Eprenetapopt

作为人类基因组中被研究最为透彻的分子，TP53 基因不仅仅是一个简单的“抑癌基因”。它位于染色体 17p13.1 区域，其编码产物 p53 蛋白是调控细胞应激反应的核心转录因子。     在肿瘤基因组图谱（TCGA）的数据中，超过 50% 的人类恶性肿瘤伴随 TP53 突变，在卵巢高浆癌和食管鳞癌中这一比例甚至超过 90%。然而，尽管学界对 TP53 的机制认知已经非常深入，它至今仍是临床药物研发中公认的“不可成药（Undruggable）”靶点。要理解这一困局，我们需要从其底层的蛋白调控机制说起。 一、精密的负反馈与快速响应机制     在非应激状态的正常细胞中，p53 蛋白维持着极低的稳态水平，其半衰期仅约 20 分钟。这种低水平维持主要依赖于它与 E3 泛素连接酶 MDM2 的相互作用。MDM2 能够结合 p53 的 N 端反式激活结构域（TAD），介导其泛素化并进入蛋白酶体降解。这一 MDM2-p53 负反馈环路是维持细胞正常生理功能的关键。     当细胞受到 DNA 损伤（如双链断裂）、缺氧或癌基因激活信号时，ATM/ATR 或 Chk1/Chk2 等激酶被激活。这些激酶会对 p53 的关键位点（如 Ser15、Ser20）进行磷酸化修饰。磷酸化导致 p53 与 MDM2 的结合界面构象改变，两者解离，p53 逃逸出降解途径，蛋白稳定性得以大幅提升。     聚积在细胞核内的 p53 形成同源四聚体（Tetramer），结合到特定的 DNA 反应元件上，根据应激程度启动不同的转录程序： 在轻度损伤下，它激活 p21 (CDKN1A)，抑制 CDK 复合物，阻滞细胞周期于 G1 期，为 DNA 修复争取时间； 在不可逆损伤下，它激活 PUMA、NOXA 及 BAX，诱导线粒体外膜透化（MOMP），启动内源性细胞凋亡程序。 二、铁死亡 (Ferroptosis) 与代谢重塑     除了经典的细胞周期阻滞和细胞凋亡途径外，近年来的研究发现 p53 在代谢调节领域同样发挥着受到广泛关注的抑癌作用，其中最为核心的机制是诱导铁死亡。这是一种铁依赖性的调节性细胞死亡形式，其生化特征与传统的细胞凋亡截然不同，主要表现为细胞内脂质过氧化物的致死性积累。这一非经典通路的发现，极大地扩展了学界对 p53 抑癌网络的认知范围，将视线从细胞核内的转录控制延伸至细胞浆与线粒体的氧化还原代谢平衡。     从分子机制层面来看，p53 诱导铁死亡的关键在于调节 System Xc- 系统。System Xc- 是一种胱氨酸/谷氨酸反向转运体，其核心功能亚基为 SLC7A11。正常肿瘤细胞高度依赖该系统摄入胞外胱氨酸，以合成重要的抗氧化剂谷胱甘肽（GSH），而 GSH 是谷胱甘肽过氧化物酶 4（GPX4）清除过氧化脂质必不可少的辅因子。野生型 p53 能够结合到 SLC7A11 基因的调控区域并直接抑制其转录表达。当 p53 被激活时，SLC7A11 水平下降直接阻断了胱氨酸的摄取，进而引起胞内 GSH 耗竭和 GPX4 活性丧失。     随着抗氧化屏障的崩溃，细胞内会迅速积累大量致命的脂质活性氧（Lipid ROS），最终导致细胞膜发生无法修复的氧化损伤及死亡。这一机制具有重要的病理生理学意义，它解释了在某些敲除 p21、PUMA 或 NOXA 等经典凋亡效应分子的实验模型中，p53 依然能够有效抑制肿瘤生长的现象。这表明 p53 介导的 SLC7A11-Ferroptosis 轴构成了独立于凋亡之外的第二重抑癌防线，为临床上针对那些对凋亡通路产生耐药的肿瘤提供了基于代谢干预的治疗理论依据。 三、错义突变与特殊的“功能获得” (GOF)     与 RB1 或 PTEN 等抑癌基因通常发生缺失或无义突变（导致功能丧失）不同，TP53 在肿瘤中的变异绝大多数为错义突变。