HER2 Positive Solid Tumors

● III期研究DESTINY-Breast06结果显示，德曲妥珠单抗（商品名：优赫得，以下简称“德曲妥珠单抗”）表现出具有统计学意义和临床意义的无进展生存期（PFS）获益。 ● 若获得批准，由第一三共和阿斯利康联合开发的德曲妥珠单抗，将成为用于未经化疗的转移性乳腺癌患者的首个HER2靶向治疗和抗体偶联药物 (ADC)。 　　东京和新泽西州巴斯金里奇 – (2024 年10月) – 第一三共和阿斯利康联合开发的德曲妥珠单抗(trastuzumab deruxtecan) 补充生物制品许可申请（sBLA）已被美国FDA受理，并被授予优先审评资格，用于转移阶段接受过至少一种内分泌治疗、不可切除或转移性、HER2低表达（IHC 1+或IHC 2+/ISH-）或HER2超低表达（IHC 0伴膜染色）乳腺癌成人患者。 　　德曲妥珠单抗是一款采用独有技术设计的靶向HER2的DXd ADC，该药物由第一三共研制，并由第一三共和阿斯利康共同开发和商业化。 　　相较于现有治疗方案具有更高安全性或疗效、预防严重疾病或提高患者依从性的药品，美国食品药品监督管理局 (FDA) 可授予该药品上市申请优先审评资格。《处方药使用者付费法案》(PDUFA) 日期，即FDA做出监管决定的日期是 2025年2月1日。基于III期研究DESTINY-Breast06的数据，继2024年8月 FDA授予德曲妥珠单抗突破性疗法认定之后，授予该优先审评资格。 　　HR阳性、HER2阴性是最常见的乳腺癌亚型，约占所有乳腺癌的70%。1尽管被归类为HER2阴性，此类肿瘤仍然存在一定程度的HER2表达。2据估计，既往被归为HR阳性、HER2阴性的肿瘤中，高达85%至90%可能是HER2低表达或超低表达肿瘤。3,4 　　该sBLA基于DESTINY-Breast06研究数据，该数据在2024年美国临床肿瘤学会(#ASCO24）年会上以口头报告形式公布，并于近期发表在《新英格兰医学杂志》。整个研究人群中，基于盲态独立中心审查 (BICR) 确定，与化疗相比，德曲妥珠单抗可将疾病进展或死亡风险降低37% （风险比[HR]0.63；95%置信区间[CI]：0.53-0.75；p<0.0001）。德曲妥珠单抗与化疗的中位PFS分别是13.2个月和8.1个月。 　　HER2低表达和超低表达患者的研究结果一致。在对HR阳性、HER2低表达转移性乳腺癌患者的主要终点分析中，基于BICR评估，德曲妥珠单抗治疗组的中位PFS是13.2个月，化疗组的中位PFS是8.1个月 (HR 0.62; 95%CI：0.51-0.74；P<0.0001)。在HER2超低表达患者中进行的预定探索性分析中，德曲妥珠单抗治疗组和化疗组的中位PFS分别是13.2个月和8.3个月(HR 0.78；95%CI：0.50-1.21)。 　　在DESTINY-Breast06中，德曲妥珠单抗的安全性与既往乳腺癌临床研究一致，未发现新的安全性问题。发生概率大于5%或更高的常见3级或更高级别治疗中出现的不良事件（TEAE）主要为中性粒细胞减少症 (20.7%)、白细胞减少症 (6.9%) 和贫血(5.8%)。11.3%患者发生间质性肺疾病 (ILD) 和/或非感染性肺炎。大多数ILD或非感染性肺炎事件级别较低 (1级[n=7；1.6%]或2级[n=36；8.3%])。独立裁定委员会确定共发生3起3级ILD事件 (0.7%)、0起4级事件和3起5级事件 (0.7%)。 Ken Takeshita 博士 第一三共全球研发负责人 　　该优先评审显示了德曲妥珠单抗在HER2低表达转移性乳腺癌方面向更前线和更广人群适应症拓展的潜力，包括HER2超低表达人群。我们期待与FDA密切合作，为更多患者带来获益。 Susan Galbraith 博士 阿斯利康肿瘤研发部执行副总裁 　　虽然内分泌疗法广泛用于HR阳性转移性乳腺癌的初始治疗，但在后线治疗时患者获益有限，且二线化疗缓解率和预后较差。DESTINY-Breast06的结果表明，德曲妥珠单抗有潜力改变目前HR阳性乳腺癌的治疗格局，成为HER2低表达或超低表达患者在接受内分泌治疗后的第一种靶向疗法。 关于DESTINY-Breast06 　　DESTINY-Breast06是一项全球、随机、开放性、III期研究，旨在评估德曲妥珠单抗 (5.4 mg/kg) 与研究者所选化疗（卡培他滨、紫杉醇或白蛋白结合型紫杉醇）在HR阳性、HER2低表达（IHC 1+或IHC 2+/ISH-）或HER2超低表达（定义为IHC 0伴膜染色[IHC>0<1+]）晚期或转移性乳腺癌患者中的有效性和安全性。参加本研究的患者既往未接受过化疗，但既往接受过至少两线内分泌治疗。如果患者既往接受过内分泌联合CDK4/6抑制剂治疗，并在6个月内出现疾病进展，或接受过内分泌治疗作为辅助治疗并在24个月内出现疾病复发，也符合入组条件。 　　DESTINY-Breast06的主要终点是BICR确定的HR阳性、HER2低表达患者人群的PFS。关键次要终点包括BICR确定的整个研究人群（HER2低表达和超低表达）的PFS、HER2低表达患者人群的总生存期 (OS) 以及整个研究人群的OS。其他次要终点包括客观缓解率 (ORR)、缓解持续时间 (DoR)、至首次后续治疗或死亡的时间、至第二次后续治疗或死亡的时间以及安全性。HER2超低表达亚组分析尚无法证明结果具有统计学意义。 　　DESTINY-Breast06在亚洲、欧洲、北美洲、大洋洲和南美洲的多家研究中心招募了866例患者 (HER2低表达:n=713; HER2超低表达: n=153)。欲了解有关该研究的更多信息，请访问ClinicalTrials.gov。 关于乳腺癌和HER2表达 　　在全球范围内，乳腺癌是第二常见的癌症，也是导致癌症相关死亡的主要原因之一。3 2022年，全球确诊的乳腺癌病例超过200万例，死亡人数超过66.5万。5 在美国，每年确诊的乳腺癌病例超过30万例。在中国，乳腺癌是女性群体中最常见的癌 症，2020 年确诊乳腺癌病例已接近 42 万13。2020 年，中国乳腺癌死亡人数接近 12 万，约占全球乳腺癌死亡人数的 18%。13 　　HR阳性、HER2阴性是最常见的乳腺癌亚型，约占所有乳腺癌的70%。1 HER2是一种酪氨酸激酶受体促生长蛋白，在多种肿瘤细胞表面均有表达，包括乳腺癌。4 HER2表达水平高 (IHC 3+或IHC2+/ISH+) 的患者被归类为HER2阳性，并接受HER2靶向治疗，这些患者约占所有乳腺癌患者的15%～20%。5 长久以来，未归类为HER2阳性的肿瘤被归类为HER2阴性；然而，许多此类肿瘤仍然存在一定水平的HER2表达。2 据估计，大约60%～65%的HR阳性、HER2阴性乳腺癌为HER2低表达状态，并且另外25%可能是HER2超低表达状态。3,4 　　在HR阳性转移性乳腺癌的早期治疗线中，内分泌疗法被广泛、连续使用。然而，经过两线内分泌治疗后，继续内分泌治疗的疗效通常较为有限。6 目前内分泌治疗后的标准疗法是化疗，但其缓解率和预后均较差。