Beclometasone Dipropionate

西安-延安-咸阳花粉浓度监测报告 2026年6月20日，总第939 期 西安交大二附院-北大街：28 粒/1000 mm² 灞桥气象局：6 粒/1000 mm² 鄠邑气象局：6 粒/1000 mm²    延安：5 粒/1000 mm²  咸阳：22 粒/1000 mm² 《中国变应性鼻炎诊断和治疗指南》指出，在自然暴露于花粉的环境中，患者使用鼻腔过滤器可减少致敏花粉吸入鼻腔，缓解鼻部症状。 花粉季过敏者的防护建议 外出建议：外出时做好防护，如戴口罩、鼻腔过滤器、帽子，必要时戴护目镜，穿长袖长裤衣物，尽量减少皮肤暴露，外出前使用花粉阻隔剂涂抹鼻腔。 回家必做：回家后及时更换干净衣物，冲洗鼻腔，清洗面部及其他皮肤暴露部位。 活动时间：外出活动尽量避开花粉浓度较高的时间段，如每天上午10点至下午5点。尽量减少接触易过敏的植物，春季主要致敏花粉为树木类花粉，如柏树，杨树，柳树，榆树。 数据来源：中国天气网     数据整理：花粉过敏志愿者（数据仅供参考） 注：次日数据为预测数据 如何治疗过敏性鼻炎 常见的药物主要包括以下几类： 1. 鼻用糖皮质激素 鼻用糖皮质激素是预防性治疗过敏性鼻炎的常用药物，具有强效的局部抗炎作用。常见的药物包括： 糠酸莫米松鼻喷雾剂：适用于季节性和常年性过敏性鼻炎，建议在花粉季节开始前2-4周使用。 丙酸倍氯米松鼻气雾剂：用于预防和治疗常年性及季节性过敏性鼻炎，也可用于血管收缩性鼻炎。是国内唯一的气雾剂型鼻用激素。可达鼻腔深部，有效抗炎，改善鼻部症状。预防用药：可在过敏季2-4周使用。 布地奈德鼻喷雾剂：可用于季节性和常年性过敏性鼻炎的预防。 丙酸氟替卡松鼻喷雾剂：适用于预防和治疗季节性及常年性过敏性鼻炎。 氮䓬斯汀氟替卡松鼻喷雾剂：适用于使用单一鼻用抗组胺药或糖皮质激素治疗效果不佳的中至重度季节性过敏性鼻炎和常年性过敏性鼻炎的成人及青少年（12岁及以上）。科学研究显示6岁及6岁以上也可使用。特点：5分钟起效、迅速改善症状；玫瑰芳香。 2. 白三烯受体拮抗剂 白三烯受体拮抗剂可用于过敏性鼻炎和哮喘的预防性治疗： 孟鲁司特钠：适用于过敏性鼻炎和哮喘的预防，可减轻鼻塞等症状。 润沛口溶膜（孟鲁司特钠口溶膜）：适用于过敏性鼻炎和哮喘的预防，可减轻鼻塞等症状。对哮喘合并过敏性鼻炎患儿的鼻塞缓解效果更优，尤其适合以鼻塞为主要症状或对鼻用激素不耐受的患儿。 扎鲁司特：主要用于哮喘的预防性治疗，对过敏性鼻炎也有一定效果。 使用方法：通常每晚睡前服用，成人剂量为10mg，儿童剂量需根据年龄调整。 3. 肥大细胞膜稳定剂 这类药物通过稳定肥大细胞膜，防止过敏介质的释放，适用于预防性治疗： 色甘酸钠：可用于预防过敏性鼻炎和哮喘，需在接触过敏原前7-10天使用。 曲尼司特：可用于预防过敏性鼻炎和哮喘，预防性用药效果优于发作时用药。 使用方法：色甘酸钠通常通过吸入器使用，每天3-4次；曲尼司特口服，每天3次。 4. 抗组胺药 抗组胺药物也可用于预防性治疗，但主要用于缓解症状： 西替利嗪：适用于季节性和常年性过敏性鼻炎。 氯雷他定：可用于缓解过敏性鼻炎的症状。 使用方法：通常每天服用一次，具体剂量需根据药物说明书和医生建议调整。 5. 鼻腔冲洗 鼻腔盐水冲洗是一种辅助治疗方法，可用于减少鼻腔内的过敏原负荷，缓解鼻塞和流涕。 使用方法：每天1-2次，使用生理盐水或高渗盐水冲洗鼻腔。 6. 生物制剂治疗 （1）司普奇拜单抗（康悦达）：是全球首个获批用于治疗季节性过敏性鼻炎的IL-4Ra生物制剂，能够通过阻断IL-4和IL-13信号通路，抑制Th2型炎症，快速缓解鼻塞、流涕等症状。临床研究显示，首次用药2天后鼻塞症状显著缓解，4天后整体症状改善作为一种新型生物制剂，可精准作用于过敏反应中的关键介质，通过调节免疫系统，减轻过敏症状。成人的初始剂量为600mg（300mg注射两次），后续以每两周一次的频率给予300mg，皮下注射。 （2）奥马珠单抗：是人源化抗IgE单克隆抗体，能够通过特异性结合游离IgE，阻断IgE与其受体的结合，抑制过敏反应的级联反应。作为一种靶向生物制剂，奥马珠单抗可精准作用于过敏反应中的关键介质IgE，调节免疫系统，减轻过敏性哮喘、鼻炎的症状。成人的剂量根据患者血清IgE水平和体重计算，通常每2-4周皮下注射一次。

