Necitumumab

摘要：本文聚焦噬菌体展示技术在抗癌抗体发现中的应用。先介绍该技术的发展及在癌症治疗中的重要性，接着阐述噬菌体展示技术的原理，包括不同噬菌体类型、展示价态、抗体库构建与筛选等；随后说明基于此技术的抗体工程改造方法；最后列举通过该技术获得的抗癌治疗性抗体，并展望其未来在癌症治疗领域的发展潜力，表明该技术有望为癌症治疗带来重大突破。一、癌症治疗与噬菌体展示技术概述癌症长期以来都是难以攻克的疾病，多年来，多种治疗方式不断涌现，如手术切除、放疗、化疗以及免疫治疗等（图 1）。随着医学发展，基于抗体和抗体 - 药物偶联物（ADCs）的靶向免疫治疗，凭借疗效高、毒性相对较低的优势，成为抗癌的重要手段。目前，鉴定具有治疗活性抗体的主要技术有杂交瘤平台、单个 B 细胞分离以及噬菌体/酵母展示。其中，噬菌体展示技术由 George P. Smith 教授于 1985 年提出，2018 年，该技术的相关研究获得诺贝尔化学奖，它极大地推动了蛋白质/抗体工程和药物发现领域的发展。尽管技术不断进步，但寻找新的抗癌靶向抗体和治疗靶点仍是研究重点。二、噬菌体展示技术详解2.1 噬菌体类型M13 噬菌体：属于 F 特异性丝状噬菌体，在细菌宿主（如大肠杆菌）中繁殖时不杀死宿主，其基因组为正链环状单链 DNA。M13 噬菌体的衣壳由 5 种蛋白质组成，基于 M13 的平台是噬菌体展示中最常用的（图 4）。其他噬菌体：T4 噬菌体基因组为线性双链 DNA，能展示大蛋白且宿主范围广；T7 噬菌体对极端条件抗性强；λ - 噬菌体的某些蛋白可用于融合展示；RNA 大肠杆菌噬菌体 Qβ 能高效展示小蛋白和肽，其高突变率利于文库多样化和亲和力成熟。2.2 展示价态展示价态是选择噬菌体展示平台的重要考虑因素。以 M13 为例，将文库与 pVIII 融合可实现多价展示，适合展示肽和小蛋白，利于筛选低亲和力结合物；与 pIII 融合则为单价展示，更适合较大的蛋白质，如抗体片段，有助于筛选高亲和力结合物 。2.3 抗体库抗体库的大小和组成至关重要。早期常从外周血、扁桃体或脾脏等分离的 B 细胞获取抗体编码序列构建文库，免疫后的宿主来源文库更易筛选到理想抗体。如今，大规模平行寡核苷酸合成技术可增加文库多样性，控制抗体特征，提高筛选效率。2.4 抗体筛选基本流程：通过亲和筛选（又称生物淘选）从噬菌体表面展示的数十亿抗体变体中鉴定抗体片段。先构建抗体文库，转化为噬菌体形式后，在固相支持物上与目标进行多轮筛选，包括阳性和阴性选择，最后对筛选出的噬菌体进行扩增和分析（图 5）。筛选策略：可使用患者样本、癌细胞系、重组蛋白等作为目标材料，也可进行体内筛选。此外，还有多种先进策略可用于筛选具有特定性质的抗体，如能内吞、pH 依赖结合、识别特定表位等。三、基于噬菌体展示的抗体工程3.1 常见抗体格式治疗性抗癌抗体的常见形式是免疫球蛋白 G（IgG），但因其结构复杂无法在噬菌体表面展示。在噬菌体展示中，常使用更紧凑的抗体片段，如单链可变片段（scFv）、Fab 片段、单域抗体（sdAb）等 （图 6）。这些片段虽稳定性较好，但临床应用受限，常需进一步工程改造。3.2 抗体人源化为降低抗体免疫原性，临床主要研究人源化或全人源抗体。抗体人源化通过框架替换或互补决定区（CDR）移植，将非人源抗体改造得更接近人源抗体，并通过噬菌体文库筛选保留其特异性和亲和力。3.3 亲和力成熟通过体外/体内诱变或基因合成，对抗体进行多轮改造和筛选，提高抗体与目标的结合强度。3.4 抗体成药性从噬菌体展示中分离的高亲和力抗体不一定具有治疗可行性，需考虑其折叠、稳定性、翻译后修饰等特性。可通过重新格式化抗体或去除不良序列，筛选具有良好成药性的抗体。四、噬菌体展示技术获得的抗癌治疗性抗体利用噬菌体展示技术已成功开发出多种抗癌治疗性抗体，部分已获 FDA 批准，部分处于临床试验阶段（表 2）。