9,7,8,9 　　基于DESTINY-Breast04研究批准德曲妥珠单抗用于治疗既往在转移性疾病阶段接受过至少一种系统治疗的，或在辅助化疗期间或完成辅助化疗之后6个月内复发的，不可切除或转移性HER2低表达乳腺癌，之前没有专门用于HER2低表达患者的靶向治疗获得批准。10 目前也没有专门用于HER2超低表达患者的疗法获得批准。11 　   关于德曲妥珠单抗　 　 　　德曲妥珠单抗是一款靶向HER2的ADC。采用第一三共独有的DXd ADC技术设计，是第一三共肿瘤产品组合中的领先产品，也是阿斯利康ADC平台中最先进的项目。德曲妥珠单抗由一种HER2单克隆抗体通过可裂解四肽连接子与若干拓扑异构酶I抑制剂有效载荷（依喜替康衍生物，DXd）连接组成。 　　基于DESTINY-Breast03研究结果，德曲妥珠单抗 (5.4 mg/kg) 已在全球超过65个国家/地区获得批准，用于治疗既往在转移阶段或在新辅助或辅助治疗期间接受过一种抗HER2治疗方案，并且在治疗期间或完成治疗之后6个月内出现疾病复发的、不可切除或转移性、HER2阳性 (IHC 3+或原位杂交[ISH]+) 乳腺癌成人患者。 　　基于DESTINY-Breast04研究结果，德曲妥珠单抗 (5.4 mg/kg) 已在全球超过65个国家/地区获得批准，用于治疗既往在转移阶段接受过一种全身治疗，或在辅助化疗期间或完成辅助化疗后6个月内出现疾病复发的、不可切除或转移性、HER2低表达(IHC1+或IHC 2+/ISH-) 乳腺癌成人患者。 　　基于DESTINY-Lung02以及DESTINY-Lung05研究结果，德曲妥珠单抗 (5.4 mg/kg) 已在全球超过45个国家/地区获得批准，用于治疗通过当地批准的检测方法检出肿瘤存在HER2(ERBB2)激活突变，并且既往接受过一种全身治疗的不可切除或转移性NSCLC成人患者。后续确证性研究的临床获益得到验证后，将支持本适应症在中国的正式批准。 　　基于DESTINY-Gastric01、DESTINY-Gastric02、DESTINY-Gastric06研究获得的结果，德曲妥珠单抗 (6.4 mg/kg) 已在全球超过45个国家/地区获批，用于治疗既往接受过基于曲妥珠单抗的治疗方案的局部晚期或转移性HER2阳性 (IHC 3+或IHC 2+/ISH+) 胃或胃食管交界处 (GEJ) 腺癌成人患者。后续确证性研究的临床获益得到验证后，将支持本适应症在中国的正式批准。 　　基于DESTINY-PanTumor02、DESTINY-Lung01和DESTINY-CRC02研究的疗效结果，德曲妥珠单抗 (5.4 mg/kg) 在美国获批用于治疗既往接受过全身治疗且无满意替代治疗选择的不可切除或转移性HER2阳性 (IHC 3+) 实体瘤成人患者。 关于德曲妥珠单抗临床开发计划 　　旨在评价德曲妥珠单抗单药治疗多种HER2靶向癌症的疗效和安全性的全面临床研发计划正在全球范围内进行。联合免疫治疗等其他抗肿瘤治疗的研究也在进行中。 关于第一三共和阿斯利康的合作 　　第一三共与阿斯利康分别于2019年03月和2020年07月达成全球合作，共同开发并商业化德曲妥珠单抗和datopotamab deruxtecan (Dato-DXd)，在日本市场第一三共拥有各款ADC产品的独家权益。第一三共负责德曲妥珠单抗和Dato-DXd的生产和供应。     关于第一三共ADC产品组合     　　第一三共的ADC产品组合包括7款处于临床开发阶段的ADC，这些ADC基于第一三共开发的两个ADC技术平台。 　　目前临床开发进展最为领先的ADC平台当属第一三共的DXd ADC技术平台，每款ADC由单克隆抗体通过可裂解四肽连接子与多个拓扑异构酶I抑制剂有效载荷（一种依喜替康衍生物，DXd）连接组成。DXd ADC产品组合目前包括靶向HER2的ADC德曲妥珠单抗和靶向TROP2的ADC Dato-DXd，上述两款产品目前正由第一三共与阿斯利康共同开发并在全球范围内商业化。Patritumab deruxtecan（HER3-DXd，靶向HER3的ADC）、ifinatamab deruxtecan（I-DXd，靶向B7-H3的ADC）、raludotatug deruxtecan（R-DXd，靶向CDH6的ADC）目前正由第一三共与默沙东共同开发并在全球范围内商业化。DS-3939是一款靶向TA-MUC1的ADC，目前正由第一三共开发。 　　第一三共的第二个ADC平台由单克隆抗体与改良吡咯并苯并二氮杂卓 (PBD) 有效载荷连接组成。DS-9606是一款靶向CLDN6的PBD ADC，是计划利用该平台进行临床开发的几款ADC中的第一款。 　　Dato-DXd、I-DXd、HER3-DXd、R-DXd、DS-3939和DS-9606均为在研药物，尚未在任何国家/地区获批用于任何适应症。尚未完全确定安全性和疗效。             关于第一三共             　　第一三共是一家为社会可持续发展做贡献的创新型全球医疗保健公司，致力于发 现、开发和提供新的标准疗法，以提高世界各地患者的生活质量。第一三共专注制药 行业120余年，凭借其世界一流的科学和技术，为癌症、心血管疾病和其他医疗需求远 未得到满足的疾病患者研发新的治疗方法和创新药物。如欲了解更多信息，请访问www.daiichisankyo.com 参考文献： 1.National Cancer Institute. SEER Cancer Stat Facts: Female Breast Cancer Subtypes. Accessed September 2024. 2.Sajjadi E, et al. Cancer Drug Resist. 2022;5(4):882-888. 3.Bray F, et al. CA Cancer J Clin. 2024; 10.3322/caac.21834. 4.Iqbal N, et al. Mol Biol Int. 2014;852748. 5.Ahn S, et al. J Pathol Transl Med. 2020;54(1):34-44. 6.Manohar P, et al. Cancer Biol Med. 2022 Feb 15; 19(2):202-212. 7.Cortes J, et al. Lancet. 2011;377:914-923. 8.Yuan P, et al. Eur J Cancer. 2019;112:57-65. 9.Jerusalem G, et al. JAMA Oncol. 2018;4(10):1367-1374. 10.Modi S, et al. N Engl J Med. 2022;387:9-20. 11.Eiger D, et al. Cancers. 2021 Mar; 13(5): 1015. 13 Wei Cao, et al. Chin Med J (Engl). 2021; 134(7): 783–91. a 声明: 1.本材料不用于任何推广目的，相关信息亦不应作为治疗或使用建议。如有相关问题请咨询医疗卫生专业人士。 2.本文涉及未在中国获批的产品或适应症，第一三共不推荐任何未获批药品/适应症的使用。 AD-105-2024-000658