编辑：丹青 疲劳在中医称之为“虚劳”“倦怠”，是一种疲惫乏力和虚弱的不适感觉，临床表现为虚弱、无力、焦虑等症状。中医认为，疲劳为元气耗伤之虚证所致，涉及五脏六腑[1]，主要以脾、肝、肾为主[2]，“补虚固元，滋养机体，虚得补，正则旺，疲劳自除”[3]。经典名方保元汤源于明代医家孙志宏所著《简明医彀》，由人参、黄芪、甘草、肉桂、生姜5味中药组成，是治疗元气虚弱的经典方剂[4-5]。现代研究表明，其具有抗疲劳、抗氧化和提高免疫功能的作用[6-7]，用于治疗气虚、疲劳血瘀证和慢性心力衰竭等[8]。目前的研究为了阐释中药药效物质基础，多进行中药化学成分的测定、药理活性测试等，而忽略了煎煮过程中成分间物理结构的改变。中药汤剂煎煮时，受热力、煎煮方式等因素影响，大量化学成分煎出后可能发生水解、降解、氧化等化学反应[9]，也可能受氢键、π-π堆积、范德华力等非共价键相互作用产生超分子，形成复杂多相态体系[9-12]。有学者[13]在84种中药煎液中均观察到了不同相态，并根据粒径大小分为沉淀相、悬浮相、纳米相和真溶液相[14]。补阳还五汤煎煮过程研究说明热力学过程是驱动其成分自组装形成不同相态的关键因素[15]，气血双补方炮制增效的机制可能与其有效成分发生自组装形成纳米相态有关[16]，防己黄芪汤沉淀相为干预脾虚肾性水肿小鼠的活性相态[17]，黄芪汤纳米相抗菌作用最强[18]，金银花-蒲公英提取液纳米相态是其治疗痤疮的关键[19]。一方面，成分间可能因分子间氢键、静电作用、疏水作用等非共价键相互作用[20]，形成微/纳米颗粒；另一方面，在煎煮受热过程中可能发生聚合、酸碱中和等反应生成不溶性分子复合物或沉淀。保元汤成分组成复杂，课题组研究发现，煎煮放置一定时间后出现自沉淀现象。而关于保元汤是否存在不同相态、相态变化与物质基础的关系以及汤液合煎过程中产生的聚集体缓解运动性疲劳的作用机制目前均尚未阐明。 本研究基于“汤液相态”理论、从结构中药学角度出发，在明确保元汤整体药效基础上，进一步通过拆分保元汤相态并结合肠道微生物组、代谢组学和转录组学的角度探讨保元汤及活性相态发挥抗疲劳作用的机制，筛选出保元汤缓解运动型疲劳的有效相态，为经方开发提供理论科学依据，也为中药复方的应用合理性奠定了理论基础。 1  材料 1.1动物 SPF级雄性SD大鼠，体质量180～220 g，购自辽宁长生生物技术股份有限公司，许可证号SCXK（辽）2020-0001。大鼠饲养在SPF级动物饲养室，环境温度（24±2）℃，相对湿度（55±5）%，12 h/12 h明暗循环照明。实验过程中，大鼠自由进食标准饲料和饮水。正式实验前，大鼠适应性喂养及适应性游泳1周。动物实验经长春中医药大学动物伦理委员会批准（批准号2025221）。 1.2 药材 人参（产地吉林省长白县，批号JF20190416-06）、黄芪（产地内蒙古赤峰市，批号SXT-HQ-12）、甘草（产地内蒙古赤峰市，批号NCN20190217-03）、肉桂（产地广西省玉林市，批号GYY20180824-06）均购自吉林省北药集团有限公司，生姜购自当地农贸市场，由长春中医药大学中药鉴定教研室翁丽丽教授分别鉴定为五加科植物人参Panax ginseng C. A. Mey.的干燥根和根茎、豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. var. mongholicus(Bge.) Hsiao的干燥根、豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.的干燥根和根茎、樟科植物肉桂Cinnamomum cassia Presl的干燥树皮、姜科植物姜Zingiber officinale Rosc.的新鲜根茎。 1.3 药品与试剂 大株红景天胶囊（国药准字Z20040223，批号240903）购自江苏康缘药业股份有限公司；对照品人参皂苷Rb1（批号110704-202028，质量分数为93.1%）、毛蕊异黄酮-7-O-葡萄糖苷（批号111920-201606，质量分数为97.6%）、甘草苷（批号111610-201607，质量分数为93.1%）、甘草酸铵（批号110731-202423，质量分数为93.2%）购自中国食品药品检定研究院；对照品肉桂酸（批号B21082，质量分数为98.00%）、桂皮醛（批号B21081，质量分数为98.00%）、6-姜酚（批号21838，质量分数为98.00%）购自上海源叶生物科技有限公司；乙腈（批号I1098029022，色谱纯）、甲醇（批号I1144135113，色谱纯）购自德国Merck公司；磷酸（批号20241008，色谱纯）购自天津市光复精细化工研究所；甲酸（批号20241008，色谱纯）购自西亚化学科技（山东）有限公司；甲醇（批号20231219，分析纯）购自广东光华科技股份有限公司；纯净水购自杭州娃哈哈集团有限公司；2-氯苯丙氨酸为色谱纯（批号B25643，色谱纯）购自上海源叶生物科技有限公司；Agarose琼脂糖凝胶试剂（批号75510-019）购自美国Invitrogen公司；DL2000 