这些突变高度集中在核心的 DNA 结合结构域（DBD），其中包括 R175、R248、R273、R245 等数个高频热点。     这种突变模式带来了双重后果。 首先是野生型功能的丧失（LOF, Loss of Function），突变 p53 无法结合特异性 DNA 序列，导致 p21 等下游基因无法表达，细胞失去 G1 期检查点控制。 其次，更具破坏性的是“功能获得”（Gain of Function, GOF）。由于构象改变，突变型 p53 蛋白不再被 MDM2 识别降解，导致其在细胞核内大量积累（这也是临床免疫组化 IHC 检测显示 p53 “弥漫强阳性” 的分子基础）。     高浓度的突变 p53 往往发生错误折叠，形成淀粉样聚集体，并通过与其他转录因子（如 ETS2、NF-Y、VDR）发生异常相互作用，转而激活与化疗耐药（MDR1）、细胞侵袭及肿瘤干性相关的基因表达。这解释了为何携带 TP53 突变的肿瘤往往具有更高的侵袭性和不良预后。 四、临床转化策略与药物研发瓶颈     针对 TP53 的药物开发受限于其蛋白结构特征：野生型 p53 表面缺乏明显的疏水性结合口袋，导致小分子药物难以设计。目前的研发策略主要集中在以下三个方向：     第一类策略针对野生型 TP53 肿瘤，旨在破坏 MDM2-p53 相互作用。Nutlins 系列化合物（如 Idasanutlin, Milademetan）能够竞争性结合 MDM2 的疏水裂隙，从而释放并稳定 p53。然而，临床试验显示其存在剂量限制性毒性，主要是严重的血小板减少症，这是由于正常骨髓巨核细胞中的 p53 被过度激活并诱导凋亡所致。     第二类策略针对突变型 TP53 肿瘤，旨在恢复突变蛋白的野生型构象。代表药物 APR-246 (Eprenetapopt) 是一种前体药，在体内转化为亚甲基奎宁（MQ），通过与 p53 核心结构域的半胱氨酸残基（Cys124, Cys277）共价结合，在热力学上稳定 p53 的野生型折叠，恢复其转录功能。该药在 TP53 突变的骨髓增生异常综合征（MDS）和急性髓系白血病（AML）中显示了一定的疗效。     第三类策略是合成致死（Synthetic Lethality）。由于 TP53 突变细胞丧失了 G1 期检查点，它们高度依赖 G2/M 期检查点来避免有丝分裂灾难。因此，利用 WEE1 抑制剂（如 Adavosertib）或 CHK1 抑制剂 阻断 G2 期检查点，可特异性地杀伤 p53 缺陷的肿瘤细胞，而保留正常细胞在 G1 期停滞的能力。 五、实验方法论中的关键误区     在进行 TP53 相关的基础与转化研究中，必须注意以下几个关键的方法学问题： 由于 p53 主要受蛋白稳定性及翻译后修饰调控，仅依靠 qPCR 检测 mRNA 水平往往无法反映真实的通路激活状态。在 Western Blot 实验中，除了总蛋白，必须检测特定的磷酸化位点（如 p-Ser15）或乙酰化水平（如 Ac-K382）作为激活指标。 不同细胞系的 TP53 状态差异巨大：HeLa 细胞表达野生型 TP53 但受 HPV E6 蛋白介导而快速降解；HCT116 为野生型；MDA-MB-231 则携带 R280K 错义突变。在设计实验尤其是功能性挽救实验时，必须严格核对细胞背景。 传统的 TP53 敲除小鼠仅能模拟功能缺失，若要研究错义突变带来的 GOF 效应及微环境互作，必须构建 Knock-in 点突变小鼠模型（如对应的 Trp53 R172H 模型）。 结语     TP53 的研究史折射了现代生物医学从“单一基因功能”向“复杂蛋白网络”认知的转变。要攻克这一靶点，不仅需要理解其结构生物学特征，更需要系统掌握其在代谢重编程、铁死亡及肿瘤免疫微环境中的非经典功能。     在我的《明星分子万神殿》专栏中，我们将继续深入剖析明星分子的研究逻辑，帮助大家建立从分子机制到临床应用的完整知识体系。     欢迎大家点赞、关注，您的支持就是我更新的动力！