注：本文不构成任何投资意见和建议，以官方/公司公告为准；本文仅作医疗健康相关药物介绍，非治疗方案推荐（若涉及），不代表平台立场。任何文章转载需要得到授权。 胃癌是全球范围内常见的恶性肿瘤之一，其高发病率与死亡率持续构成严峻的健康挑战。近年来，得益于医学研究的持续深化与技术创新的飞速发展，胃癌的诊疗策略正经历着深刻的变革，同时，相关药物市场的竞争格局也日益复杂化。 本文依托摩熵咨询最新发布的《市场研究专题报告——胃癌药物》中的部分精华内容，聚焦于HER2治疗靶点，深入地探讨胃癌治疗领域的最新诊疗指南进展，分析当前市场的竞争格局，旨在为临床医生提供前沿的治疗方案参考，助力患者获取最有效的治疗信息，也为制药企业及相关行业参与者提供宝贵的市场洞察与策略指导。 01 HER2靶点治疗进展与市场分析 1. 曲妥珠单抗为基础的治疗方案仍是一线治疗标准选择 HER2是表皮生长因子受体家族重要成员，作为酪氨酸激酶受体，在调节细胞增值、分化和生存等众多过程中发挥重要作用。在胃癌中，HER2阳性率约为12%-18%。 曲妥珠单抗作为基础的治疗方案，长期以来一直是HER2阳性晚期胃癌一线治疗的标准选择。然而，随着新型ADC药物如德曲妥珠单抗（T-DXd/DS-8201）的崛起，这一领域正经历着深刻变革。 三线治疗中既往ADC只有维迪西妥单抗，在《CSCO胃癌诊疗指南（2024版）》中，德曲妥珠单抗由于临床研究中对HER2阳性（IHC3+或IHC2+/ISH+）患者的疗效表现被纳入指南，作为III级推荐（2A类证据）。针对HER2阳性（IHC 3+或IHC2+）的转移性胃癌患者的三线及以上治疗，国内自主研发的维迪西妥单抗（RC48）仍然稳居I级推荐（2A类证据）。 摩熵咨询（原药融咨询）深度报告 目前，在HER2阳性晚期胃癌三线治疗中国际上以德曲妥珠单抗为代表，国内以维迪西妥单抗为代表，但随着德曲妥珠单抗可及性提高，其他药物的份额可能被蚕食。 2. 曲妥珠单抗原研市场逐渐被生物类似药蚕食 2010年，ToGA研究首次证明了曲妥珠单抗联合化疗可以显著延长HER2阳性转移性胃癌患者的生存期，开启了胃癌抗HER2靶向治疗时代。 但在随后10年里，针对HER2靶点的药物帕妥珠单抗、拉帕替尼、奈拉替尼等多种药物在HER2阳性的胃癌患者中均未达到研究终点，这也造就了曲妥珠单抗的霸主地位。 曲妥珠单抗（Trastuzumab）原研是罗氏的赫赛汀，最早于1998年9月获得美国FDA 批准上市，2002年9月在我国批准进口。曲妥珠单抗是全球第一个针对HER2致癌位点的药物，也是第一个上市的抗癌靶向药，它的上市开启了肿瘤靶向治疗的先河。 据悉，曲妥珠单抗原研产品全球销售峰值超过70亿瑞士法郎，近年来受生物类似药冲击，其销售额持续下挫。在国内，2017年曲妥珠单抗被纳入医保以后，国内市场便进入了快速放量期，曲妥珠单抗的销售呈现井喷式增长。摩熵医药数据库显示，2022年全国医院终端市场曲妥珠单抗销售额达到68亿元，2023年进一步放量，销售额超过78亿元。 曲妥珠单抗医院终端市场年度销售趋势截图来源：摩熵医药全国医院销售（全终端）数据库 然而随着专利到期，2020年以来曲妥珠单抗生物类似药在我国相继上市，原研企业罗氏的市场份额已经下降至近60%，未来市场份额可能会被进一步蚕食。 摩熵咨询（原药融咨询）深度报告 2020年8月，复宏汉霖自主研发生产的首个国产曲妥珠单抗类似药（商品名：汉曲优）在中国和欧盟同步上市，后其60mg的规格也于2021年8月获批。2023年2月，博锐生物全资子公司博之锐的注射用曲妥珠单抗（商品名：安瑞泽）获批上市，成为国产第2家。 2023年7月和2023年10月，正大天晴和安科生物的曲妥珠单抗产品也相继获批上市。2024年7月，齐鲁制药的注射用曲妥珠单抗生物类似药（商品名：安曲妥）已获得国家药监局批准上市。 3. 曲妥珠单抗各级医院市场分析 据摩熵医药药物流向数据显示，2023年在哈尔滨市，罗氏原研的曲妥珠单抗药物总销售额达到4408.25万元，而复宏汉霖生产的国产曲妥珠单抗类似药总销售额为3856.91万元。在这一年中，罗氏在各季度的销售额均高于复宏汉霖。 摩熵咨询（原药融咨询）深度报告 在哈尔滨市，罗氏及复宏汉霖的曲妥珠单抗2023年销售市场主要集中在三级医院，其中复宏汉霖2023年未涉及一级及其它级别医院市场。 摩熵咨询（原药融咨询）深度报告 罗氏的曲妥珠单抗2023年销售额TOP3医院（哈尔滨市为例）分别为哈尔滨医科大学附属第三医院、哈尔滨医科大学附属第二医院、北大荒集团总医院。 摩熵咨询（原药融咨询）深度报告 复宏汉霖的曲妥珠单抗2023年销售额TOP3医院（哈尔滨市为例）分别为哈尔滨医科大学附属第三医院、北大荒集团总医院、宾县人民医院。 摩熵咨询（原药融咨询）深度报告 摩熵医药药物流向数据，是与全国各省市多家药品流通配送商合作，脱敏合规统计的药物在全国范围内的流向数据，数据详细且全面，落地到具体医院，可覆盖全国三级医院3000+，二级医院10000+，一级和未定级医院75000+，为企业提供全面的市场洞察，助力其优化市场策略、供应链管理和政策响应。 4. ADC引领HER2阳性晚期胃癌精准治疗 近年来ADC药物在HER2阳性胃癌治疗领域蓬勃发展，打破了曲妥珠单抗独木难支的困境。多款创新ADC药物，诸如维迪西妥单抗、德曲妥珠单抗、anvatabart opadotin以及trastuzumab deruxtecan等，针对HER2阳性胃癌展现出了显著的治疗潜力与探索热情。推动了HER2阳性胃癌治疗向更加精准化、个体化的方向迈进，为患者带来了更多希望与选择。 维迪西妥单抗作为首款中国自主研发的HER2 ADC类药物，也是我国首个获得FDA、NMPA突破性疗法双重认定的ADC。2021年6月，维迪西妥单抗通过NMPA优先审评审批程序，附条件批准用于至少接受过2种系统化疗的HER2过表达局部晚期或转移性胃癌，包括胃食管结合部腺癌患者的治疗。当年12月，又获批用于尿路上皮癌治疗。 维迪西妥单抗在肿瘤抗HER2治疗中展现了广阔的应用前景，自上市以来销售额增长迅速，由2021年0.25亿增长至2023年5.95亿，年复合增长率达386%。 德曲妥珠单抗是第一三共和阿斯利康旗下重磅ADC药物。自 2019 年首次获批以来，已在美国、日本、欧盟、中国多个国家和地区获批上市，适应症领域涵盖 HER2 阳性乳腺癌、HER2 阳性胃癌、HER2 低表达乳腺癌、HER2 突变非小细胞肺癌、HER2 阳性实体瘤。目前，其转移性胃癌适应症在国内处于申请上市阶段。 摩熵咨询（原药融咨询）深度报告 此外，强生的anvatabart opadotin和恒瑞医药的trastuzumab deruxtecan，其胃癌适应症的中国研发进度均处于III期临床；石药集团的trastuzumab-MMAE、美雅珂生物的trastuzumab vedotin、复星医药的trastuzumab-drug、百奥泰生物的BAT-8010、百力司康生物/卫材的BB-1701等，其胃癌适应症的中国研发进度处于II期临床阶段。 结语 胃癌诊疗指南的不断更新与市场竞争格局的深刻变化，共同推动着胃癌治疗领域的持续进步。未来，随着更多创新药物的研发与上市，以及精准医疗理念的深入实践，胃癌患者的治疗将更加精准化、个体化，生存率和生活质量也将得到显著提升。 市场研究专题报告：胃癌药物下期内容预告 目录 一、2024年胃癌诊疗指南及市场竞争格局分析：PD-(L)1、VEGFR2治疗靶点 二、2024年胃癌市场趋势分析：CLDN18.2靶点药物研发加速，信达、康方、恒瑞...竞相布局 近期将持续更新，敬请期待 END 本文为原创文章，转载请留言获取授权  联系我们，体验摩熵医药更多专业服务 会议 合作 园区 服务 数据库 咨询 定制 服务 媒体 合作 点击阅读原文，了解更多品牌升级详情！