这些抗体靶向多种癌症相关抗原，在癌症治疗中展现出巨大潜力。例如，阿替利珠单抗（Atezolizumab）和阿维鲁单抗（Avelumab）作为检查点抑制剂已获批；尼妥珠单抗（Necitumumab）用于治疗头颈癌和非小细胞肺癌；雷莫西尤单抗（Ramucirumab）可用于治疗胃癌和非小细胞肺癌等 。五、结论与展望噬菌体展示技术在抗癌抗体的发现和开发中具有重要价值，其能够筛选高特异性和高亲和力的抗体，部分抗体已在临床研究中取得良好效果。随着新的展示平台出现和抗体工程技术进步，噬菌体展示技术在抗癌治疗领域的应用有望进一步拓展，为癌症患者带来新的希望。识别微信二维码，添加生物制品圈小编，符合条件者即可加入生物制品微信群！请注明：姓名+研究方向！版权声明本公众号所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系(cbplib@163.com)，我们将立即进行删除处理。所有文章仅代表作者观点，不代表本站立场。

关注并星标CPHI制药在线 2025年3月3日，中国国家药品监督管理局（NMPA）官网发布消息，乐普生物的EGFR抗体偶联药物（ADC）维贝柯妥塔单抗（MRG003）收到药品通知件。根据惯例，药品通知件的出现通常意味着上市申请未获批准或企业主动撤回。随后，乐普生物在公告中明确表示，此次事件并非被拒，而是出于对药物研发的严谨态度和对监管要求的尊重，主动撤回了前次的上市申请（NDA），以补充相关资料并完善申报文件。        图源 NMPA官网 维贝柯妥塔单抗（MRG003）是乐普生物自主研发的靶向EGFR的ADC药物。EGFR（表皮生长因子受体）是一种跨膜蛋白，在细胞生长、发育和分化过程中发挥重要作用。然而，EGFR的过度表达及其与特异性配体的结合会导致EGFR异常激活，进而调控多条信号转导通路，抑制肿瘤细胞凋亡，促进细胞增殖、迁移，并通过介导VEGF表达促进肿瘤血管新生。因此，EGFR成为癌症治疗的重要靶点。 MRG003由EGFR靶向单抗与强效的微管抑制剂MMAE分子通过vc链接子偶联而成。它能够以高亲和力特异性地结合肿瘤细胞表面的EGFR，通过内吞进入肿瘤细胞后释放强效的有效载荷，从而导致肿瘤细胞死亡。这一独特的药物机制使得MRG003在肿瘤治疗中展现出巨大的潜力。乐普生物对MRG003的研发投入了大量的人力、物力和财力，从药物的靶点选择、分子设计、临床前研究到临床试验，每一个环节都经过了严格的科学验证和监管审批。 特别是在临床试验阶段，乐普生物在国内外进行了多项临床试验，以评估MRG003的安全性、有效性和耐受性。在IIa期临床试验中，MRG003主要针对复发/转移性鼻咽癌（NPC）患者，入组了61例既往经至少二线系统化疗和PD-1/PD-L1抑制剂治疗失败的患者。截至2023年3月15日，对57位患者进行了疗效评估，结果显示，整体客观缓解率（ORR）为47.4%，疾病控制率（DCR）为79.0%。其中，2.0mg/kg剂量组的ORR为39.3%，DCR为71.4%；而2.3mg/kg剂量组的ORR和DCR分别高达55.2%和86.2%。这些数据表明，MRG003在复发/转移性鼻咽癌患者中具有显著的疗效。 除了单药治疗外，乐普生物还探索了MRG003与PD-1抑制剂普特利单抗联用治疗实体瘤的方案。在一项入组33例患者的临床试验中，普特利单抗联合MRG003的ORR达到了63.0%，DCR为88.9%。特别是在二线临床部分，针对经PD-1+化疗一线治疗后进展的EGFR阳性鼻咽癌患者，ORR高达77.8%，DCR为100%。这些数据进一步证明了MRG003与免疫治疗药物联合使用的潜力。 不过，乐普生物主动撤回MRG003的上市申请，背后原因可能涉及多个方面。 首先，NMPA在审批新药时，会对临床试验数据的完整性和充分性进行严格审查。