Marker购自日本Takara公司；超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）试剂盒（批号A001-1-2）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）试剂盒（批号A003-1-2）、L-乳酸（lactic acid，LD）试剂盒（批号A019-2-1）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）试剂盒（批号A020-2-2）、尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）试剂盒（批号C013-2-1）、肌酸激酶（creatine kinase，CK）试剂盒（批号A032-1-1）、肝糖原（liver glycogen，LG）试剂盒及肌糖原（muscle glycogen，MG）试剂盒（批号A043-1-1）购自南京建成生物科技有限公司；血清肌钙蛋白（cardiac troponin I，cTnI）试剂盒（批号MM-0767R2）购自武汉酶免生物科技有限公司。 1.4 仪器 Thermo Vanquish UHPLC超高效液相色谱仪、Q-Exactive HF高分辨质谱[赛默飞世尔科技（中国）有限公司]；TGL-16M型离心机（长沙湘仪离心机仪器有限公司）；LC-20AG型高效液相色谱仪、AUW120D型天平（日本岛津公司）；TG328A型十万分之一分析天平（上海精科分析仪器厂）；FA-1004型电子天平（上海舜宇恒平科学仪器有限公司）；纤维素透析袋（截留相对分子质量3 500，上海源叶生物科技有限公司）；光学显微镜（日本尼康株式会社）；SCIENTZ-1LS型真空浓缩仪、SB-800D型超声波清洗机（宁波新芝生物科技股份有限公司）；DYY-6C型电泳仪（北京六一生物科技有限公司）；BG-gdsAUTO（130）型凝胶成像系统（北京百晶生物技术有限公司）；AM9870型TAE（美国Invitrogen公司）；Tissuelyser-48型研磨仪器（上海净信实业发展有限公司）；5430R型冷冻离心机（德国Eppendorf公司）；Epsilon 2-4 LSCplus型冷冻干燥机（德国Martin Christ公司）。 2  方法 2.1保元汤的制备 称取人参3.73 g、黄芪7.46 g、甘草1.87 g、肉桂0.75 g（最粗粉）、生姜3 g，置于砂锅中，加入400 mL水，煎至160 mL，滤过，得滤液；滤渣加入300 mL水，煎至140 mL，滤过；合并2次滤液，即得。 2.2  单味药材饮片供试品溶液的制备 分别称取“2.1”项下各药材，按照保元汤煎煮方法进行制备，得到5种单味药材饮片供试品溶液。 2.3  混合对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷Rb1、毛蕊异黄酮-7-O-葡萄糖苷、甘草苷、甘草酸铵（甘草酸质量＝甘草酸铵质量/1.020 7）、肉桂酸、桂皮醛及6-姜辣素对照品适量，加甲醇制成人参皂苷Rb1、毛蕊异黄酮-7-O-葡萄糖苷、甘草苷、甘草酸铵、肉桂酸、桂皮醛及6-姜辣素质量浓度分别为21.7、9.0、120.8、263.8、0.9、19.5、5.1 µg/mL的混合对照品溶液，经0.22 µm膜滤过，保存。 2.4  保元汤相态拆分与表征 采用离心-透析等方法，选择相对分子质量为3 500的透析袋（孔径为1～2 nm），能拆分出符合粒径范围的真溶液相态，同时能够完全截留纳米相态。将保元汤全溶液拆分为纳米相态（BD nano phase，BD-N）、沉淀相态（BD precipitation phase，BD-P）及真溶液相态（BD solution phase，BD-S），经前期预实验结果及文献方法[21]，以微粒粒径、丁达尔现象及透射电镜（transmission electron microscope，TEM）表征等为评价指标，并对离心转速及样品透析离心次数等进行考察，确立保元汤的相态拆分方法。 将保元汤经4 500 r/min离心30 min，得到BD-P，将上清液加入透析袋1/2处，随即将透析袋装入加有200 mL水的烧杯中，于水浴恒温振荡器120 r/min振荡30 min。取出透析袋中保元汤样品，于10 000 r/min离心30 min，上述透析-超速离心操作重复4次，烧杯中液体为BD-S，透析袋中液体即为BD-N。 对保元汤及拆分后的样品（BD-N、BD-P、BD-S）进行物理和化学表征。