摘要：双特异性抗体（bpAbs）能够结合抗原上不同且不重叠的表位。这种独特的结合模式使得bpAbs除了单特异性抗体和双特异性抗体（bsAbs）之外，还能发挥新的机制作用，使其成为多种适应症（包括肿瘤学和传染病）的有效治疗手段。双特异性结合可以带来更高的亲和力和特异性，促进拮抗作用，锁定目标构象，并导致高阶目标聚集。这些抗体-目标复合物可以引发强烈的激动作用，增强免疫效应功能，或导致目标快速下调调节和溶酶体转运。这些特性不仅对治疗性抗体具有吸引力，而且越来越多地被探索用于其他模式，如抗体-药物偶联物、T细胞接合器和嵌合抗原受体。近期在bpAb工程上的进展已经使得构建越来越复杂的格式成为可能，这些格式开始在临床上显示出希望。 1.引言 在2022年美国新批准的药物中，抗体疗法占了30%。在开发中的抗体中，观察到高度工程化分子的数量显著增加，包括双特异性抗体（bsAbs）。双特异性抗体（bpAbs）是bsAbs的一个子集，对同一分子靶标的特有、不重叠的表位具有特异性。这种独特的结合模式建立于30多年前，能够实现差异化的作用机制（MoAs）。在过去十年中，随着临床试验中首次取得成功，bpAbs的治疗潜力已变得明显。这些开创性的分子为当今临床开发中越来越多的bpAbs铺平了道路（表1）。本综述提供了bpAbs的不同格式和MoAs、当前的临床管线和前景的概述。 2.双特异性格式 在抗体发现和工程方面的进展使得组装针对不同表位的结合域的bpAb格式越来越复杂，这些格式采用不同的架构。格式的选择取决于目标生物学和提议的MoA。关键的设计考虑因素包括目标表位、单个结合域的数量和性质、半衰期延长和效应功能介导域的添加，以及确保所有域正确组装成功能性bpAb的策略。后者可以简单到将单个域与灵活的链接器串联在一个单一蛋白中，或者在含有结晶片段（Fc）域的bpAbs中，取决于多达四个不同蛋白与相应的引导突变在重链（HCs）和轻链（LCs）中的配对。预测有效的表位对是困难的，无论是通过理性设计还是通过抗体混合物。因此，能够高效地生成和筛选给定bpAb格式中的大量表位对矩阵是关键。除了功能性和可行性之外，在选择bpAb格式时，开发性考虑至关重要。早期对bpAbs的生物物理责任进行测试可以减少动物研究和临床试验中失败的风险。同样，bpAb格式的选择可能影响下游制造和质量控制，因为bpAb格式复杂性可能导致不良的开发性或由于bpAb格式复杂性导致的错配副产品。 迄今为止在临床上测试的bpAbs不仅具有多样的格式，而且还涉及大量单个结合域（图1）。单链抗体格式，如单域抗体（sdAbs）和单链可变片段（scFvs）特别容易在双特异性格式中配对。因此，首批进入临床的两种bpAbs，ALX-0651和BI 1034020，由串联的sdAbs组成。基于抗体片段的bpAbs通常在循环中的半衰期较短，需要进一步工程化以提高暴露量。小尺寸使sdAbs成为嵌合抗原受体（CARs）的理想构建块，如双特异性CAR-T疗法ciltacabtagene autoleucel（cilta-cel）和OriCAR-017所突出的。 迄今为止在临床上测试的大多数bpAbs具有更规范的、含有Fc的架构，可以根据HC轴的对称性进行分类（图1）。对称bpAbs由相同的HC或HC/LC对组成，而不对称分子由具有不同结合域的不同半部分组成。四价分子MEDI4276和BAT2022是对称bpAbs的例子。 图1. 在临床试验中评估的双特异性抗体结构。条纹域代表常见的轻链VL或IgG4 Fc。REGN5093-M114每个抗体平均含有3.2个非特异性结合的药物。MBS301不包含增强六聚体化的突变；*药物与抗体的比例和结合位点与所示示例不同。 对称型双特异性抗体（bpAbs）由相同的重链（HC）或重链/轻链（HC/LC）对组成，而不对称型分子则由不同的两半组成，具有不同的结合域。四价分子MEDI4276和BAT2022是对称型bpAbs的例子，具有2+2的价数（每个整数描述分子中存在的相同亲和位点的数量），并且单链可变区片段（scFv）或单域抗体（sdAb）分别附加在HC的N端或C端。 另一方面，KN060是一个对称型双特异性抗体，具有串联的sdAb臂，没有轻链。类似于KN060，三特异性抗体TAVO412通过串联的sdAb臂实现双亲和位点靶向，该臂嵌入在更复杂的不对称格式中。 不对称型双特异性抗体通常依赖于Fc突变，以促进双特异性抗体产品的纯化或指导异二聚体形成。例如，REGN5093的两个HC被设计成对蛋白A具有不同的亲和力，允许纯化异二聚体产品。 另一方面，GEN3009是一个不对称型双特异性抗体，具有Fc域导向突变，确保两个不同的HC正确配对。除了HC异二聚体外，正确的LC配对对不对称型双特异性抗体来说可能是一个挑战。在GEN3009的例子中，通过两个亲本抗体的温和体外反应实现正确的配对，允许HC重组而不打乱原始的LC配对。REGN5093展示了一种避免LC配对问题的整体策略，它由两个不同的HC与两个相同的LC配对组成。这些共同的LC可以直接从具有定义的LC多样性的发现平台中获得，如REGN5093的例子，或者从现有的LC中工程化，如anbenitamab和GR2002。 ISB 1442和SAR441236是不对称型双特异性抗体的例子，它们通过增加Fab或scFv结构域扩展了免疫球蛋白G（IgG）结构，分别实现更高的价数，甚至在SAR441236的情况下实现三亲和位点结合。较小的不对称格式，如基于片段-Fab的zanidatamab或基于片段的TNB-738也可以被利用。Zanidatamab将scFv结构域与完整的Fab臂配对，而TNB-738从两个sdAb中衍生出其结合臂，并添加了一个惰性的LC以便于制造。除了免疫球蛋白折叠，双亲和位点设计的ankyrin重复蛋白（DARPin），MP0274，突出了替代框架的潜力。 Labrijn等人全面回顾了所有双特异性格式。 图2. 双特异性抗体的作用机制。(a) 双特异性抗体在顺式或反式中的强靶标结合的示意图。