如果数据存在缺失、不一致，或无法充分证明药物的有效性和安全性，申请就可能被拒绝。MRG003虽然在IIa期临床试验中表现不错，但可能还需要更多数据来支持其上市申请。例如，临床试验的样本量相对较小，可能无法全面反映药物在更广泛患者群体中的疗效和安全性。此外，对于不同剂量组的疗效差异，也需要进一步的研究来确定最佳剂量和治疗方案。 其次，药物的安全性和耐受性也是关键。在临床试验中，MRG003的治疗相关不良事件（TRAEs）主要包括皮疹、瘙痒、贫血和脱发等，大多数为1级或2级，且未出现与治疗直接相关的死亡事件。但严重不良事件（SAE）的发生率达到了11.5%，且有3名患者因不良事件退出治疗。尽管总体不良反应在可接受范围内，但为了取得业内外认可，取得患者信任，取得上市的十足把握，其安全性仍需进一步评估。 再者，同类药物的竞争压力可能使得乐普对于MRG003有着更加严格的要求，已期后续能够在市场中赢得一席之地。EGFR靶点作为肿瘤治疗的重要靶点，吸引了众多制药企业的关注，国内外已有多款针对EGFR靶点的药物上市或处于临床试验阶段。例如，西妥昔单抗（Cetuximab）和奈妥木单抗（Necitumumab）是已获批的EGFR单克隆抗体，广泛用于肺癌等癌症的治疗。此外，贝达药业的MCLA-129和百济神州的BG-T187分别是靶向EGFR和c-MET的双特异性抗体和三特异性抗体，目前处于临床试验阶段。这些药物不仅在疗效和安全性上各有优势，还通过联合疗法或双靶点设计克服了单靶点药物的耐药性问题。这意味着MRG003需要展现出足够的竞争力，才能在激烈的市场竞争中脱颖而出。 最后，政策监管环境的变化也可能使乐普对MRG003的上市申请做出了调整。近年来，中国药品监管政策发生了显著变化，药品审评审批制度的改革和国际化进程的加速，使得NMPA对新药上市申请的审批标准不断提高。例如，中国优化了临床试验要求，允许境外已上市但境内未上市的罕见病药品结合境内外数据减免境内临床试验。同时，药品注册检验用量大幅减少，注册核查启动方式也更加灵活。此外，中国还鼓励高水平医疗机构自行研制罕见病诊断试剂，并探索特定医疗机构先行进口临床急需的未注册药品。这些改革措施虽然加快了新药的上市速度，但也提高了对药物临床数据完整性和质量的要求。        图源：乐普生物公告 乐普生物公告称，此次撤回不会对MRG003的注册进程造成重大不利影响。公司已就申报材料进行补充并制备完成eCTD申报文件，已于3月4日重新提交MRG003的NDA，并将尽最大努力与监管机构合作完成后续审评程序，以获得NDA的上市批准。乐普生物的这一应对策略体现了其对药物研发的严谨态度和对监管要求的尊重。通过主动撤回并补充资料，公司能够更好地完善申报材料，提高其上市申请的成功率。同时，这也表明乐普生物在面对挑战时，能够迅速调整策略，以确保药物研发的科学性和合规性。 参考来源：        [1]NMPA官网        [2]Is ADC a rising star in solid tumor?An umbrella review of antibody-drug conjugates in solid tumors.BMC Cancer.2025.   [3]EGFR-targeting RNase A-cetuximab antibody-drug conjugate.Scientific Reports.2025. 智药研习社近期会议预告 扫码领取CPHI & PMEC China 2025展会门票 来源：CPHI制药在线 声明：本文仅代表作者观点，并不代表制药在线立场。本网站内容仅出于传递更多信息之目的。如需转载，请务必注明文章来源和作者。 投稿邮箱：Kelly.Xiao@imsinoexpo.com ▼更多制药资讯，请关注CPHI制药在线▼ 点击阅读原文，进入智药研习社~