利用激光笔观察丁达尔效应；采用粒径仪测定各样品粒径、ζ电位及多分散指数（polydispersity index，PDI）；利用TEM观察微观形貌。将保元汤及各相态进行冷冻干燥，并于−20 ℃保存备用。将保元汤、各单味药材饮片供试品溶液及各相态滤过后，采用UHPLC-Q-TOF-MS/MS进行化学成分分析[22]，对保元汤与各相态LC-MS结果进行聚类分析（cluster analysis，CA）、主成分分析（principal component analysis，PCA），采用正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares method-discriminant analysis，OPLS-DA）多元统计分析，筛选出差异性指标成分类群。 按照课题组前期建立的高效液相色谱法（high performance liquid chromatography，HPLC）含量测定方法对保元汤及不同相态中人参皂苷Rb1、毛蕊异黄酮-7-O-葡萄糖苷、甘草苷、甘草酸铵、肉桂酸、桂皮醛及6-姜酚进行含量测定。采用Agilent 5 TC-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），柱温为25 ℃；检测波长为254、203、290 nm；流动相由乙腈（A）- 0.1%磷酸水溶液（B），梯度洗脱：0～13 min，90%～79% B；13～35 min，79%～78% B；35～51 min，78%～70% B；51～71 min，70%～67% B；71～91 min，67%～65% B；91～101 min，65%～62% B；101～111 min，62%～90% B；111～136 min，90% B。体积流量1.0 mL/min；进样量10 μL。 2.5  游泳疲劳模型建立及保元汤与各相态的药效评价 结合对BD-S的物理-化学表征并参考已发表研究[23]，动物实验不对BD-S的药效贡献进行考察。SD大鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组、保元汤组、BD-N组和BD-P组，每组6只。参考文献方法[24]，采用过度疲劳造模法，将大鼠尾部固定相当于其体质量8%的负重，放置在游池中进行游泳，水温（23±2）℃，以大鼠游泳范围逐渐减小，后肢行动迟缓，在水界面上下频繁游动多次，头部下沉水面7 s内不上浮为疲劳的标准，认为模型复制成功。除对照组外其余大鼠连续造模28 d；造模同时ig给药，1次/d。保元汤给药剂量参考课题组前期通过预实验确定的最佳给药剂量[25]，根据推荐的每日人体剂量，折算为1.51 g/kg。大株红景天胶囊给药剂量依据临床剂量折算为0.4 g/kg。BD-N、BD-P组给药剂量按照得率进行折算。 实验期间，定期记录大鼠体质量变化；末次给药30 min后，进行负重力竭游泳实验（8%体质量负荷，四肢、铅皮无法接触缸底）测定耐力时间（≤30 min），以大鼠连续淹没口鼻为标准。实验终点采集血清、腓肠肌及五脏组织样本，计算脏器指数，采用试剂盒进行生化指标检测，将大鼠腓肠肌及肝脏，经石蜡包埋、切片进行苏木素-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色，以评估组织学变化。 脏器指数＝脏器质量/体质量 2.6  肠道菌群分析 为了避免个体差异而导致的实验偏差，将每组6个样品两两合并为3个待测样本，进行肠道菌群测序分析[26]。 2.7  代谢组学分析 利用Acquity HSS T3色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.8 μm），流动相为0.1%甲酸水溶液（A）-含0.1%甲酸的乙腈溶液（B），梯度洗脱：0～1 min，5% B；1～7 min，5%～95% B；7～8 min，95% B；8～8.1 min，95%～5% B；8.1～12 min，5% B。进样体积2 μL；体积流量0.4 mL/min。 使用HESI源，喷雾电压3.5 kV/−3.0 kV，鞘气体积流量40 arb，辅助气体积流量15 arb，毛细管温度325℃，辅助气温度300 ℃，一级分辨率60 000，扫描范围m/z100～1 000，筛选响应前4的离子进行二级碎裂，动态排除时间为8 s，二级分辨率15 000，HCD碰撞能30%。 2.8 转录组学分析 采用Illumina Nova Seq6000平台进行双端高通量测序。