双特异性抗体可以解锁新的生物学活性，例如 (b) 双通路抑制，(c) 锁定外域在酶学上不活跃的状态，或 (d) 双特异性受体靶向以形成更高阶的复合物并引发激动作用。 (e) 另外，双特异性抗体在反式中的结合可以导致受体和Fc结构域聚集，从而快速内化和溶酶体运输或强烈的效应功能，特别是补体依赖的细胞毒性。 3.双特异性抗体的作用机制 3.1.双亲和位点靶向通过亲和力增强结合 与同一目标上的两个不同、不重叠的表位结合，导致双特异性抗体与其它抗体相比具有独特的属性。许多双特异性抗体显示出比它们的单亲和位点亲本抗体更强的结合力和更慢的解离速度。这是由于对同一（顺式）或不同（反式）目标分子上的两个不同表位的亲和力结合。亲和力定义为单个分子通过多个非共价相互作用的组合以及一旦建立了第一次相互作用，结合和重新结合事件的可能性增加。 针对不同表位的抗体片段可以通过亲和力链接来增加目标亲和力，如基于sdAb的、临床评估的双特异性抗体ALX-0651和BI 1034020所强调的。与单价或双价单克隆抗体（mAbs）相比，双特异性抗体的解离可以显著更慢，使它们成为优越的拮抗剂、反向激动剂或反向拮抗剂。顺式结合形成1:1的双特异性抗体目标复合物对于这些应用来说可能很重要，以避免不需要的激动剂活性。 除了表位选择，结合域的几何排列、sdAb连接优化和亲和力调节对于实现期望的作用机制（MoA）和最大化效果至关重要。Kast及其同事证明，结合域的几何形状对于人表皮生长因子受体2（HER2）的双特异性及四价融合蛋白的拮抗作用至关重要，某些配置显示出激动剂活性。同样，针对表皮生长因子受体（EGFR）的三价抗纤维连接蛋白融合蛋白的不同结构在受体下调中显示出不同的效果。对于基于sdAb的拮抗剂，最佳的取向和连接属性可以通过顺式结合实现超高亲和力。最后，临床双特异性抗体ISB 1442依赖于仔细调节的CD38和CD47亲和力以减少靶向毒性。ISB 1442的抗CD47 Fab已被设计为弱亲和力，以实现对CD47阳性红细胞的最小反应性。高亲和力的双特异性抗CD38臂能够在CD38低表达的肿瘤细胞上实现强烈的目标参与和高特异性。 双特异性抗体的高亲和力和缓慢解离也适合于招募免疫细胞。例如，刘及其同事通过融合两个针对不重叠表位的sdAbs与一个抗CD3 Fab，设计了一种T细胞结合抗HER2双特异性抗体。得到的构建物在HER2阳性细胞上的结合比相应的单特异性亲本分子增加了30倍，并在体内HER2低表达模型中显示出优越的肿瘤抑制活性。同样，Rennert等人设计了一种针对C型凝集素结构域家族12成员A（CLEC12A）的双特异性桥接蛋白，该蛋白由其分泌并招募抗CD19 CAR-T细胞。双特异性靶向实现的高亲和力导致增强的抗CD19 CAR-T细胞毒性。由于sdAbs的小尺寸，CAR可以直接配备双特异性抗体，如cilta-cel和OriCAR-017所示。这些CAR的高亲和力双特异性结合可以实现增强和持久的效果。如上所述，对于基于sdAb的拮抗剂，仔细选择表位和连接优化可能是关键。3.2.双特异性抗体能够实现双途径抑制，并且可以锁定受体和外酶的构象 结合两个不重叠的表位可以为双特异性抗体（bpAbs）解锁独特的活性。例如，通过针对低密度脂蛋白受体相关蛋白6（LRP6）的双特异性抗体实现了双通路抑制，同时阻断Wnt1和Wnt3a介导的β-连环蛋白信号通路，显著地没有激动剂活性。 或者，双特异性抗体可以通过物理限制其靶标来使其失活。针对HER2的双特异性DARPin的晶体结构揭示了结合和扭曲两个HER2受体，阻止了与EGFR家族成员形成具有信号能力的二聚体。 此外，针对CD38和CD73的双特异性抗体，包括临床双特异性抗体TNB-738，被证明通过将各自的细胞外结构域锁定在催化非活性状态来作为酶抑制剂。 尽管单独的亲本抗体没有显示出任何活性，但针对CD73的双特异性抗体具有亚纳摩尔级的活性，并实现了超过90%的抑制。 双特异性抗体可以形成免疫复合物，导致激动剂活性、快速目标内化、溶酶体运输和改善的免疫效应功能。 双特异性抗体的一个独特特性是它们能够通过同时在反式中结合两个不重叠的表位来形成高阶免疫复合物。目标交联是多种作用机制的基础，包括增强的激动剂活性、Fc介导的效应功能或清除可溶性目标以及受体下调。 双特异性抗体的聚集可以促进激动剂活性，特别是对于依赖交联以实现有效下游信号传导的受体。 双特异性抗体也可能独特地激活多组分受体复合物。例如，Shi等人设计了一种针对β-klotho的两个不同表位的双特异性抗体，β-klotho是成纤维细胞生长因子受体1c（FGFR1c）的共受体。 双特异性靶向既必要又足以引发强大的激动剂活性。双特异性抗体通过双特异性抗体增加Fc结构域的局部浓度，从而可以改善效应功能。 这种效应已在被单克隆抗体靶向的多价复合物中观察到，例如被治疗性单克隆抗体利妥昔单抗靶向的B细胞标记CD20。 双特异性抗体的结合可以扩展这种机制到更多的目标。例如，zanidatamab形成的大HER2聚集被证明比亲本单克隆抗体的组合导致更强的补体依赖性细胞毒性（CDC），这是由于Fc结构域的预组织和C1q沉积的增加。 这种效应在引入六聚体增强点突变的Fc结构域的针对CD37的双特异性抗体GEN3009中进一步放大。 尽管Fc聚集的效果不那么明显，但双特异性抗体已被证明也可以通过增加与自然杀伤（NK）细胞上的FcγRIII受体的结合来改善抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC）。 类似地，通过针对白细胞介素6（IL6）的双特异性抗体聚集，增加了Fcγ受体在吞噬细胞上的结合，并促进了可溶性目标的快速清除。 交联的受体筏已被证明可以迅速内化并运输到溶酶体，导致目标的快速下调。 值得注意的是，交联效率及其相关效应可能取决于表位选择以及双特异性抗体：目标几何形状。 快速内化和溶酶体运输使双特异性抗体成为抗体药物偶联物（ADCs）中越来越受欢迎的构建模块，它们推动了肿瘤输送和细胞毒素有效载荷的细胞内释放，如MEDI4276、REGN5093-M114和zanidatamab zovodotin所示。 与单特异性药物相比，针对叶酸受体α（FRα）的双特异性ADC IMGN151显示出优越的有效载荷输送。 由于这种效应与细胞表面FRα密度无关，人们推测IMGN151增加的有效载荷输送是通过增强FRα阳性细胞上的结合事件而不是聚集，这应该随着受体密度的增加而减少。然而，这两种机制并不是相互排斥的，需要进一步的研究来阐明IMGN151的作用机制。3.3.同时结合不同的表位可以克服抗性机制 在治疗病毒感染中常见的挑战是找到一种广泛中和抗体（bnAb），它结合在衣壳蛋白的保守区域，并产生持久的反应。单价抗体可以针对保守区域，但容易受到突变逃逸的影响，因为它们对病毒施加了选择性压力。类似于小分子药物的鸡尾酒疗法，bnAbs的组合已被证明通过降低单次突变逃逸变体的机会，有效减少单药治疗的抗性。 双特异性广泛中和抗体结合了鸡尾酒疗法的临床益处和单一药物剂量使用的便利性，使它们成为开发中令人兴奋的领域。 