRET-Std） 或 448 kHz 信号的 20 kHz、40% 幅度调制 （CRET-Mod）。在这两种情况下，电刺激都是间歇性的。间歇性刺激模式包括 5 个 448 kHz 的脉冲，以 100 μA/mm2 的亚热密度传递的正弦波电流，由 4 小时的脉冲间传递间隔，总共给药 48 小时。4.4. TUNEL 检测使用细胞凋亡检测系统 （Promega， Madison， WI， USA） 评估 TUNEL 测定。对于组织样品的 TUNEL 染色，将福尔马林固定、石蜡包埋 （FFPE） 组织块切片，厚度为 3 μm，并在 60 °C 下干燥 15 分钟，然后在二甲苯中脱蜡，通过分级乙醇系列再水化，并用磷酸盐缓冲盐水 （PBS） 洗涤。凋亡指数表示为 TUNEL 阳性细胞/总细胞的百分比。4.5. Ki67、β-连环蛋白、MMP9、I 型胶原、NKI/Beted 和 cd-200 的免疫组织化学如前所述，对HF切片（3 μm）进行脱蜡和再水化[60]，并通过在高压锅中用10 mM柠檬酸盐缓冲液（pH 6.5）热处理2 min来实现抗原修复。接下来，阻断内源性过氧化物酶，并将切片与抗 Ki67 （1：1000） （Abcam， Cambridge， UK， ab16667）、β-catenin （1：200） （Santa Cruz Biotechnology， Dallas， TX， USA， sc-7963）、金属蛋白酶 9 （1：1000） （Abcam 76006-1）、NKI/beted （1：100） （Monosan， Uden， The Netherlands， Mon7006-1）、cd-200 （1：5000） （Biorad， Munich， Germany， MCA 1960GA） 一起孵育;胶原蛋白 I （1：1000） （Sigma SAB4200678） 在室温下过夜。第二天，根据制造商的说明，使用 Master Polymer Plus 检测系统 （Persoxidase） （MAD-000237QK-10） （Master Diagnostica， Granada， Spain） 孵育切片。切片用苏木精复染。4.6. 苏木精和 Masson 三色染色测定总胶原蛋白苏木精染色是显微镜观察和诊断的金标准。然而，其他额外的染色剂用于特定目的，例如用于对细胞外基质中的胶原蛋白进行染色的三色染色剂。两种类型的染色均用于毛囊细胞外基质的形态测量研究和胶原蛋白含量评估。将 HFs 固定在 10% 中性缓冲福尔马林中，包埋在石蜡中。HFs 切片常规脱蜡、再水化和用蒸馏水洗涤，并用苏木精或 Masson 三色染色 （总胶原蛋白） 染色以进行组织病理学评估。4.7. 免疫组化图像的组织形态学分析和评估用不同的放大倍率拍摄显微镜图像，用于组织形态学分析和免疫表征。用数码显微镜（Nikon-Eclipse-T2R，Nikon Instruments Inc.，Melville，NY，USA）拍摄切割样品的显微镜捕获。分析了每张幻灯片的至少 10 个随机字段。Image-J 分析用于测量不同的参数。每个标志物的表达表示为阳性细胞/总细胞的百分比，并在对照上标准化。通过在两个实验组的每张图像中至少进行五次测量来评估表皮深度测量。每个实验组至少拍摄 15 张图像。4.8. 统计分析所有实验程序和分析均盲目进行治疗。使用 Graph-Pad Prism 6.01 软件（GraphPad Software， Inc.， La Jolla， CA， USA）进行统计分析。数据被归一化并表示为均值±标准误差 （SEM）。使用双尾 Student 的 t 检验。统计显着性的限值设定为 p < 0.05。5. 结论本研究显示了 CRET 治疗 AGA 的潜在疗效。因此，在患有这种病理症患者的卵泡中应用 CRET 信号会增加不同 AGA-HF 细胞群的增殖并减少死亡。此外，它还能增强头发纤维的强度，减少头发纤维的颜色损失。CRET 诱导的这些作用将与头发周期的延长或重新进入生长期相容，并将导致受 AGA 影响的毛囊损失减少。综上所述，这些结果将支持基于 RF 的疗法治疗脱发的有效性。然而，这些数据来自一项离体研究，这是直接外推到患者的一个限制。因此，有必要进行临床试验以了解 CRET 疗法和其他 RF 疗法治疗 AGA 的真正有效性。