原始数据经fastp软件（https://github.com/ OpenGene/fastp）[27]过滤，获得Clean Data，并用于后续数据分析。使用HISAT2（v2.1.0，http://ccb.jhu. edu/software/hisat2/index.shtml）构建参考基因组[28]，使用HTSeq（v0.9.1）统计比对到每个基因上read count值，作为基因的原始表达量。使用DESeq（v1.38.3）软件进行组间的差异表达分析。采用DESeq对基因表达进行差异分析，以|log2差异倍数（fold change，FC）|＞1、P＜0.05为筛选条件，筛选差异表达基因。使用topGO（v2.50.0）进行基因本体（gene ontology，GO）富集分析，通过超几何分布方法计算P值，找出差异基因（all/up/down）显著富集的GO term。使用clusterProfiler（v4.6.0）软件进行京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）通路富集分析。 2.9  qRT-PCR验证肝脏组织相关基因表达 按照试剂盒说明书提取肝脏组织中总RNA并合成cDNA，进行qRT-PCR分析。引物序列见表1。 2.10  统计学分析 实验数据经系统整理后进行统计分析。利用SIMCA 14.1软件进行LC-MS数据处理与分析。采用GraphPad 10.1.2统计软件分析行为变化、生化指标。使用Genescloud平台（https://www.genescloud. cn/home）对肠道微生物群、代谢组学、转录组学进行生物信息学分析。数据分析和图形绘制采用Origin 2021软件完成。实验数据均以表示，多组间显著性检验采用单因素方差分析。 3  结果 3.1 保元汤及各相态表征结果 丁达尔效应（图1）显示，保元汤呈土黄色，液体较浑浊，采用激光笔照射，丁达尔效应较弱；BD-P为棕褐色，液体浑浊，静置后有沉淀产生；BD-S澄清透明，激光笔照射无丁达尔效应出现；BD-N呈黄色较澄清，且丁达尔效应较强。粒径、PDI及电位结果（表2、图2）表明，各相态粒径的大小排列顺序为BD-P＞保元汤＞BD-N（BD-S中未测到粒径及PDI值），与外观观察结果一致。PDI大小排列顺序为保元汤＞BD-N＞BD-P，PDI值越小，表明体系内部粒子分散越均匀，BD-N组PDI表明其粒径分布不均匀，其体系内可能出现了团聚现象。各相态ζ电位值绝对值的大小排列顺序为BD-P＞BD-N＞保元汤，ζ电位绝对值越大，体系中各个粒子间斥力越大，状态越稳定。以上结果相互印证，说明BD-N易出现团聚现象，沉淀相态相对较为稳定。 显微结构表征进一步表明，BD-N为球形纳米颗粒，粒径在100 nm左右；BD-P中存在大片模糊未知物、大小颗粒混存、颗粒间黏附聚集等形态；保元汤为球形颗粒与模糊未知物共存形态（图3）。 LC-MS结果显示，正、负离子模式下共鉴定出336个化合物，主要包括黄酮类、萜类、有机酸类、糖类、生物碱类等（图4、5），这些化合物在不同相态中的分布存在差异。糖类、氨基酸类及生物碱类成分在BD-P中种类更丰富。大分子物质（如多糖、蛋白）是造成该相态富集的原因之一；同时，生物碱在BD-P中富集可能与酸碱反应有关。CA结果可知，样品大致聚为3类，第1类为A1～A3号样品，第2类为B1～B3和D1～D3号样品，第3类为C1～C3号样品，说明BD-N与保元汤在化学成分类别上大致相同，保元汤中主要化学成分分布于BD-N中。PCA结果表明保元汤、BD-P、BD-S、BD-N分布在t轴两侧及中部，可以明显区分，在空间分布上可分为3类，与CA一致，表明保元汤、BD-N成分类群相似，与其他相态化学成分差异性较大。OPLS-DA结果表明模型不存在过拟合，有效可行。以上分析结果相互印证说明BD-N与保元汤在化学成分类别上大致相同，保元汤中主要化学成分分布于BD-N中（图6-A～D）；变量重要性投影（variable importance projection，VIP）值表明有机酸类、苯丙素类、生物碱类化合物为主要成分差异类别（图6-E）。HPLC结果（表3）表明，保元汤及BD-N各成分含量相近，与UPLC-MS结果相符。 3.2 保元汤及各相态抗疲劳药效评价 与对照组比较，模型组大鼠出现明显疲劳表型，包括掉毛严重，毛发发黄、枯燥。行为学指标和脏器指数结果显示，模型组大鼠体质量、负重力竭游泳时间、肝脏指数均显著降低（P＜0.001，图7-A～C），提示疲劳导致运动能力及肝功能下降；虽然各组心脏指数均无显著性差异（图7-D），但结合LDH、CK及cTnI指标水平（图8-B、C、E），各给药组均能不同程度地改善模型大鼠的心功能异常。