针对严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）的双特异性广泛中和抗体BAT2022，被证明能够结合所有主要的关注变体，包括一个不再被一个亲本抗体识别的受体结合域（RBD）突变体。 对于HIV，三特异性广泛中和抗体SAR441236和几个临床前分子通过针对病毒衣壳蛋白上的多个表位显示出前景。 防止抗性的多价靶向对于肿瘤相关抗原（TAA）的靶向也可能是临床上有用的。肿瘤细胞可以通过选择性剪接消除靶向的表位。人们推测，双特异性CAR-T细胞可以通过同时针对两个表位来防止肿瘤逃逸。 虽然进一步的机制研究将很重要，但这对于癌症免疫疗法是一个有趣的前景。虽然概念上不同，Spangler和同事证明了针对EGFR的三特异性靶向可以恢复对西妥昔单抗耐药的异种移植模型的疗效，这些模型在下游信号通路中有突变。 最有效的三特异性构建物实现了单独使用双特异性或单特异性构建物无法实现的受体下调水平。3.4.治疗应用和模式 迄今为止，大多数双特异性抗体已开发用于肿瘤学应用，并且随着cilta-cel的批准，首个基于双特异性抗体的细胞疗法已获批用于复发和难治性多发性骨髓瘤。 许多其他双特异性抗体目前正在早期临床试验中，用于血液癌症的治疗，包括ISB 1442和OriCAR-017，它们都处于治疗复发/难治性多发性骨髓瘤的I期。 对于实体瘤的治疗，许多双特异性抗体针对HER2，HER2是一种受体酪氨酸激酶，涉及包括细胞增殖在内的多种细胞功能。在20-25%的乳腺癌患者中观察到HER2的高水平过表达。 通过结合临床单克隆抗体曲妥珠单抗和帕妥珠单抗靶向不重叠的结构域IV和II，分别针对两个不同的HER2表位，以前已被证明可以显著改善治疗结果和预后。 HER2的重要性和双表位靶向的临床先例可能解释了管线中大量的抗HER2双特异性抗体，包括anbenitamab和zanidatamab，这是两个最先进的针对HER2的双特异性抗体。 其他杰出的肿瘤学靶标也通过双特异性抗体进行追求，包括通过REGN5093（-M114）和IMGN151分别针对间充质-上皮转化因子（MET）和叶酸受体α（FRα）。 在肿瘤学之外，临床候选药物SAR441236和BAT2022突显了双特异性抗体在传染病中的潜力。阻碍广泛实施针对急性感染的bnAbs的一个挑战是逃逸变体的出现，正如最近的SARS-CoV-2大流行所说明的那样。 针对单一表位的单克隆抗体只在突变逃逸变体发展并广泛传播之前有效，这使得既定的疗法无效。针对多个表位的bnAbs，如针对SARS-CoV-2的双特异性抗体BAT2022或针对HIV的三特异性抗体SAR441236，可以克服急性和慢性疾病中单突变逃逸变体的出现，允许持续使用和更持久的患者反应。 大多数临床双特异性抗体作为裸抗体发挥作用，以治疗病毒感染，通过相应的受体抑制或促进细胞信号传导，或者如TNB-738通过抑制酶活性。越来越多地，双特异性抗体被用于作为ADCs的一部分进行有效载荷输送，因为它们独特的作用机制促进了内化和溶酶体运输，如上所述。目前有六种双特异性ADC正在临床评估中，其中三种也在作为裸双特异性抗体进行研究。此外，双特异性抗体的高亲和力和选择性使其成为工程化高效T细胞招募者和CARs的有吸引力的选择。 在本节中，我们讨论了已在临床中进行测试或正在测试的双特异性抗体的结构、作用机制和活性，这些分子的数据是可用的。3.5.ALX-0651 Ablynx的ALX-0651，一种针对CXCR4的双特异性串联单域抗体，是第一个针对GPCRs的临床使用的生物制剂，并且据我们所知，是第一个进入临床的双特异性抗体（2011年）。虽然ALX-0651的单个单域抗体构建模块显示出中性拮抗剂活性，但双特异性ALX-0651不仅显示出更高的亲和力，而且还显示出针对CXCR4的反向激动剂活性。 临床前数据表明ALX-0651在阻断CXCR4介导的病毒进入以及诱导快速干细胞动员方面是有效的。尽管临床前数据支持开发，但由于缺乏对标准护理的优越性，ALX-0651已被终止。3.6.BI 1034020 BI 1034020是由Ablynx和勃林格殷格翰开发的一种双特异性、半衰期延长的串联单域抗体。这种双特异性抗体针对大脑中淀粉样蛋白β（Aβ）的两个独立表位，旨在用于阿尔茨海默病的治疗。BI 1034020的I期研究于2013年开始，但在发生与药物相关的严重不良事件后被终止。3.7.MEDI4276 MEDI4276是由Medimmune开发的一种针对HER2的抗体药物偶联物（ADC），于2015年进入临床。MEDI4276由一种基于曲妥珠单抗scFv的四价双特异性抗体组成，该抗体靶向HER2的域IV，并在mAb 39S的重链N端融合，后者靶向域II。这种双特异性抗体向HER2过表达的肿瘤细胞输送四个位点特异性结合的tubulysin有效载荷，在那里ADC被内化并运输到溶酶体以释放细胞毒素。与曲妥珠单抗和帕妥珠单抗的组合不同，MEDI4276可以交联受体，从而实现快速内化和通过将HER2从循环重定向到溶酶体降解，有效实现细胞质输送。异种移植肿瘤模型显示，MEDI4276对HER2低表达肿瘤以及对ado-trastuzumab emtansine耐药的肿瘤都具有高效性，从而满足了高度未满足的医疗需求。在I期剂量递增研究中，MEDI4276在HER2阳性乳腺癌和胃癌中显示出临床活性，但最终由于不利的毒性概况而被终止。3.8.西他卡苯自溶 Ciltacabtagene autoleucel（cilta-cel），据我们所知，是迄今为止第一个也是唯一一个获批的基于双特异性抗体的治疗。cilta-cel最初由Legend Biotech开发为LCAR-B38M，是一种第二代自体CAR-T疗法，特点是具有两个单域抗体的双特异性外结构域，这些单域抗体针对B细胞成熟抗原（BCMA）的不同表位。双特异性靶向实现了比单特异性构建更高的亲和力结合和卓越的功效。基于CARTITUDE-1 Ib/II期研究（NCT03548207）的深度和持久反应以及可管理的安全性概况，cilta-cel在2022年获得批准。总体反应率高达97.9%，甚至高于初始I期研究（NCT03090659）观察到的87.8%。有趣的是，cilta-cel的批准仅在idecabtagene vicleucel（ide-cel）批准后的一年，ide-cel是一种具有单特异性BCMA靶向的类似CAR-T疗法。虽然应该谨慎比较各自的临床试验，但双特异性cilta-cel似乎在反应率和反应持续时间方面都优于单特异性的ide-cel。3.9.Zanidatamab和zanidatamab zovodotin Zanidatamab（ZW25）是一种由Zymeworks专有的Azymetric Fc平台衍生的双特异性抗体，它结合了一个针对HER2域IV的scFv和识别域II的Fab臂。Zanidatamab跨细胞膜结合两个HER2分子，引起细胞膜上受体的明显重组。