P53激活剂专利动态分析 中美企业技术竞争与战略演进 本文通过对P53激活剂领域专利动态跟踪分析，旨为监测该领域竞争格局、研发方向，为企业优化研发策略及管线布局等提供关键决策依据，助力精准医疗发展。 01 技术突破：从"不可成药"到精准靶向 P53是与RAS、MYC齐名的三大不可成药靶点。P53基因突变在肿瘤患者中非常常见，其发生率超过了50%，每年潜在患者数量达1750万。随着研究进展，突变型P53以其在癌症发生发展过程中的关键角色以及在干预癌症进程中的潜在价值，成为了癌症治疗领域极具吸引力的成药靶点。P53激活剂虽临床开发挑战大，但已成为肿瘤精准治疗的重要探索方向。 不同于传统通过破坏靶点功能的疗法，靶向P53药物是要重新激活基因而非抑制来实现抗癌效果，就是让失活的“守护者”死而复生，其独特作用机制使其成为癌症治疗的潜在突破口，成为泛瘤种治疗的新方向，目前已有不少围绕P53靶点开发的靶向药，期望通过恢复p53功能实现精准治疗。 02 中美领跑P53激活剂技术研发，新西兰探索起步 在P53激活剂技术这一前沿领域，中美两国展现出强劲的创新实力与研发活力。 截至2025年8月14日，全球该领域2025年公开专利中，美国与中国分别以48%和46%的占比领跑，凸显两国在生物医药技术领域的核心地位。 申请人排名TOP10中，美国企业占据4席且位次靠前，领军企业包括皮姆维制药（PMV Pharmaceuticals Inc.）、安塔列斯疗法（Antares Therapeutics Inc.）、蝎子疗法（Scorpion Therapeutics Inc.）和弗拉雷治疗（Flare Therapeutics Inc.），彰显其技术积淀与市场影响力。 中国同样表现亮眼，TOP10中独占5席，北京加科思与上海宇道分列第二、第三，长春金赛、深圳众格及深圳艾欣达伟紧随其后，反映国内研发生态的蓬勃生机。 新西兰虽也有创新成果问世，但体量较小，专利申请量仅占6%，维乐菲尔概念（Welfare Concepts Limited）作为唯一跻身TOP10的新西兰企业，排名居中下水平，显示其在该领域的探索尚处起步阶段。 整体来看，‌近期全球P53激活剂技术研发呈现中美双强垄断格局，中国研发活跃但位次分化，美国技术积淀深厚，新西兰体量有限尚处探索阶段。 图1：2025年截至目前P53激活剂领域专利申请人排名 图2：2025年截至目前P53激活剂领域专利申请人地域分布 03 P53激活剂的专利攻防与技术迭代 PMV Pharmaceuticals在P53激活剂领域处于全球领先地位，自2013年起专注于开发靶向突变型P53的小分子药物，其核心药物rezatapopt（PC14586）是全球首个针对TP53 Y220C突变的小分子抑制剂，已进入关键性临床阶段。PYNNACLE临床II期中期数据显示药物在卵巢癌、肺癌、乳腺癌等8种肿瘤中取得治疗应答，适应症覆盖范围广。 PMV Pharmaceuticals采用“核心结构-优化创新-应用拓展”的经典策略，通过多维度专利网构建技术壁垒，同时延长产品生命周期。 2018年布局基础结构的通式化合物专利，重点保护炔基取代的吲哚母核骨架，覆盖核心结构的大量可能衍生物，为后续具体化合物提供基础保护范围，同时防止竞争对手通过简单结构修饰绕开专利，构建技术壁垒。 2020年布局具体化合物专利，明确保护拟上市药物单一分子结构，确保商业化独占权。 2023年通过同位素取代结构优化布局了氘代化合物专利；同年还布局了治疗方法专利，拓展临床应用场景，延长专利生命周期。 2024年布局联合用药专利，涉及P53激活剂与通过MDM2通路发挥作用的抗癌剂的联用，探索协同效应，覆盖组合疗法；同年还布局双环化合物专利，拓展母核结构多样性，通过结构创新维持技术领先。 