模型组脾脏、肺脏、肾脏指数显著升高（P＜0.001，图7-E～G），而各给药组能不同程度回调脾脏、肺脏、肾脏指数。生化指标分析显示，各给药组均能改善模型大鼠的氧化应激及能量代谢异常（P＜0.05、0.01、0.001，图8-A、D、F～I）。进一步比较发现，在降低MDA、LD、BUN及提高SOD、LG、MG水平方面，保元汤≈BD-N＞BD-P。以上结果表明，保元汤、BD-N和BD-P均能有效保护肝功能、减轻组织损伤、调节氧化应激及能量代谢，但保元汤与BD-N效果最优。 腓肠肌组织HE染色结果（图9-A）显示，模型组肌肉组织纵切面偶见肌原纤维缺失，少量肌原纤维排列疏松、着色减退，偶见肌细胞肌膜与肌原纤维分离，多量肌细胞间距增宽，表明机体在处于剧烈运动的疲劳状态时会引起肌纤维形态发生改变。与模型组相比，保元汤组及BD-N组肌原纤维排列规则，未见异常。BD-P组偶见胞核增加，偶见肌原纤维缺失，多量肌细胞间距增宽。表明保元汤及其相态对运动性疲劳有缓解作用，但BD-P组效果较弱。 肝脏组织HE染色结果（图9-B）显示，模型组大量肝细胞脂肪变性，胞质内可见大小不一的圆形空泡；较多的血管淤血，可见淋巴细胞浸润，偶见嗜碱性细胞点状聚集。给药组相比较于模型组情况有所改善，而保元汤及BD-N组改善最为明显。 3.3  肠道菌群研究结果 16S rDNA结果（图10-A、B）表明，样品的整体丰度和均一性良好，测序量充足。通过Venn图评估操作分类单元（operational taxonomic units，OTU）的相似性和一致性，结果见图10-C，对照组与保元汤组共有的OTU 91个，稍高于对照组和模型组，提示保元汤干预的肠道菌群结构更接近对照组。相似性分析（图10-D）表明，组间差异大于组内差异，表明对照组、模型组和给药组之间具有良好的分离度。所有样品在OTU水平的主坐标分析（principal coordinates analysis，PCoA）结果（图10-E）显示，模型和保元汤处理显著改变了微生物群落结构。其中，模型组与对照组和给药组分布较远，而对照组与给药组（尤其是保元汤组与BD-N组）分布较近。 如图11-A所示，在门水平上，各组大鼠肠道微生物排序前6位菌群为厚壁菌门A（Firmicutes A）、拟杆菌门（Bacteroidota）、厚壁菌门D（Firmicutes D）、变形菌门（Proteobacteria）、放线杆菌门（Actinobacteria）和脱硫杆菌门（Desulfobacterota）。与对照组相比，模型组厚壁菌门相对丰度增加，拟杆菌门相对丰度降低；而给药组趋势相反。此外，强迫运动后厚壁菌门/拟杆菌门（F/B）值较对照组呈上升趋势，在保元汤及其各相态组中F/B值呈下降趋势。如图11-B所示，在属水平上，模型组乳杆菌属Lactobacillus相对丰度显著降低，保元汤及其各相态处理后显著恢复其水平，其中保元汤及BD-N作用最佳。乳杆菌属的减少可能与炎症或能量供应不足相关，提示保元汤及其相态给药能通过调节肠道菌群改善疲劳。 分析对照组、模型组和给药组Alpha多样性（图12），与模型组比较，各给药组Chao1指数及Observed species指数上升，表明保元汤及相态可以恢复运动疲劳大鼠肠道微生物OTU水平上的物种总数；与模型组比较，保元汤及其相态均增加了大鼠肠道菌群的Shannon指数，说明保元汤及其相态给药使大鼠肠道菌群多样性增加。 Beta多样性（图11-C）表明，与对照组比较，模型组大鼠的肠道菌群出现明显偏离，说明运动性疲劳会改变大鼠肠道菌群的组成。与模型组比较，ig阳性药和保元汤及其相态后的大鼠肠道菌群组成存在一定偏离，同样说明保元汤的干预对疲劳大鼠的肠道菌群结构和组成产生了影响。 采用线性判别分析（linear discriminant analysis effect size，LEfSe）方法对组间微生物物种的富集情况进行对比。在保元汤及相态组中显著富集的物种为Evtepia、Akkermansia等。此外，基于OTU的热图显示，给药组的菌群结构更接近对照组，而模型组的菌群组成与其他组不同（图11-C～E）。表明保元汤和BD-N改变了疲劳大鼠的肠道菌群。 3.4  代谢组学分析结果 火山图显示保元汤给药显著改变了模型组的代谢特征，保元汤组与BD-N组干预效果相似。此外，采用PCA将代谢物变量转换成新的特征变量，并以R2X（模型的可解释度）为参数对模型进行交叉验证，R2X均高于0.5（图13）。 如图14-A所示，模型组vs对照组共鉴定出232个差异代谢物，其中149个上调，83个下调。根据差异物质筛选结果，对各组之间的差异物质数量进行统计分析和可视化，如图14-B所示，正、负离子模式下共有45个代谢物为各组共有差异物质。