除了快速内化和下调外，Fc结构域的聚集引起了强烈的补体依赖性细胞毒性（CDC），这在曲妥珠单抗、帕妥珠单抗或它们的组合中是观察不到的。双特异性HER2结合在体内异种移植模型中显示出比曲妥珠单抗和帕妥珠单抗组合更优越的抗肿瘤活性。Zanidatamab在具有不同HER2表达水平的多种肿瘤患者中显示出安全性。目前正在进行多项临床试验，包括针对乳腺癌的II期试验(NCT04224272)和针对晚期胃食管腺癌的III期试验(NCT05152147)。Zanidatamab也在探索用于输送细胞毒性微管抑制剂。这种双特异性ADC，zanidatamab zovodotin(ZW49)，已被证明是免疫原性细胞死亡标志物的强诱导剂，并且对一系列HER2表达水平的乳腺癌和胃癌患者衍生的异种移植模型非常活跃。目前正在进行I期临床试验(NCT03821233)。3.10.MP0274 由Molecular Partners开发的MP0274通过DARPins实现双特异性HER2靶向，DARPins是可像串珠一样串联的替代框架。四价MP0274分子包含一个分别针对HER2域I和IV的DARPin，以及两个用于延长半衰期的人类血清白蛋白结合域。像基于IgG的抗HER2双特异性抗体一样，MP0274交联HER2受体，在各种HER2阳性细胞系和小鼠模型中显示出与曲妥珠单抗和帕妥珠单抗组合相当的抗肿瘤活性。然而，MP0274可能通过稳定AKT调节的叉头转录因子FOX03a导致诱导凋亡，展现出独特的作用机制。在HER2阳性实体瘤患者的I期研究中，MP0274显示出良好的暴露和有利的安全性概况。一位先前接受过曲妥珠单抗和帕妥珠单抗治疗的转移性乳腺癌患者对MP0274显示出持续反应，确立了临床概念验证。回顾性生物标志物分析揭示，这位患者是唯一一个携带HER2阳性、PI3K野生型遗传标志的患者，且在最高剂量水平，这表明在良好的MP0274暴露下，患者选择可能导致更高的反应率。然而，由于战略原因，MP0274的进一步临床开发已被停止。3.11.Anbenitamab和JSKN003 Alphamab Oncology基于曲妥珠单抗和帕妥珠单抗设计了一种双特异性HER2靶向抗体anbenitamab(KN026)。通过组合旋钮-入-孔和静电导向突变实现了相应HCs的异二聚体Fc配对。基于HER2相互作用残基的结构阐明，设计了一种可以与曲妥珠单抗和帕妥珠单抗HC分别有效配对的通用LC。由安进公司开发的双特异性抗体anbenitamab显示出比曲妥珠单抗和帕妥珠单抗组合更强的抗肿瘤活性，这一效果在不同HER2水平的多种肿瘤细胞系中均有体现，并且在小鼠模型中活性相当。初步特性分析表明，anbenitamab保留了其亲本单克隆抗体的抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC）和抗体依赖性细胞吞噬作用（ADCP），同时能够同时结合HER2的两个不同表位。anbenitamab于2018年进入临床试验，并在至少接受过一线治疗（包括曲妥珠单抗）的晚期转移性乳腺癌患者中显示出良好的安全性。 在第二项临床试验中，anbenitamab在HER2表达的晚期胃癌和胃食管结合部癌患者中表现出良好的耐受性。基于初步的积极活性，anbenitamab目前正在进行多项临床试验的评估，包括两项注册研究：作为HER2阳性晚期或转移性胃癌的二线治疗（NCT05427383），以及作为HER2阳性复发或转移性乳腺癌的一线治疗（NCT05838066），两者均与化疗联合使用。将anbenitamab与拓扑异构酶I抑制剂结合，得到了双特异性抗HER2抗体药物偶联物JSKN003，目前正在进行首次人体I期研究，针对晚期实体瘤（NCT05494918）。 3.12.额外的HER2靶向bpAbs 此外，MBS301、BCD-147、TQB2930和KM257是基于曲妥珠单抗和帕妥珠单抗的四种额外的临床阶段抗HER2双特异性抗体。MBS301结合了曲妥珠单抗和帕妥珠单抗的去岩藻糖化半抗体，它们在工程CHO细胞系中分别生产，并通过体外使用结-洞突变异二聚体化。从Fc结构域中去除岩藻糖可以增强ADCC活性，结合双特异性靶向，可在不同HER2水平的肿瘤细胞系中以及在小鼠模型中产生强大的活性。目前正在进行一项I期临床研究（NCT03842085），评估MBS301用于治疗HER2阳性复发或转移性恶性实体瘤的效果。Biocad的BCD-147采用了一种不对称scFv-Fab格式，并已在健康志愿者中进行了I期研究（NCT03912441）。结构相似的TQB2930由泰国天晴药业开发，正在研究用于HER2阳性实体瘤的裸抗体（NCT05380882）以及作为抗体药物偶联物（TQB2102）在HER2阳性乳腺癌（NCT06115902）和胃癌中的应用。最后，轩竹生物制药正在开发不对称的通用LC双特异性抗体KM257，目前正在临床研究中，用于HER2阳性实体瘤（NCT05320874）以及作为抗体药物偶联物（KM501）在HER2阳性晚期实体瘤（NCT05804864）中的应用。 3.13.SAR441236 针对HIV的有效广谱中和抗体（bnAbs）的识别和开发由于病毒的高遗传多样性而面临挑战。大型和小分子单一疗法在很大程度上失败了，因为选择性压力增加了突变逃逸变体的机会。使用bnAbs组合的临床前和临床研究表明，靶向多个表位可以提高疗效。 SAR441236，由赛诺菲公司进行的I期临床开发（NCT03705169），由具有双重特异性的交叉双变量Ig样（CODV-Ig）臂与具有第三独特特异性的Fab臂配对，使其成为一种三特异性广谱中和抗体。临床前体内数据表明，三特异性广谱中和抗体在减少病毒载量和预防非人灵长类动物（NHP）类似的人类免疫缺陷病毒（SHIV）病毒挑战模型中的感染方面更为有效。3.14.GEN3009 Genmab结合其专有的DuoBody和HexaBody技术，设计了GEN3009，这是一种针对CD37的双特异性抗体，具有增强的Fc介导的六聚体化。这种双特异性抗体包含互补的Fc突变，这些突变引导体外控制的Fab臂交换反应中的异二聚体化，并通过E430G突变增强六聚体化。由于双表位靶向加上增强的六聚体化导致的Fc结构域密度的局部增加，与单一亲本单克隆抗体或组合相比，在B细胞淋巴瘤细胞系以及患者来源的慢性淋巴细胞白血病样本中均显示出优越的补体依赖性细胞毒性（CDC）。Fc结构域聚集进一步增加了ADCC和ADCP，导致在几种细胞系衍生的异种移植模型以及患者来源的非霍奇金淋巴瘤异种移植中产生强大的抗肿瘤活性。GEN3009已在复发或难治性B细胞非霍奇金淋巴瘤患者中进行了首次人体试验（NCT04358458），但由于战略原因，最近停止了进一步的临床开发。3.15.REGN5093和REGN5093-M114 Regeneron的双特异性抗MET常见轻链抗体，REGN5093，作为抗体（NCT04077099）和作为抗体药物偶联物（NCT04982224）已进入临床。源自Regeneron专有的VelocImmune平台，REGN5093有效地抑制了配体独立的MET和HGF诱导的信号传导。