加科思药业，自主研发p53 Y220C激活剂JAB-30355，于2024年3月获美国FDA批准临床试验，成为全球第二家进入该领域的公司，标志着加科思在p53 Y220C靶点研发的领先地位。JAB-30355通过口服生物活性小分子设计提高了生物利用度，并在胃癌、肺癌、乳腺癌等模型中展现出肿瘤消退效果，计划在中国提交临床试验申请获批后同步推进中美临床试验。 加科思药业围绕JAB-30355已申请多项核心专利，2022年-2023年布局化合物专利，覆盖JAB-30355的母核结构（苯并噻吩骨架），并通过对通式化合物杂环结构拓展（苯并呋喃/苯并吡咯骨架），以及对中间连接结构扩展为亚烷基、亚烯基或亚炔基，扩大保护范围。2024年布局晶型专利，筛选出目标化合物富马酸盐的特定晶型，在稳定性、溶解性、吸湿性或生物利用度等方面具备优势，为后续制剂开发提供优化方案及技术壁垒。JAB-30355的专利布局体现了从分子设计到制剂优化的系统性策略，是技术迭代与商业化需求的完美结合。 上海宇道生物，由自主研发的AI+变构分子平台（ALLOSTARTM）开发的NTS071，是全球首个针对p53 Y220C突变的变构重激活剂小分子药物，已于2025年4月获美国FDA批准进入临床试验。NTS071采用全新化学骨架设计，作用机制更精准，对突变蛋白的激活效率提升3倍以上。临床前数据显示其疗效优于同类产品，被评价为“同类最佳药物”（Best-in-Class）。 上海宇道生物，围绕NTS071布局3组靶向p53突变的通式化合物专利，‌基于核心骨架结构，进行通式化合物扩展‌，通过连接基团变化、侧链修饰、同位素替换等方式构建吲哚嗪羧酸类、N-磺酰酰胺含氮稠杂环类、氘代吲哚嗪类通式结构，重点优化现有p53 Y220C口袋结合剂成药性及与p53 Y220C的DNA结合能力，形成“核心-外围”化合物保护网，通过保留变构结合关键基团，修饰非活性位点以扩大保护范围‌。总之，宇道生物的专利布局通过“核心分子+多维度通式”策略，兼顾技术深度与商业灵活性，为创新药研发与出海积攒更多筹码。 长春金赛，自主研发的GenSci128片已于2025年4月和5月分别在中国及美国获批开展临床试验。GenSci128片通过特异性结合TP53 Y220C突变形成的结构口袋，恢复突变蛋白的正常构象，从而恢复其抑制肿瘤的功能，成为全球首个针对TP53 Y220C突变的选择性重激活剂。作为国内首个进入临床阶段的P53激活剂，GenSci128片的成功开发标志着金赛药业在肿瘤靶向治疗领域的突破性进展，其国际化布局进一步强化了企业在全球创新药市场的竞争力。 长春金赛围绕GenSci128已申请多件p53-Y220C选择性小分子重激活剂通式化合物专利，通过申请不同通式化合物专利（母核骨架结构），保护核心药效团（疏水口袋结合基团），金赛药业旨在覆盖所有可能激活TP53 Y220C突变蛋白的小分子结构变体，扩大保护范围，规避竞争对手的结构绕道。通过构建具备TP53 Y220C突变特异性结合技术特性的通式化合物，区别于泛p53激活剂（如APR-246），形成差异化壁垒‌及竞争优势。 04 P53靶向治疗新纪元：专利动态揭示技术布局 据2025年四大领先企业的专利动态分析，P53激活剂领域已形成系统化布局策略，为后续参与者提供重要启示。 专利布局遵循"基础保护→核心锁定→技术拓展→应用延伸"的递进路径。注重差异化技术路径‌，通过变构激活、选择性重激活等机制实现技术突破，结构创新成为维持技术领先的关键手段。 布局核心策略是通过对母核结构进行多维度拓展（杂环变异、连接基团延伸、同位素替换）布局通式化合物专利群，构建结构保护体系，防止绕道设计。 强化外围专利布局‌，在核心化合物基础上，延伸布局晶型、制剂、用途、治疗方法、联合用药等专利，择机逐级构建新技术壁垒，延长专利保护周期。 P53激活剂领域的专利竞争已从单一化合物保护升级为全产业链布局，企业需在技术创新的同时，构建具备前瞻性的知识产权战略体系。 END #抗肿瘤