与对照组比较，模型组血清中LysoPC(22∶6(4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)/0∶0)、LysoPC(22∶4(7Z, 10Z,13Z,16Z)/0∶0)、LysoPC(20∶2(11Z,14Z)/0∶0)水平明显下降，L-乙酰肉碱、2-羟基-5-辛烯酰肉碱、硬脂酰-L-肉碱水平显著增加；经保元汤及BD-N干预后，以上差异代谢物水平均显著回调，趋近于或恢复到对照组水平。PCA和PLS-DA结果（图14-C～F）显示，模型组与对照组及给药组分离良好，对照组更接近给药组。图14-G显示了对照组和模型组中不同代谢物的相反趋势。KEGG通路富集分析（图14-H）显示，涉及的代谢途径包括花生四烯酸代谢途径、胆汁分泌、氨基酸生物合成、ABC转运体、维生素的消化和吸收、脂肪酸β-氧化等信号通路。以上结果表明，保元汤可能通过花生四烯酸代谢途径缓解疲劳，显著的差异血清代谢物可能是保元汤改善疲劳的潜在生物标志物。 3.5  转录组学分析结果 如图15-A～D所示，与对照组比较，模型组共鉴定出1 588个差异表达基因（上调785个，下调803个）；与模型组比较，保元汤组、BD-N组和BD-P组分别筛选出1 511个（上调805、下调706），714个（上调396、下调318）和756个（上调445、下调311）差异基因。PCA与CA热图（图15-E、F）显示，各组基因表达差异显著，组间区分良好。对对照组vs模型组、模型组vs保元汤组、模型组vs BD-N组及模型组vs BD-P组的差异表达基因分别进行叠加分析并绘制Venn图（图15-G），发现共有差异基因分别为910、472和452个。进一步交叉比对3组结果，分别鉴定出341、327和348个与疲劳相关的基因，这些基因可能是保元汤、BD-N和BD-P抗疲劳的潜在作用靶点。 GO富集分析结果显示，各组的差异表达基因主要表现在生物过程层面，涉及对有机物质的反应、生物过程的正调控等；KEGG通路富集分析结果显示，各组的差异表达基因显著富集于过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator activated receptor，PPAR）信号通路（图16）。 3.6 qRT-PCR验证差异基因表达 利用qRT-PCR检测各给药组对大鼠肝脏中4种差异基因（Gck、Ackr3、Pde4b、Ppp1r3b）mRNA表达的影响。如图17所示，与对照组比较，模型组大鼠肝脏中Pde4b的mRNA表达水平显著升高（P＜0.001），Gck、Ackr3、Ppp1r3b的mRNA表达水平呈降低趋势；与模型组比较，各给药组Pde4b的mRNA表达水平显著降低（P＜0.001），BD-N组和BD-P组Gck的mRNA表达水平显著升高（P＜0.001），保元汤组、BD-N组和BD-P组Ackr3的mRNA表达水平显著升高（P＜0.05、0.001），保元汤组和BD-P组Ppp1r3b的mRNA表达水平显著升高（P＜0.05、0.001）。表明保元汤及其各相态可能通过调控疲劳基因的表达参与能量代谢、炎症损伤过程。 3.7  微生物-代谢-转录的联合分析 整合代谢组、转录组与16S rRNA测序数据，进行Spearman相关性分析，构建“肠道菌群-宿主代谢-基因调控”的通路，探讨保元汤及相态抗疲劳作用的潜在机制。如图18所示，硬脂酰-L-肉碱是连接肠道菌群紊乱与宿主代谢-免疫失调的关键节点，其在模型组中水平升高，与Afm、Alb等炎症相关基因表达呈正相关，与Oscillospiraceae等有益菌呈负相关。表明硬脂酰-L-肉碱积累导致慢性炎症，进而引发疲劳感。 4  讨论 中药复方在煎煮过程中因大量成分从饮片中溶出后存在分子剧烈运动，产生自组装或聚集现象，形成溶液、纳米、沉淀等多种相态共存的汤液。不同相态所表现出的化学组成、物理状态及药效作用均有不同。而中药汤剂在临床中多为煎煮后直接服用，对于和补益气类汤剂应温服[29]。因此，本研究从相态角度出发，对保元汤进行不同相态拆分、成分分析、含量测定及活性评价，关联汤液相态与药效作用的关系，并为“温服”服用方法提供理论依据。同时，利用多组学手段分析各相态与全方的潜在机制关系。 在活性相态筛选的研究中，利用离心-透析的方法获得不同相态。结合各相态的理化性质，真溶液中极少量存在保元汤物质基础，并结合已发表的研究，中药复方起效部位多存在与纳米相态与沉淀相态中，故而，在本实验设计时未将真溶液相态的药效贡献考虑在内。