DaSilva等人表明，REGN5093创造了具有2:2化学计量比的抗体-受体复合物，与单特异性抗体形成1:2复合物形成对比。这些更大的复合物可能导致REGN5093所见的MET降解，这是由于回收效率降低和bpAb：受体复合物的溶酶体流量增加所致。Regeneron进一步利用REGN5093的这一特性，通过在其上结合专有的细胞毒素美登素载荷来开发REGN5093-M114。该分子在MET依赖性和MET非依赖性肿瘤模型中均显示出疗效，进一步证明了双特异性抗体药物偶联物方法的效用。3.16.OriCAR-017 Oricell的双特异性GPRC5D靶向CAR-T细胞疗法，OriCAR-017，已进入临床，用于治疗复发和难治性多发性骨髓瘤（NCT05016778）。类似于cilta-cel，OriCAR-017 CAR包含串联的单域抗体，靶向GPRC5D上的两个不同表位。作者推测，双特异性靶向增加了他们的CAR-T细胞疗法的特异性和亲和力，从而提高了疗效。报告了有利的I期安全性和有效性数据，并支持OriCAR-017的进一步开发。3.17.SARS-CoV-2 中和双特异性抗体（bpAbs） MABS由SARS-CoV-2引起的全球大流行促使全球范围内的大量研究工作，多个研究小组展示了使用单域抗体（sdAbs）等抗体片段作为构建双特异性抗体（bpAbs）的基石的效用。 一些研究表明，双特异性抗体通过要求多个同时突变，大大减少了突变逃逸的发生率。与通常限于通过阻断RBD-ACE2界面来阻断的传统单价结合物不同，双特异性抗体的顺式结合显示了阻断和构象变化，而双特异性结合则在多聚体中进行了阻断和多聚体化。已进入临床的最先进的针对SARS-CoV-2的双特异性抗体BAT2022已完成了I期安全性和耐受性研究（NCT05518695）。BAT2022是一个对称的2+2 Fc含量分子，由一个sdAb分子连接到HC的C末端。BAT2022保持了其作为广谱中和抗体对抗多种SARS-CoV-2亚变体的有效性，展示了作为治疗性抗体的效用。多余的。3.18.ISB 1442 Ichnos Sciences的ISB 1442是一种基于专有的BEAT 2.0（基于TCR的双特异性抗体结合）平台的双特异性抗体，它与一个串联Fab臂上的两个不同的CD38表位具有高亲和力结合，并结合一个低亲和力的CD47 Fab臂以阻断吞噬细胞上的信号调节蛋白α（SIRPα）。低CD47亲和力旨在防止对红细胞的靶向毒性，同时在高亲和力双特异性CD38臂的引导下结合时实现强大的抗肿瘤活性。结合Fc突变以增强效应功能，ISB 1442不仅影响ADCP，还表现出ADCC和CDC。临床前数据表明，这种复杂的MoA可能比单一靶点药物具有更高的疗效和安全性。因此，ISB 1442目前正在进行一项针对复发/难治性多发性骨髓瘤患者的I/II期临床研究（NCT05427812）。3.19.TNB-738 Ancora Biotech的TNB-738是一种由Teneobio的专有转基因UniRat平台衍生的两个sdAbs组成的不对称抗CD38双特异性抗体，它们与不同的CD38表位具有高亲和力结合。TNB-738使用结-洞突变实现重链配对，一个完全沉默的IgG4 Fc以消除效应功能，以及在一个臂上使用惰性的kappa LC和CH1以提高可制造性。目前正在健康志愿者中进行I期剂量递增（NCT05215912），TNB-738通过酶抑制发挥作用。3.20.IMGN151 Immunogen的下一代FRα ADC已进入临床（NCT05527184），紧随其第一代FRα ADC mirvetuximab-soravtansine之后，该药物于2022年获得美国食品药品监督管理局（FDA）的加速批准。IMGN151包含一个scFv臂与一个mirvetuximab Fab臂配对，每个臂都结合FRα的独特和不重叠的表位。IMGN151的双特异性靶向模式增强了FRα阳性细胞上的结合事件，从而在高、中、低FRα表达的细胞系中实现了优越的载荷传递。双特异性抗体结合增加的传递以及更有效的连接子-载荷可能允许IMGN151比mirvetuximab soravtansine治疗更广泛的患者群体。 4.结论和展望 从单特异性单克隆抗体的组合中演变而来，双特异性抗体已通过2022年FDA批准的首个基于双特异性抗体的疗法证明了其临床安全性和有效性。临床管线中的双特异性抗体基于多种格式，除了存在Fc结构域以增强稳定性和效应功能外，没有明确的趋势。最终，生物学决定了双特异性抗体的设计。与传统的单克隆抗体、双特异性抗体甚至针对不同表位的单克隆抗体组合相比，双特异性抗体提供了独特的作用机制，使它们成为多种适应症有吸引力的治疗选择。双特异性抗体结合的亲和力可以实现高度选择性的肿瘤靶向，如双特异性抗体ISB 1442的特性，这些特性还可以使T细胞引导者或CAR-T细胞等治疗方式受益，正如双特异性CAR-T疗法cilta-cel的临床成功所突出的那样。目前正在临床测试的大多数双特异性抗体已被证明可以影响TAA聚集以改善受体激动、效应功能和/或有效的内化和溶酶体运输。除了治疗性单克隆抗体外，这种作用机制特别适合改善向肿瘤的细胞毒性载荷传递，正如目前正在评估的六种ADC所说明的那样。或者，双特异性结合可能通过增强结合事件来改善载荷传递，正如对IMGN151的推测。除了高亲和力结合和受体聚集，双特异性抗体已被用于其他作用机制，如双通路抑制、多组分靶标的激活，或者如抗CD38双特异性抗体TNB-738的例子，锁定一个在酶学上不活跃的状态。在传染病领域，双特异性抗体有希望解锁具有增强持久反应、对多样化病毒景观更广泛有效，并且可能大大限制突变逃逸变体出现的广谱中和抗体。该领域正从双特异性抗体转向三特异性抗体甚至更高级的抗体，以应对一些最具挑战性的人类疾病，如HIV和SARS-CoV-2。随着进入临床的双特异性抗体数量的增加，双特异性抗体在靶向治疗中具有巨大的潜力。目前的双特异性抗体临床格局显示出对HER2靶向药物及其依赖于受体聚集的相关作用机制的强大集中。HER2的突出可能可以用曲妥珠单抗和帕妥珠单抗的组合疗法的临床先例来解释。然而，随着新技术使更复杂的结构更容易获得，我们预计双特异性抗体的靶标和适应症的数量将大幅增加。以前用传统单克隆抗体在临床上失败的靶标可能因双特异性抗体的独特作用机制而变得可获得，并且可能出现特别适用于双特异性抗体的新靶标。正如SAR441236和临床前研究所强调的，三特异性或更高价的结构可以扩展双特异性抗体的效果，甚至解锁新的作用机制。通过首个双特异性抗体治疗的批准得到验证，双特异性抗体的临床管线正在迅速扩展，并将激发对这个独特的抗体类别进行更多研究，以充分利用双特异性抗体在靶向治疗中的潜力。 识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入 生物制品微信群！ 请注明：姓名+研究方向！ 版 权 声 明 本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。