药效评价和活性相态筛选证实，保元汤可以改善疲劳模型导致的机体异常，且纳米相为活性相态，但沉淀相并非无效杂质，它是活性成分的另一种存在形式，其形成是复方合煎过程的固有特性。另有研究表明中药复方合煎的自沉淀具有“体外沉积、体内缓释”的特点[15]，表明沉淀相在中药汤剂的研究过程中同样应予以重视。“结构中药学”理论认为中药的化学成分和物理结构共同影响中药的药效物质基础。这一发现不仅明确了保元汤的药效，更揭示了其物质基础新的存在形式，相较于传统药效物质基础的研究仅关注小分子化学成分，而忽略分子间相互作用形成的聚集体，本研究为后续药效物质基础的研究提供了新思路。 多组学研究中，模型组Oscillospiraceae等有益菌丰度下降，可能导致有益菌产生的短链脂肪酸减少，肠道屏障功能受损，脂肪酸代谢受阻，进而影响宿主的能量代谢，而硬脂酰-L-肉碱在血液中堆积则标志着线粒体脂肪酸β-氧化受阻，同时Afm、Alb等炎症基因表达上调，这一过程可能反映出肝脏正处于一种炎症反应状态。硬脂酰-L-肉酰升高不仅是代谢紊乱的直接反映，更可能是肠道-肝轴失衡的产物，肠道中有益菌的减少可能导致短链脂肪酸的不足，进而影响宿主的能量代谢和炎症状态。保元汤及纳米相态潜在机制可能为口服后调节肠道菌群，从而增加乳杆菌属等有益菌属的丰度，进一步通过Afm、Alb、Scd、Fads2、Plin2等基因调控脂质代谢改善失衡引起的能量代谢和炎症，从而提高疲劳大鼠的运动能力，相态及全方均能通过上述机制发挥作用，推测物理相态本身可能不产生新的机制，但通过影响药效物质的含量及存在形态，最终决定药效的强弱。本研究有望为保元汤改善运动诱导的疲劳提供新的理论依据。 目前，关于中药汤液的活性相态研究多集中于药效评价阶段，而关于复方中具体如何形成聚集体的研究还鲜有报道。结合已有文献推测，保元汤中黄芪、人参多糖以及生姜中的淀粉等大分子在煎煮时溶出，使汤液成为胶体体系，在冷却静置过程中，能将产生的微细沉淀物有效地捕获、吸附并包裹，形成肉眼可见的絮状沉淀；生物碱类物质由于多芳环结构与肉桂酸及其衍生物进行自组装。黄酮类与醌类物质主要依赖于氢键作用、疏水作用和π-π堆积作用[30-32]；有机酸类及生物碱类成分在煎煮过程中可能发生聚合、酸碱中和等化学反应生成不溶性分子复合物或沉淀，形成本研究中沉淀相。结合不同相态的缓解疲劳作用强度及主要成分分布呈正相关关系推测，沉淀相的产生可能涉及2方面：一方面，可能与成分间发生酸碱反应，产生不可溶沉淀有关；另一方面，原本经过煎煮均匀分布在溶液中的纳米粒子可能由于温度的变化，导致溶解度改变，使其析出，产生沉淀[33]。该发现为阐明保元汤沉淀相态的形成机制提供了新视角。同时，结合放置后沉淀相态的产生及其药理作用的研究结果，也从相态角度为和补益气类中药“温服”服用方法提供理论依据。后续将进一步筛选聚焦关键成分（如生物碱与黄芪多糖/黄酮等），并对上述关键成分的自组装形成机制进行研究，这将有助于从物相角度揭示保元汤的物质基础。 综上，保元汤能有效缓解运动性疲劳，其核心药效物质存在于纳米相。通过梯度离心-透析法成功将保元汤拆分为纳米相、沉淀相和真溶液3个相态，各相态理化性质（粒径、PDI、电位、TEM、化学成分）存在显著差异。药效学评价表明，全方汤剂疗效最优，纳米相药效显著优于其他相态及阳性药组，是发挥缓解疲劳作用的核心活性相态，沉淀相表现出的缓解作用表明，沉淀物并非无效成分，相反，其中含有一定比例的活性成分。该结果为中药复方物质基础研究、中药复方的应用合理性提供新视角。后续研究拟采用分子动力学模拟预测保元汤纳米相中活性聚集体的形成机制及沉淀相的成因，并通过实验进行验证。此外，鉴于糖类及蛋白类成分在沉淀相中占比较高，在后续研究中应纳入考虑。 利益冲突  所有作者均声明不存在利益冲突 参考文献（略） 来  源：李春雨，柴渊鲲，韩欣燃，郝鑫洋，李军鸽，邱智东，贾艾玲．经典名方保元汤相态拆分及其对大鼠运动性疲劳缓解作用的有效相态筛选  [J]. 中草药, 2026, 57(10): 3831-3847. END 文章内容仅供思路参考，不代表本刊观点，非中医药专业人员请勿试药 文章来源：中草药杂志社，本草全球转载仅为传播行业信息，不做商业用途。若转载不当，请联系：28331285@163.com删除，感谢原作者的辛劳付出。文中插入广告与本公众号无关。 本草全球服务内容  包括但不限于:  中药新药、经典名方、配方颗粒、中药CMC、美国FDA IND、中药保护品种临床试验申报、中药上市再评价、药物经济学评价、新药研发及中药类注册备案全过程咨询与委托服务;可为有关单位疑难问题提供解决方案与技术支持、开展内训等服务。凡提交至本草全球的疑难问题,均可协助解决。  联系人:田先生 13801667235